| 研究課題/領域番号 |
18390280
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
血液内科学
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
水谷 修紀 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60126175)
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| 研究分担者 |
渡邊 文晶 (渡辺 文晶 / 渡邉 文晶) 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 特任助教 (20376750)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
17,750千円 (直接経費: 15,500千円、間接経費: 2,250千円)
2007年度: 9,750千円 (直接経費: 7,500千円、間接経費: 2,250千円)
2006年度: 8,000千円 (直接経費: 8,000千円)
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| キーワード | ATM / siRNA / XPA / XAB2 / Topo II阻害剤 / ATM inhibitor / CD34 / NOG scid / 細胞周期 / チェックポイント / DNA損傷 |
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| 研究概要 |
トポイソメラーゼ阻害剤により2次生白血病が発生することが知られているが、ゲノム安定性維持機構の破綻を遺伝的背景として2次性白血病に関連する染色体転座が発生することを明らかにし、それをin vitroで臍帯血を用いて再現することが重要である。そのために臍帯血から造血幹細胞を単離する技術にあわせて、幹細胞におけるATMを選択的に阻害する技術の確立が必要である。ATM機能の選択的阻害を誘導する方法としてレンチウイルスベクターを用いたATMのsiRNAの系について検討を加えた。実施することが可能になった。、ATMのsiRNASを組み込んだレンチウイルスを作成し、U20S細胞への感染後ATMの抑制効果を検討した。その結果十分な抑制効果が得られる事を確認した。この系を用い未分化造血幹細胞におけるゲノム不安定生の研究をむと考えられた、残りの4検体はCD34+CD20+CD45+で実施することが可能になった。
濟帯血バンクから入手した28の臍帯血を用いて多次元フローサイトメータによる異常な分画保有検体9検体を確認した。そのうち5検体はCD34+CD7+CD45w+のNK前駆細胞を含むと考えられた、残りの4検体はCD34+CD20+CD45+で所属不明の分画を有していた。CD34+CD20+CD45+の分画をフローサイトメータにより分取し、DNAを抽出した後、高精細度ゲノムアレーにより染色体転座などの異常の解析を実施している。
Xerodermia Pigmentosusm A結合蛋白としてXAB2を同定した。XAB2はN-Cor等と複合体を作って転写corepressorとして機能する。細胞の未分化性の維持や染色体転座にも関与していることが予想され、今後臍帯血等における未分化造血細胞での発現状況を解析する段階である。
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