研究課題
基盤研究(C)
本研究では、ヒトの細胞核に局在するアクチン関連タンパク質であるhArp5をノックダウンしたところ、DNA修復能が低下することを見出した。hArp5は核内でクロマチンリモデリング酵素であるhIno80と相互作用しており、hIno80と強調して、ヒストンH2AXのリン酸化修飾に関与することも明らかにした。さらに、hArp5は細胞核と細胞質をシャトルするタンパク質であることを見出し、このシャトルがhArp5の機能制御に関与する可能性を示した。また、hArp5のDNA修復への関与を解析する目的で、siRNAを用いてHeLa細胞のhArp5発現を抑制した。この細胞はDNA損傷への感受性が増大しているが、hArp5抗体を用いた解析からは、DNA損傷時にhArp5の核内局在に変化は観察されなかった。しかし、γ-H2AXに対する抗体で免疫染色およびウエスタンブロットを行ったところ、hArp5のノックダウンによってDNA損傷に伴うγ-H2AXの集積が阻害されることが示された。一方、hArp5を過剰発現した細胞では、DNA損傷に伴うγ-H2AXの集積が亢進していた。この結果は、hArp5がH2AXのリン酸化の機構を介してDNA修復に関与している可能性を示唆している。また、hArp8抗体を用いてhArp8の細胞内局在を観察したところ、GFP-hArp8の発現によって示唆されたと同様に、分裂期染色体上にhArp8が存在することが示された。これは、分裂期染色体上に存在するアクチンファミリーのはじめての例である。siRNAによるhArp8のノックダウンによって、分裂期染色体の赤道面への整列に異常が観察されたことから、hArp8がゲノムの安定な分配に寄与していることが明らかとなった。一方で、hIno80のノックダウンによっては染色体の整列の異常は観察されなかったことから、このhArp8の機能は、hINO80複合体には非依存的であることが示唆された。
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Current Biology 18
ページ: 566-575
Exp Cell Res 314
ページ: 859-868
Exp Cell Res. 314
Curr. Biol. 18
J Cell Biochem 104
ページ: 59-67
Biochem Biophys Res Commun 355
ページ: 835-841
Nucleic Acids Res. (In press)
Eur. J. Cell Biol. 85
ページ: 411-421
Biosci. Biotechnol. Biochem. 70
ページ: 1300-1307
蛋白質核酸酵素 51
ページ: 591-599
ページ: 1943-1949
Biosci Biotechnol Biochem 70
Tanpakushitu Kakusan Koso 51
in DNA structure, chromatin, and gene expression eds. Shimizu M and Kiyama R. Transworld Research Network Inc
Biosci Biotechnol Biochem. 70
In: Nagata, S. and Takeyasu, K. (ed) Nuclear Dynamics: Approaches from Biochemistry, Molecular Cell Biology, and Visual Biology, Springer-Verlag Tokyo, Inc., Tokyo
Current Biology (In press)
J Cell Biochem (In press)
