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ラットの運動に伴う活性酸素・活性窒素によるタンパク質修飾のプロテオミクス解析

研究課題

研究課題/領域番号 18500514
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 スポーツ科学
研究機関順天堂大学

研究代表者

山倉 文幸  順天堂大学, 医療看護学部, 教授 (20053358)

研究分担者 内藤 久士  順天堂大学, スポーツ健康科学部, 准教授 (70188861)
高 ひかり  順天堂大学大学院, 医学研究科, 助教 (60338374)
池田 啓一  順天堂大学, スポーツ健康科学部, 助教 (90453597)
研究協力者 安田 従生  順天堂大学, 大学院・スポートロジーセンター, 研究支援者
研究期間 (年度) 2006 – 2008
研究課題ステータス 完了 (2008年度)
配分額 *注記
4,130千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 630千円)
2008年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2007年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2006年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
キーワード活性酸素 / 一酸化窒素 / プロテオミクス / ラット / 運動 / ニトロ化ストレス / 自発運動トレーニング / 自然発症高血圧ラット / プロテオーム / 酸化修飾 / 活性窒素
研究概要

(1) 我々が開発した新規ニトロ化ストレスマーカーである6-ニトロトリプトファンのマーカーとしての有効性を確立するために、炎症惹起ラットで特異的抗体とLC-MS/MSにより検出したところ、Triosephosphate isomerase、Malate dehydrogenaseなどが候補タンパク質として上がった。
(2) 一方、心臓ミトコンドリア、大動脈血管核画分のニトロチロシンが25週齢の自然発症高血圧ラットの非運動群で増加し、10週間の自発運動トレーニング群では減少した。一方、両組織の運動群のミトコンドリアでMnSODが特異的に上昇していたので、これがニトロチロシン生成の抑制に関与すると推定された。大脳皮質の各画分のニトロチロシンも測定したが、顕著な違いは見られなかった。現在、25週齢心臓のミトコンドリア画分を用いて、ニトロチロシン修飾タンパク質をLC-MS/MSを用いたプロテオミクス解析で検討している。大動脈血管においては、ミトコンドリアのMnSOD量、活性とも25週齢で減少し運動群で上昇するという、これも心臓類似の結果を得た。

報告書

(4件)
  • 2008 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2007 実績報告書
  • 2006 実績報告書
  • 研究成果

    (36件)

すべて 2008 2007 2006

すべて 雑誌論文 (13件) (うち査読あり 11件) 学会発表 (20件) 図書 (3件)

  • [雑誌論文] 高血圧発症後の持久的運動トレーニングが自然発症高血圧ラット心臓のニトロ化ストレスに及ぼす影響2008

    • 著者名/発表者名
      古川覚, 木村博子, 向田政博, 山倉文幸, 神野宏司, 池田啓一
    • 雑誌名

      順天堂医学 54

      ページ: 308-317

    • NAID

      110007125435

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Ascaris suum cytoshorome b5, an adult-specific secretory protein reducing oxygen-avid ferric hemoglobin2008

    • 著者名/発表者名
      Hashimoto M, 他6名
    • 雑誌名

      Archives Biochemistry Biophysics 471

      ページ: 42-49

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Diazotization of kynurenine by acidified nitrite secreted from indoleamine 2, 3-dioxygenase-expressing myeloid dendritic cells2008

    • 著者名/発表者名
      Hara T, 他6名
    • 雑誌名

      Journal Immunological Methods 332

      ページ: 162-169

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 高血圧発症後の持久的運動トレーニングが自然発症高血圧ラット心臓のニトロ化ストレスに及ぼす影響2008

    • 著者名/発表者名
      古川 覚, 他5名
    • 雑誌名

      順天堂医学 54

      ページ: 308-317

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Antimicrobial action of histone H"B in Escherichia coli : Evidence for membrane translocation and DNA-binding of a histone H"B fragment after proteolytic cleavage by outer membrane proteinase T2008

    • 著者名/発表者名
      Kawasaki H, 他4名
    • 雑誌名

      Biochimie 90

      ページ: 1693-1702

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] In vitro preparation of iron-substituted human manganese superoxide dismutase : possible toxic properties for mitochondria2007

    • 著者名/発表者名
      Yamakura F, Kobayashi K, Furukawa S, Suzuki Y.
    • 雑誌名

      Free Radic Biol Med 43(3)

      ページ: 423-430

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of 6-nitrotryptophan in proteins by Western blot analysis and its application for peroxynitrite^treated PC 12 cells2007

    • 著者名/発表者名
      Ikeda K, Yukihiro Hiraoka B, Iwai H, Matsumoto T, Mineki R, Taka H, Takamori K, Ogawa H, Yamakura F.
    • 雑誌名

      Nitric Oxide 16(1)

      ページ: 18-28

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of 6-nitrotryptophan in proteins by western blot analysis and its application for peroxynitrite-treated PC12 cells2007

    • 著者名/発表者名
      Keiichi Ikeda, 他8名
    • 雑誌名

      Nitric Oxide:Biology and Chemistry 16

      ページ: 18-28

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] In vitro preparation of iron-substituted manganese superoxide dismutase:possible toxic properties for mitochondria2007

    • 著者名/発表者名
      Fumiyuki Yamakura, 他3名
    • 雑誌名

      Free Radical Biology and Medicine 43

      ページ: 423-430

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Detection of 6-nitrotryptophan in proteins by Western blot analysis and its application for peroxynitrite-treated PC12 calls2007

    • 著者名/発表者名
      Keiichi Ikeda, B.Yukihiro Hiraoka, Hideaki Iwai, Takashi Matsumoto, Naoki Shida Reiko Mineki, Hikari Taka, Kenji Takamori, Hideoki Ogawa, Fumiyuki Yamakura
    • 雑誌名

      Nitric Oxide : Biology and Chemistry 16

      ページ: 18-26

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Effects of substrate analoges and pH on manganese superoxide dismutase2006

    • 著者名/発表者名
      Leandro C. Tabares, Nestor Cortez, B. Hiraoka, Y, Yamakura F, and Un S
    • 雑誌名

      Biochemistry 45

      ページ: 1919-1929

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Modification of tryptophan and tryptophan residues in proteins by reactive nitrogen species2006

    • 著者名/発表者名
      Yamakura F, Ikeda K
    • 雑誌名

      Nitric Oxide, invited review 14

      ページ: 152-161

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Modification of tryptophan and tryptophan residues in proteins by reactive nitrogen species (Review)2006

    • 著者名/発表者名
      Fumiyuki Yamakura, Keiichi Ikeda
    • 雑誌名

      Nitric Oxide : Biology and Chemistry 14

      ページ: 152-161

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [学会発表] トリプトファン誘導体の構造とIDO転写調節機能との相関2008

    • 著者名/発表者名
      岡本威明, 他5名
    • 学会等名
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
    • 発表場所
      神戸、兵庫
    • 年月日
      2008-12-13
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 各種生体物質のperoxynitriteとの反応性- トリプトファンとの反応性を中心として2008

    • 著者名/発表者名
      川崎広明, 他4名
    • 学会等名
      日本トリプトファン研究会第30回学術集会
    • 発表場所
      川崎医科大学、倉敷
    • 年月日
      2008-12-08
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 高血圧発症後の運動トレーニングは有効か? -自然発症高血圧ラツト心臓におけるニトロ化ストレスの抑制-2008

    • 著者名/発表者名
      古川覚, 他6名
    • 学会等名
      第6回日本予防医学会学術総会
    • 発表場所
      東京医科大学、東京
    • 年月日
      2008-11-30
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 新しいタンパク質ニトロ化の指標としての6-ニトロトリプトファン、(招待講演)2008

    • 著者名/発表者名
      山倉文幸、池田啓一
    • 学会等名
      第8回日本NO学会学術集会
    • 発表場所
      仙台、仙台国際センター
    • 年月日
      2008-05-09
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 新しいタンパク質ニトロ化の指標としての6-ニトロトリプトフアン2008

    • 著者名/発表者名
      山倉 文幸
    • 学会等名
      第8回日本NO学会学術集会 (シンポジュム)
    • 発表場所
      仙台、仙台国際センタ
    • 年月日
      2008-05-09
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 高血圧発症後の持久的運動トレーニングによる自然発症高血圧ラット心臓におけるニトロ化ストレスの軽減」2008

    • 著者名/発表者名
      古川覚, 安田従生, 木村博子, 向田政博, 宮下愛未, 川崎広明, 山倉文幸
    • 学会等名
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会)
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 高血圧発症後の運動トレーニングは有効か?-自然発症高血圧ラット心臓におけるニトロ化ストレスの抑制-2008

    • 著者名/発表者名
      古川覚、木村博子、向田政博、山倉文幸、神野宏司、池田啓一、安田従生
    • 学会等名
      第6回日本予防医学会学術総会
    • 発表場所
      東京医科大学、東京
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 間違ってFeが入ったヒトMnSODはミトコンドリアに酸化傷害を引き起こす-in vitro study2007

    • 著者名/発表者名
      山倉 文幸, 他2名
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会、第50回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川)
    • 年月日
      2007-12-10
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 新しい生体ニトロ化修飾の指標としての6-ニトロトリプトファン(招待講演)2007

    • 著者名/発表者名
      山倉 文幸
    • 学会等名
      日本トリプトファン研究会第29回学術集会
    • 発表場所
      昭和女子大学(東京)
    • 年月日
      2007-12-08
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] LPS投与ラット臓器中の6-ニトロトリプトファン含有タンパク質の特異的抗体を用いた解析2007

    • 著者名/発表者名
      池田 啓一, 他8名
    • 学会等名
      第29回日本フリーラジカル学会学術集会・日本過酸化脂質フリーラジカル学会第31回大会合同学会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場(愛知)
    • 年月日
      2007-06-09
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 敗血症モデルラットにおける6-ニトロトリプトファン含有タンパク質の解析2007

    • 著者名/発表者名
      池田 啓一, 他7名
    • 学会等名
      第7回日本NO学会学術集会
    • 発表場所
      ピアザ淡海(滋賀)
    • 年月日
      2007-05-17
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] HPLC-多チャンネル電気化学検出器による6-ニトロトリプトファンの定量とヒト血清への応用2007

    • 著者名/発表者名
      韓 浩先, 他5名
    • 学会等名
      第7回日本NO学会学術集会
    • 発表場所
      ピアザ淡海(滋賀)
    • 年月日
      2007-05-17
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] LPS投与ラット臓器中の6-ニトロトリプトファン含有タンパク質の特異的抗体を用いた解析2007

    • 著者名/発表者名
      池田啓一、神野宏司、内藤久士、古川覚、松本孝、岩井秀明、高森建二、小川秀興、山倉文幸
    • 学会等名
      第29回日本フリーラジカル学会学術集会・日本過酸化脂質フリーラジカル学会第31回大会合同学会-プログラム・抄録集
    • 発表場所
      名古屋国際会議場(愛知)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 敗血症モデルラットにおける6-ニトロトリプトファン含有タンパク質の解析2007

    • 著者名/発表者名
      池田啓一、神野宏司、内藤久士、古川覚、高森建二、小川秀興、山倉文幸
    • 学会等名
      第7回日本NO学会学術集会プログラム抄録集
    • 発表場所
      ピアザ淡海(滋賀)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 新しい生体ニトロ化修飾の指標としての6-ニトロトリプトファン2007

    • 著者名/発表者名
      山倉文幸
    • 学会等名
      日本トリプトファン研究会第29回学術集会、プログラム
    • 発表場所
      昭和女子大学(東京)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Identification of immunoreactive proteins in ONOO-treated PC12 cells by using affinity-purified anti-6-nitrotryptophan antibody2006

    • 著者名/発表者名
      Ikeda K, Hiraoka BY, Matsumoto T, Mineki R, Taka H, Shida N, Amamiya Y, Takamori K, Ohmori D, Yamakura F
    • 学会等名
      20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology and 11th FAOBMB Congress
    • 発表場所
      Kyoto, Japan
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Formation of 6-nitrotryptophan in purified proteins by reactive nitrogen species : a possible new biomarker2006

    • 著者名/発表者名
      Yamakura F, Ikeda K, Matsumoto T, Taka H, Kaga N
    • 学会等名
      11th Meeting of the International Study Group of Tryptophan Research-2006 (ISTRY-2006 Tokyo), Program and Abstracts
    • 発表場所
      Sanjyo-Kaikan, Tokyo, Japan
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Proteomic analysis of 6-nitrotryptophan-containing proteins in peroxynitrite-treated pc12 cells2006

    • 著者名/発表者名
      Ikeda K, Iwai H, Matsumoto T, Mineki R, Taka H, Takamori K, Ogawa H Yamakura F
    • 学会等名
      11th Meeting of the International Study Group of Tryptophan Research-2006 (ISTRY-2006 Tokyo), Program and Abstracts
    • 発表場所
      Sanjyo-Kaikan, Tokyo, Japan
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] パーオキシナイトライト処理PC12細胞における6-ニトロトリプトファン免疫反応タンパク質の同定2006

    • 著者名/発表者名
      池田啓一、岩井秀明、松本孝、峯木礼子、高ひかり、高森建二、山倉文幸
    • 学会等名
      第6回日本NO学会学術集会-プログラム・抄録集-
    • 発表場所
      シェーンバッハ・サボー(東京)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] HPLC-電気化学検出器によるヒト血清中6-ニトロトリプトファンの検出2006

    • 著者名/発表者名
      嶋田武、池田啓一、岩井秀明、信太直己、加納達二、松田繁、河合祥雄、形本静夫、山倉文幸
    • 学会等名
      第4回日本予防医学会学術総会
    • 発表場所
      大宮ソニックシティ(埼玉)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [図書] "Formation of 6-Nitrotryptophan in purified proteins by reactive nitrogen species : a possible new biomarker" in International Congress Series 13042007

    • 著者名/発表者名
      Yamakura F, Ikeda, I Matsumoto T, Taka H, Kaga N
    • 出版者
      Elsevier
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [図書] "Proteomic analysis of 6-nitrotryptophan containing proteins in peroxynitrite-treated pc12 cells" in International Congress Series 13042007

    • 著者名/発表者名
      Ikeda K, Iwai H, Matsumoto T, Mineki R, Taka, H Takamori K Ogawa H, and Yamakura F
    • 出版者
      Elsevier
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [図書]2007

    • 著者名/発表者名
      Keiichi Ikeda, 他7名
    • 出版者
      International Congress Series 1304、Proteomic analysis of 6-nitrotryptophan-containingproteins in peroxynitrite-treated pc12 cells
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書

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公開日: 2006-04-01   更新日: 2016-04-21  

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