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hDREFによる細胞周期調節機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 18570185
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 細胞生物学
研究機関兵庫県立大学

研究代表者

廣瀬 富美子 (広瀬 富美子)  兵庫県立大学, 大学院・生命理学研究科, 准教授 (60208882)

研究期間 (年度) 2006 – 2007
研究課題ステータス 完了 (2007年度)
配分額 *注記
4,110千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 510千円)
2007年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
2006年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
キーワード細胞周期 / 転写因子 / ノックダウン / レンチウイルス / hDREF
研究概要

本研究では、細胞増殖に必須な役割を果たす転写調節因子hDREFの細胞周期における作用点とその役割を明らかにすることを目的に、hDREFの標的遺伝子の同定とhDREFをノックダウンしたときに起こる細胞の表現型の詳細な観察を行い、以下のような成果を得た。
(1)hDREF標的遺伝子の同定について
hDREFをノックダウンした細胞で発現に変化のある遺伝子をDNAアレイ解析によって検索し、約200個のhDREFの標的遺伝子候補を得た。これらの遺伝子の中でリボソームたんぱく質をコードする22個の遺伝子がhDREFの主たる標的遺伝子でありかつ、細胞周期を進行させるのに本質的に必要であるかどうかを検証することができた。このことは、hDREFはトータルな細胞内タンパク質合成量を決定する上で重要な役割を担っていることを意味している。今後は、他の候補遺伝子の中で直接hDREFによる発言調節を受ける遺伝子をChIP on chip法などで絞りこむ予定である。
(2)hDREFの細胞周期進行における役割について
初年度の研究により、hDREFをノックダウンするとG2-M期の細胞が蓄積することを明らかにした。これを受けて、G2-M期に起こる時系列的なイベントのうちどのステップがhDREFのノックダウンにより影響を受けるかをウエスタンブロッティングと細胞の免疫蛍光染色により調べた。その結果、hDREFの枯渇は、M期の極初期で染色体の凝縮が始まる以前に細胞周期の停止をもたらすことが判明した。さらに、核膜周辺と核小体周辺でヘテロクロマチン化が亢進されていることを見つけた。このことは、hDREFがクロマチンの高次な構造変換の制御に関与している可能性を示唆している。今後はその分子メカニズムとG2/M期との関係性を明らかにする必要がある

報告書

(3件)
  • 2007 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2006 実績報告書
  • 研究成果

    (31件)

すべて 2008 2007 2006 その他

すべて 雑誌論文 (20件) (うち査読あり 10件) 学会発表 (9件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] Perilipin,a critical regulator of fat storage and breakdown,is a target gene of estrogen receptor-related receptor alpha2008

    • 著者名/発表者名
      Akter MH., et. al.
    • 雑誌名

      Biochem.Biophys.Res. Commun 368

      ページ: 563-568

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The DRE/DREF transcriptional regulatory system:a master key for cell proliferation2008

    • 著者名/発表者名
      Matsukage A., et. al.
    • 雑誌名

      Biochim.Biophys.Acta 1779

      ページ: 81-89

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Perilipin, a critical regulator of fat storage and breakdown, is a target gene of estrogen receptor-related receptor alpha2008

    • 著者名/発表者名
      Akter, MH., et. al.
    • 雑誌名

      Biochem.Biophys.Res, Commun 368

      ページ: 563-568

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The DRE/DREF transcriptional regulatory system : a master key for cell proliferation2008

    • 著者名/発表者名
      Matsukage, A., et. al.
    • 雑誌名

      Biochim, Biophys, Acta 1779

      ページ: 81-89

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] The DRE/DREF transcriptional regulatory system:a master key for cell proliferation2008

    • 著者名/発表者名
      Matsukage A, et. al.
    • 雑誌名

      Biochim.Biophys.Acta 1779

      ページ: 81-89

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Perilipin,a critical regulator of fat storage and breakdown,is a target gene of estrogen receptor-related receptor alpha2008

    • 著者名/発表者名
      Akter MH, et. al.
    • 雑誌名

      Biochem.Biophys.Res.Commun. 368

      ページ: 563-568

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Orphan nuclear receptor Nur77 accelerates the initial phase of adipocyte differentiation in 3T3-L1 cells by promoting mitotic clonal expansion2007

    • 著者名/発表者名
      Fumoto T., et. al.
    • 雑誌名

      J Biochem(Tokyo) 141(2)

      ページ: 181-192

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] hDREF regulates cell proliferation and expression of ribosomal protein genes2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D., et. al.
    • 雑誌名

      Mol.Cell.Biol 27(6)

      ページ: 2003-2013

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Human DNA replication-related element binding factor (hDREF) self-association via hATC domain is necessary for its nuclear accumulation and DNA binding2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D., et. al.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem 282(20)

      ページ: 7563-7575

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] CGI-58 facilitates lipolysis on lipid droplets but is not involved in the vesiculation of lipid droplets caused by hormonal stimulation2007

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T., et. al.
    • 雑誌名

      J Lipid Res 48

      ページ: 1078-1089

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] hDREF regulates cell proliferation and expression of ribosomal protein genes2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D, et. al.
    • 雑誌名

      Mol.Coll.Biol 27

      ページ: 2003-2013

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] Human DNA replication-related element binding factor(hDREF) self-association via hATC domain is necessary for its 'nuclear accumulation and DNA binding2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D, et. al.
    • 雑誌名

      J.Biol, Chem 282

      ページ: 7563-7575

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] CGI-58 facilitates lipolysis on lipid.droplets but is not involved in the vesiculation of lipid droplets caused by hormonal stimulation2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita, T., et. al.
    • 雑誌名

      J. Lipid Res 48

      ページ: 1078-1089

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] DREF regulates cell proliferation and expression of ribosomal protein genes2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D, et. al.
    • 雑誌名

      Mol.Cell.Biol. 27

      ページ: 2003-2013

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Orphan nuclear receptor Nur77 accelerates the initial phase of adipocyte differentiation in 3T3-L1 cells by promoting mitotic clonal expansion2007

    • 著者名/発表者名
      Fumoto T. et al.
    • 雑誌名

      J Biochem(Tokyo) 141(2)

      ページ: 181-192

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] hDREF regulates cell proliferation and expression of ribosomal protein genes2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D. et al.
    • 雑誌名

      Mol. Cell. Biol. 27(6)

      ページ: 2003-2013

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Human DNA replication-related element binding factor (hDREF) self-association via hATC domain is necessary for its nuclear accumulation and DNA binding2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D. et al.
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem. 282(10)

      ページ: 7563-7575

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] MLDP,a novel PAT family protein localized to lipid droplets and enric hed in the heart,is regulated by peroxisome proliferator-activated receptor alpha2006

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T., et. al.
    • 雑誌名

      J.Biol.Chem 281(20)

      ページ: 14232-14240

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
    • 査読あり
  • [雑誌論文] MLDP, a novel PAT family protein localized To lipid droplets and enriched in the.heart, is regulated by peroxisome proliferator-activated receptor alpha2006

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T, et. al.
    • 雑誌名

      J.Biol.chem 281

      ページ: 14232-14240

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [雑誌論文] MLDP, a novel PTA family portion localized to lipid droplets and enriched in the heart, is regulated by peroxisome proliferator-activated receptor alpha2006

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D. et al.
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem. 281(20)

      ページ: 14232-114240

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [学会発表] 転写因子hDREFの細胞周期における作用点の解析2007

    • 著者名/発表者名
      Nishimura R., et. al.
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-12
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [学会発表] 転写因子hDREFのSUMO化修飾とその役割2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D., et. al.
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-12
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [学会発表] Effects of hDREF knockdown on cell cycle progression2007

    • 著者名/発表者名
      Nishimuru, R., et. al.
    • 学会等名
      31th BMB
    • 発表場所
      Yokohama
    • 年月日
      2007-12-12
    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [学会発表] hDREF and SUMO modification2007

    • 著者名/発表者名
      Yamashita, D., et. al.
    • 学会等名
      31th BMB
    • 発表場所
      Yokohama
    • 年月日
      2007-12-12
    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [学会発表] 転写因子hDREFの細胞周期における作用点の解析2007

    • 著者名/発表者名
      Nishimura R, et. al.
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-12
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] hDREF regulates the ribosomal protein genes2006

    • 著者名/発表者名
      Sano Y., et. al.
    • 学会等名
      20th IUBMB international congress
    • 発表場所
      京都国際会議場
    • 年月日
      2006-06-22
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [学会発表] hDREF regulates the ribosomal protein genes2006

    • 著者名/発表者名
      Sato Y, et. al.
    • 学会等名
      zoth IDBMB
    • 発表場所
      Kyoto
    • 年月日
      2006-06-22
    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [学会発表] hATC domain-mediated self-association is required for nuclear localization of hDREF2006

    • 著者名/発表者名
      Yamashita D., et. al.
    • 学会等名
      20th IUBMB international congress
    • 発表場所
      京都国際会議場
    • 年月日
      2006-06-19
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [学会発表] hATC domain-mediated self-association is required for nuclear localization of hDREF2006

    • 著者名/発表者名
      Yamashita, D., et. al.
    • 学会等名
      zoth IUBMB
    • 発表場所
      Kyoto
    • 年月日
      2006-06-19
    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [備考] 「研究成果報告書概要(和文)」より

    • URL

      http://www.sci.u-hyogo.ac.jp/life/molbio/index-j.html

    • 関連する報告書
      2007 研究成果報告書概要
  • [備考]

    • URL

      http://www.sci.u-hyogo.ac.jp/life/molbio/index-j.html

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書

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公開日: 2006-04-01   更新日: 2016-04-21  

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