体細胞突然変異の導入制御におけるBcl6の機能

• 研究課題/領域番号: 18390149
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 免疫学
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 徳久 剛史 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (20134364)
• 研究分担者: 幡野 雅彦 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (20208523) ; 有馬 雅史 千葉大学, 大学院・医学研究院, 講師 (00202763) ; 坂本 明美 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教 (90359597) ; 藤村 理紗 千葉大学, バイオメディカル研究センター, 助教 (30376363)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 16,720千円 (直接経費: 14,800千円、間接経費: 1,920千円); 2007年度: 8,320千円 (直接経費: 6,400千円、間接経費: 1,920千円); 2006年度: 8,400千円 (直接経費: 8,400千円)
• キーワード: 免疫学 / 遺伝子 / 癌 / ゲノム / 発現制御

研究概要

Bcl6の体細胞突然変異導入における機能を明らかにする目的で、Bcl6欠損B細胞のIg遺伝子のスイッチ領域の体細胞突然変異を詳細に解析した。その結果、刺激前のBcl6欠損B細胞ですでにスイッチ領域に体細胞突然変異が高頻度に見られ、IgG1ヘクラススイッチを誘導することにより、その頻度が倍加することを見出した。またBcl6欠損B細胞においてc-Myc遺伝子の体細胞突然変異を解析したところ、その頻度が正常B細胞と比較して著しく高くなっていることを見出した。そしてAdenine(A)からGuanine(G)への変異頻度が異常に上昇していたことから、RNAにおいてAからG(Inosine)への変異を誘導するAdenosine deaminase活性をもつ遺伝子の発現を解析したところ、Adenosine deaminase acting on RNA1(ADAR1)遺伝子がBcl6の標的遺伝子であることを見出した。さらにADAR1を正常B細胞に過剰発現させるとIg遺伝子のスイッチ領域やc-Myc領域でのAからGへの体細胞突然変異が著しく増加することを見出した。
次ぎにBcl6のIgクラススイッチと体細胞突然変異の導入抑制機序を解析しようとして、In vitro系を用いて成熟B細胞を抗JgM抗体と抗CD40抗体とIL-4やIL-21で刺激した後、IgG1へのクラススイッチや細胞増殖能を解析した。その結果、培養2日目にIL-21を追加刺激するとIgG1へのクラススイッチや細胞増殖能が著しく高まることを見出した。さらに、IL-4の刺激によりCXCR4陽性のcentroblastタイプの胚中心B細胞が、またIL-21の刺激によりCXCR4陰性のcentrocyteタイプの胚中心B細胞が選択的に分化増殖してくることを見出した。Bcl6欠損B細胞では、IL-4の刺激によりCXCR4陽性のcentroblastタイプの胚中心B細胞の分化増殖は見られず、CXCR4陰性のcentrocyteタイプの胚中心B細胞が選択的に増殖した。これらの結果から、Bcl6はCXCR4陽性のcentroblastタイプの胚中心B細胞の分化増殖に必須であることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] A distinct role for lL-4 and lL-21 in their collaboration on proliferation and differentiation of activated B cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Saito, et al.
  • 雑誌名: Immunobiol. (印刷中)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] A distinct role for IL-4 and IL-21 in their collaboration on proliferation and differentiation of activated B cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Saito, T., Kitayama, D., Sakamoto, A., Tsuruoka, N., Arima, M., Hatano, M., Miyazaki, M., and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: Immunobiol. (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A role for Bcl6 in sequential class switch recombination to IgE in B cells stimulated with IL-4 and IL-21 (2008)
  • 著者名/発表者名: Kitayma, et. al.
  • 雑誌名: Mol.Immunol 45 ページ: 1337-1345
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of the consensus DNA sequence for Nczf-binding. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kitahashi, et al.
  • 雑誌名: DNA and Cell Biol. 26 ページ: 395-401
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] A role for Bc16 in sequential class switch recombination to IgE in B cells stimulated with IL-4 and IL-21 (2007)
  • 著者名/発表者名: Kitayama, et al.
  • 雑誌名: Mol. Immunol. 45 ページ: 1337-1345
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bc16 protects apoptosis of naive B cells stimulated with IL-21. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsuruoka, et al.
  • 雑誌名: Immunol. Lett 110 ページ: 145-151
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bc16 is essential for the generation of long-term memory CD4^+ T cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ichii, et al.
  • 雑誌名: Int. Immunol. 19 ページ: 427-433
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bcl6 is essential for the generation of long-term memory CD4^+ T cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Ichii, H., Sakamoto, A., Arima, M., Hatano, H., Kuroda, Y., and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: Int. Immunol. 19 ページ: 427-433
  • NAID: 10020110313
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Bc16 protects apoptosis of naive B cells stimulated with IL-21 (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsuruoka, N., Arima, M., Arguni, E., Saito, T., Kitayama, D., Sakamoto,A., Hatano, M., and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: Immunol. Lett. 110 ページ: 145-151
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] A role for Bc16 in sequential class switch recombination to IgE in B cells stimulated with IL-4 and IL-21 (2007)
  • 著者名/発表者名: Kitayama, D., Sakamoto, A., Arima, M., Hatano, M., Miyazaki, M., and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: Mol. Immunol. 45 ページ: 1337-1345
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Identification of the consensus DNA sequence for Nczf-binding (2007)
  • 著者名/発表者名: Kitahashi, M., Sato, Y, Fujimura, L., Arima, M., Sakamoto, A., Yamamoto, S., Tokuhisa, T., and Hatano, H.
  • 雑誌名: DNA and Cell Biol. 26 ページ: 395-401
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Bcl6 is essential for the generation of long-term memory CD4^+ T cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Ichii, et. al.
  • 雑誌名: Int.Immunol 19 ページ: 427-433
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bcl6 protects apoptosis of naive B cells stimulated with IL-21 (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsuruoka, et. al.
  • 雑誌名: Immunol.Lett 110 ページ: 145-151
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of Nd1, a novel Kelch family protein, in the heart of transgenic mice protects against doxorubicin-induced cardiomyopathy. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsudo, et al.
  • 雑誌名: Transgenic Research 15 ページ: 573-581
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bc16 controls Granzyme B expression in effector CD8 T cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, et al.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 36 ページ: 3146-3156
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of the Nd1 gene is down-regulated by doxorubicin at post-transcriptional level (2006)
  • 著者名/発表者名: Takamori, Y., et al.
  • 雑誌名: Int. J. Mol. Med. 18 ページ: 963-967
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lung-specific expression of IL-25 enhances allergic airway inflammati on by amplifying a Th2 cell-dependent pathway. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tamachi, T., et al.
  • 雑誌名: J. Allergy Clin. Immunol. 118 ページ: 606-614
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] JunD/AP-1 and STAT3 are the major enhancer molecules for high Bc16 expression in germinal center B cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Arguni, E., et al.
  • 雑誌名: Int. Immunol. 18 ページ: 1079-1089
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of Clastl in differentiation of cerebellar granule cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Maeda, Y., et al.
  • 雑誌名: Brain Res. 1104 ページ: 18-26
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] JunD/AP-1 and STAT3 are the major enhancer molecules for high Bc16 expression in germinal center B cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Arguni, E., Arima, M., Tsuruoka, N., Sakamoto, A., Hatano, M., and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: Int. Immunol. 18 ページ: 1079-1089
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Lung-specific expression of IL-25 enhances allergic airway inflammation by amplifying a Th2 cell-dependent pathway (2006)
  • 著者名/発表者名: Tamachi, T., Maezawa, Y., Ikeda, K., Kagami, S., Hatano, M., Seto, Y., Suto, A., Suzuki, K., Watanabe, N., Saito, Y., Tokuhisa, T., Iwamoto, I., and Nakajima, H.
  • 雑誌名: J. Allergy Clin. Immunol. 118 ページ: 606-614
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Bc16 controls Granzyme B expression in effector CD8 T cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, K., Sakamoto, A., Yamashita, K., Arguni, E., Horigome, S., Arima, M., Hatano, M., Seki, N., Ichikawa, T., and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 36 ページ: 3146-3156
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Expression of the Ndl gene is down-regulated by doxorubicin at post-transcriptional level (2006)
  • 著者名/発表者名: Takamori, Y., Matsudo, Y., Fujimura, L., Kang, M., Harada, Y, Moriya, H., Tokuhisa, T., and Hatano, M.
  • 雑誌名: Int. J. Mol. Med. 18 ページ: 963-967
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Role of Clastl in differentiation of cerebellar granule cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Maeda, Y, Fujimura, L., O-Wang, J., Hatano, M., Sakamoto,A., Arima, M., Ebara, M., Ino, H., Yamashita, T., Saisho, H., and Tokuhisa, T.
  • 雑誌名: Brain Res. 1104 ページ: 18-26
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Overexpression of Ndl, a novel Kelch family protein, in the heart of transgenic mice protects against doxorubicin-induced cardiomyopathy (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsudo, Y., Takamori, Y., Sasagawa, K., Fujimura, L., Komuro, I., Tokuhisa, T., and Hatano, M.
  • 雑誌名: Transgenic Research 15 ページ: 573-581
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Bc16 controls Granzyme B expression in effector CD8 T cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoshida, K., et al.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 36 ページ: 3146-3156
• [雑誌論文] Expression of the Ndl gene is down-regulated by doxorubicin at post-transcriptional level. (2006)
  • 著者名/発表者名: Takamori, Y., et al.
  • 雑誌名: Int. J. Mol. Med. 18 ページ: 963-967
• [雑誌論文] Lung-specific expression of IL-25 enhances allergic airway inflammation by amplifying a Th2 cell-dependent pathway. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tamachi, T., et al.
  • 雑誌名: J. Allergy Clin. Immunol. 118 ページ: 606-614
• [雑誌論文] Role of Clast1 in differentiation of cerebellar of granule cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Maeda, Y., et al.
  • 雑誌名: Brain Res. 1104 ページ: 18-26
• [雑誌論文] Role of DNA polymerase theta in tolerance of endogenous and exogenous DNA damage in mouse B cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ukai, A., et al.
  • 雑誌名: Genes Cells 11 ページ: 111-121
• [学会発表] A Role for Bc16 in B Cells Activated with Sequential Stimulation of IL-4 and IL-21 (2008)
  • 著者名/発表者名: 徳久剛史、他
  • 学会等名: 第36回日本免疫学会
  • 発表場所: 大阪
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Bc16 protects apoptosis of naive B cells stimulated withIL-21 (2007)
  • 著者名/発表者名: 鶴岡 信栄, 他
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-11-20
• [学会発表] Bc16 protects apoptosis of naive B cells stimulated with IL-21 (2007)
  • 著者名/発表者名: 鶴岡信栄、他
  • 学会等名: 第37回日本免疫学会
  • 発表場所: 東京
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Bc16 protects apoptosis of naive B cells stimulated with IL-21 (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsuruoka, N., Tokuhisa, T., et. al.
  • 学会等名: 37h Japanese Society for Immunology
  • 発表場所: Tokyo
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] A Role for Bcl6 in B Cells Activated with Sequential Stimulation of IL-4 and IL-21 (2006)
  • 著者名/発表者名: Tokuhisa, T., Kitayama, D., Tsuruoka, N., Saito, T., Sakamoto,A., Arima, M., and Hatano, M.
  • 学会等名: 36th Japanese Society for Immunology
  • 発表場所: Osaka
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [備考] 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • URL: http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/devgen/
• [備考]
  • URL: http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/devgen/