| 研究課題/領域番号 |
18580067
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
応用微生物学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
有岡 学 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 准教授 (20242159)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,800千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 300千円)
2007年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2006年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | ホスホリパーゼA_2 / リゾリン脂質 / MAPキナーゼ / PC12 / 麹菌 / ホスホリパーゼA2 / nerve growth factor / MAP kinase / lysophosphatidylcholine / sphingosylphosphorylcholine / neurite outgrowth / secretory phospholipase A_2 |
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| 研究概要 |
PC12細胞において、神経成長因子(NGF)はMAPK経路を活性化するとともに突起伸長などの細胞分化を誘導する。リゾリン脂質であるリゾホスファチジルコリン(LPC)やスフィンゴシルホスホリルコリン(SPC)をNGFと同時に与えたところ、 NGFによるMAPKのリン酸化が亢進する現象が認められた。最初期遺伝子であるc-fos、 NGF-IA、 NGF-IBなどの発現誘導においてもNGFとLPC、 SPCの間で協調的な増強作用が認められた。また、 NGFによるPC12細胞の突起伸長応答もLPCやSPCの共存で亢進された。この現象には細胞外Ca^<2+>は必要なかった。種々の阻害剤を用いた検討から、 LPC/SPCの作用が特定のシグナル伝達経路を介したものであることが示唆された。
麹菌の持つ唯一の細胞質型ホスホリパーゼA_2遺伝子であるAoplaAに関する解析を行った。蛍光顕微鏡観察でAoPlaA-EGFPがミトコンドリアに局在することが示唆されたことから、細胞分画による検証を行った。また、 N末端に存在すると予想されるミトコンドリア局在化シグナルを同定するため、 N末端部分配列とEGFPとの融合タンパク質を発現する株の作製を行った。また、精製AoPlaAタンパク質のN末端アミノ酸配列の分析を行った。 AoplaA遺伝子破壊株を取得し、表現型の解析を行った。
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