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生体内イメージングによるメダカ生殖腺形成・性分化過程の可視化

研究課題

研究課題/領域番号 18570064
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 形態・構造
研究機関基礎生物学研究所

研究代表者

斉藤 大助  基礎生物学研究所, 生殖遺伝学研究室, 特別協力研究員 (30390686)

研究期間 (年度) 2006 – 2007
研究課題ステータス 完了 (2007年度)
配分額 *注記
3,340千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 240千円)
2007年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2006年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
キーワード発生・分化 / 生殖腺形成 / 性分化 / メダカ / イメージング
研究概要

本研究はメダカを用いて,生殖腺に特異的に発現する遺伝子について,網羅的にBACトランスジェニック系統を作製し,生殖腺の形成.性分化機構を細胞間の相互作用の連鎖として描き出すことを目指して計画された.平成18年度には,転写因子sox9b,ftz-f1,pod1,性決定遺伝子dmy,ステロイド合成酵素p450cyp17,雄特異的な遺伝子としてdmrt1,雌特異的な遺伝子としてaromataseについてBACトランスジェニック系統を作製した.それぞれの系統について,ホールマウント免疫染色を行い,発現細胞の発現時期および局在を明らかにした.sox9b-EGFP系統についてホールマウント免疫蛍光染色およびin situハイブリダイゼーションにより発現細胞の詳細な解析を行い,未分化生殖腺のsox9b発現細胞が精巣および卵巣の支持細胞系列の共通の前駆細胞であることを明らかにした(Nakamura, et. Al.2007).またsox9b-EGFP系統の生殖細胞系列をDsRedによって一過的にラベルし,共焦点顕微鏡によるタイムラプス記録を行うことで,未分化生殖腺に移動してきた生殖細胞がsox9b発現細胞に取り込まれていく様子を記録することに成功した.さらに,生殖腺形成変異体zenzaiの原因遺伝子について,EGFPをレポーターとした系統,およびEGFPと原因遺伝子の融合タンパク質を発現する系統を作製し,zenzai遺伝子の発現部位および細胞内局在を明らかにした.平成19年度には,新たに,nanos2トランスジェニック系統を作成し解析を行った.また体細胞をラベルしたsox9b-EGFP系統と生殖細胞系列をラベルしたOlvas-DsRed系統を掛け合わせた2重トランスジェニック系統を用い,成魚卵巣において生殖細胞の分裂動態を共焦点顕微鏡によるタイムラプス記録を行い,卵巣における生殖細胞幹細胞の解析を行った(中村他,未発表).生殖腺形成変異体zenzaiの解析においてもsox9b-EGFP系統を用いることで生殖細胞の分裂異常における体細胞との関係を明らかにした(斉藤他,2007).以上,本研究によって魚類の生殖腺形成に関して重要な知見がもたらされた.また今後の解析おいて有用なトランスジェニック系統を多数作成したことでさらなる解析への基盤を堅固なものにしたといえよう.

報告書

(3件)
  • 2007 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2006 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2008 2007 その他

すべて 雑誌論文 (9件) (うち査読あり 5件)

  • [雑誌論文] Sox9b/sox9a2-EGFP transgenic medaka reveals the morphological reorganization of the gonads and a common precursor of both the female and male supportingcells2008

    • 著者名/発表者名
      Shuhei Nakamura, Yumiko Aoki, Daisuke Saito, Yoko Kuroki, Asao Fujiyama, Kiyoshi Naruse, Minoru Tanaka
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development 75

      ページ: 472-476

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Generation of transgenic medaka using modified bacterial artificial chromosome2008

    • 著者名/発表者名
      Shuhei Nakamura, Daisuke Saito, and Minoru Tanaka
    • 雑誌名

      Development, Growth&Differentiation (in press)

    • NAID

      10021097021

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sox9b/sox9a2-EGFP transgenic medaka reveals the morphological reorganizationof the gonads and a common precursor of both the female and male supportingcells.2008

    • 著者名/発表者名
      Shuhei Nakamura, Yumiko Aoki, Daisuke Saito, Yoko Kuroki, Asao Fujiyama, Kiyoshi Naruse, Minoru Tanaka.
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development. 75

      ページ: 472-476

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Generation of transgenic medaka using modified bacterial artificial chromosome2008

    • 著者名/発表者名
      Shuhei Nakamura, Daisuke Saito, and Minoru Tanaka
    • 雑誌名

      Development, Growth&Differentiation In press

    • NAID

      10021097021

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Proliferation of germ cells during gonadal sex differentiation in medaka:Insights from germ cell-depleted mutant zenzai2007

    • 著者名/発表者名
      Daisuke Saito, Chikako Morinaga, Yumiko Aoki, Shuhei Nakamura, Hiroshi Mitani, Makoto Furutani-Seiki, Hisato Kondoh, and Minoru Tanaka
    • 雑誌名

      Developmental Biology 310

      ページ: 280-290

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Proliferation of germ cells during gonadal sex differentiation in medaka : Insights from germ cell-depleted mutant zenzai.2007

    • 著者名/発表者名
      Daisuke Saito, Chikako Morinaga, Yumiko Aoki, Shuhei Nakamura, Hiroshi Mitani, Makoto Furutani-Seiki, Hisato Kondoh, Minoru Tanaka.
    • 雑誌名

      Developmental Biology. 310

      ページ: 280-290

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Proliferation of germ cells during gonadal sex differentiation in medaka:Insights from germ cell-depleted mutant zenzai2007

    • 著者名/発表者名
      Daisuke Saito, Chikako Morinaga, Yumiko Aoki, Shuhei Nakamura, Hiroshi Mitani, Makoto Furutani-Seiki, Hisato Kondoh, and Minoru Tanaka
    • 雑誌名

      Developmental Biology 310

      ページ: 280-290

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sox9b/sox9a2-EGFP transgenic medaka reveals the morphological reorganizationof the gonads and a common precursor of both the female and male supportingcells2007

    • 著者名/発表者名
      Shuhei Nakamura, Yumiko Aoki, Daisuke Saito, Yoko Kuroki, Asao Fujiyama, Kiyoshi Naruse, Minoru Tanaka
    • 雑誌名

      Molecular reproduction and development (in press)

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Generation of transgenic medaka using modified bacterial artificial chromosome.

    • 著者名/発表者名
      Shuhei Nakamura, Daisuke Saito, Minoru Tanaka.
    • 雑誌名

      Development, Growth & Dfferentiation. (in press)

    • NAID

      10021097021

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要

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公開日: 2006-04-01   更新日: 2016-04-21  

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