始原生殖細胞の腸管上皮移動とSox17因子の分子制御

• 研究課題/領域番号: 18590175
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 解剖学一般(含組織学・発生学)
• 研究機関: 杏林大学
• 研究代表者: 金井 正美 杏林大学, 医学部, 講師 (70321883)
• 研究分担者: 米川 博通 東京都医学研究機構, 東京都臨床医学研究所, 副所長 (30142110)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,880千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 480千円); 2007年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2006年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
• キーワード: 内胚葉 / マウス / 発生・分化 / 腸管形成 / 生殖細胞 / 始原生殖細胞 / Sox17

研究概要

本研究課題では、我々が作出したSox(Sry[精巣決定遺伝子]related HMG Box)17遺伝子ノックアウトマウスを材料とし、マウス内胚葉分化、腸管発生過程から連動して引き起こされる形態形成現象を解明する。
具体的には腸管発生から誘導され、PGCsが腸上皮を移動するダイナミックスに着目し、細胞移動過程における生殖細胞-後腸上皮細胞の細胞間communicationを分子レベルで解決することを目的として研究を行った。
まずは、epon厚切り/薄切切片を用いて形態学的にアプローチを行った結果、PGCsの数増殖能は変化が無いものの、胚性内胚葉への移動が行われず、尿膜に留まることが明らかとなった。Rosa26-LacZ挿入トランスジェニックマウスの受精卵にSoxl7-/-ES細胞をinjectionしキメラ作成し、high contributionキメラを作出したところ、腸管にのみLacZ陽性細胞がcontributeしていたことから、Sox17の自律的分化能が観察されたが、今回も同様の方法でCAG-GEFP受精卵にSox17-/-ES細胞のcontiributionを蛍光顕微鏡下で観察すると共に、PGC7等の始原生殖細胞マーカーをdouble stainingして腸管移動の異常が生殖細胞によるものなのか、もしくは腸管そのものの問題なのかを検討した。
また更には胚性内胚葉の組織培養を用いて生殖細胞移動が正常であるかどうかを観察したところ、本mutantの生殖細胞の移動の変異は主に腸管内胚葉に由来するものである可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] The membrane-spanning domain of CD98hc promotes αVβ3 integrin signals in human extravillous trochoblast. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kabir-Salmani M, Fukuda MN, Kanai-Azuma M, 以下8名
  • 雑誌名: Mol Endocrinol 22 ページ: 707-715
  • 査読あり
• [雑誌論文] Five azacytidine, a DNA methyltransferase inhibitor, specificically inhibit testicular cord formation and Sertoli cell differentiation in vitro. (2008)
  • 著者名/発表者名: Mizutami T., 間2名, Kanai-AzumaM, 以下2名
  • 雑誌名: Mol Rep Dev 75
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sox17 plays a substantial role of in late-stage differentiation of the extraembryonic endoderm in vitro (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimoda M, Kanai-Azuma M, 以下4名
  • 雑誌名: J Cell Sci 120 ページ: 3859-3869
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Redundant Roles of Soxl7 and Sox18 in Early Cardiovascular Development of Mouse Embryos (2007)
  • 著者名/発表者名: SakamotoY, HaraK, Kanai-AzumaM., 以下7名
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun 360 ページ: 539-544
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potency of testicular enviroment to support spermatogenesis in XX/Sry transgenic male mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Ishii M 間5名, Kanai-AzumaM., 以下3名
  • 雑誌名: Development 134 ページ: 499-454
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sox17 plays a substantial role of in late-stage differentiation of the extraembryonic endoderm in vitro (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimoda, M., Kanai-Azuma, M., et. al.
  • 雑誌名: J Cell Sci 120 ページ: 3859-3869
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Redundant Roles of Sox17 and Sox18 in Early Cardiovascular Development of Mouse Embryos (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto, Y., Hara, K., Kanai-Azuma, M., et. al.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 360 ページ: 539-544
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Potency of testicular enviroment to support spermatogenesis in XX/Sry transgenic male mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Ishii, M., Tachiwana, T., Hoshino, A., Tsunekawa, N., Hiramatsu, R., Matoba, S., Kanai-Azuma, M., Kawakami, H., Kurohmaru, M., Kanai, Y
  • 雑誌名: Development 134 ページ: 449-454
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Redundant Roles of Sox17 and Sox18 in Early Cardiovascular Development of Mouse Embryos (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Y, Hara K, Kanai-AzumaM, 以下7名
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 360 ページ: 539-544
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sox17 plays a substantial role of in late-stage differentiation of the extraembryonic endoderm in vitro. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimoda M, Kanai-Azuma M, 以下4名
  • 雑誌名: J Cell Sci 120
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potency of testicular enviroment to suppnort spermatogenesis in XX/Sry transeenic male mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ishii M, 間5名. Kanai-Azuma M, 以下3名
  • 雑誌名: Development 134
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potency of testicular enviroment to support spermatogenesis in XX/Sry transgenic male mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ishii M, 間5名, Kanai-Azuma M, 他3名
  • 雑誌名: Development 134・3 ページ: 449-454
• [雑誌論文] Redundant roles of Sox17 and Sox18 in postnatal angiogenesis on mice.(*equal contribution) (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsui T, Kanai-Azuma M., 以下5名
  • 雑誌名: J Cell Sci 119 ページ: 3513-3526
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of Sox17 as a transcription factor that regulates oligodendrocyte development (2006)
  • 著者名/発表者名: Sohn J 間4名, Kanai-Azuma M, 以下2名
  • 雑誌名: J Neurosci 26 ページ: 9722-9735
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Redundant roles of Sox17 and Sox18 in postnatal angiogenesis on mice. (*equal contribution) (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsui, T*, Kanai-Azuma, M*, et. al.
  • 雑誌名: J Cell Sci 119 ページ: 3513-3526
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Identification of Sox17 as a transcription factor that regulates oligodendrocyte development (2006)
  • 著者名/発表者名: Sohn, J., Chew, L., Cheng, Y., Lytle, J., Oumesmar, B., Kanai-Azuma, M., Kanai, Y., Gallo, V
  • 雑誌名: J Neuro sci 26 (38) ページ: 9722-9735
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Redundant roles of Sox17 and Sox18 in postnatal angiogenesis on mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsui T, Kanai-Azuma M, 他5名(equal contribution)
  • 雑誌名: J Cell Sci 119・17 ページ: 1449-1459
• [雑誌論文] Identification of Sox17 as a transcription factor that regulates oligodentrocyte development. (2006)
  • 著者名/発表者名: Sohn J, 間4名, Kanai-Azuma M, 他2名
  • 雑誌名: J Neurosci 26・38 ページ: 9722-9735
• [学会発表] I-typeレクチンSiglecのマウス生殖腺における発現と機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 金井 正美、金井 克晃、川上 速人
  • 学会等名: 第144回日本獣医学会
  • 発表場所: 至 酪農学園大学
  • 年月日: 2007-09-02
• [学会発表] マウス、セルトリ前駆細胞でのグリコーゲン蓄積の意義 (2007)
  • 著者名/発表者名: 的場 省悟、金井 正美、以下5名
  • 学会等名: 第144回目本歌医学会
  • 発表場所: 至 酪農学園大学
  • 年月日: 2007-09-02
• [学会発表] マウス始原生殖細胞の移動における腸管内胚葉の役割 (2007)
  • 著者名/発表者名: 原健 士朗、間2名、金井 正美、以下2名
  • 学会等名: 第144目日本歌医学会
  • 発表場所: 至 酪農学園大学
  • 年月日: 2007-09-02
• [学会発表] Aberrant migration of primordial germ cells in the Soxi7% mouse embryos (2007)
  • 著者名/発表者名: Hara K, 間4名、Kanai-Azuma M., 以下2名
  • 学会等名: 第40回日本発生学会、第59回日本細胞生物学会合同大会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Aberrant migration of primordial germ cells in the Sox17^<-/-> mouse embryos (2007)
  • 著者名/発表者名: Hara, K., Tsunekawa, N., Watanabe, Y., Sakamoto, Y., Miura, Y., Kanai-Azuma, M., Kurohmaru, M., Kanai, Y
  • 学会等名: 40th Japanese Society of Deleopmental Biology
  • 発表場所: Fukuoka
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] LAT1 deficient mice shows lack of the vascular network in the dorsal region of the trunk during embryonic development. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yuewei Li, Masami Kanai-Azuma, 以下2名
  • 学会等名: 第40回日本発生学会、第59回日本細胞生物学会合同大会
  • 発表場所: 至 福岡
• [学会発表] Analysis of Sry actions in gonadal sex differentiation by using Hsp-Sry transgenic mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Hoshino A, 間2名、Kanai-Azuma M, 以下3名
  • 学会等名: 第40回日本発生学会、第59目日本細胞生物学会合同大会
  • 発表場所: 至 福岡
• [学会発表] Aberrant migration of primordial germ cells in the Sox17^+ mouse embryos. (2007)
  • 著者名/発表者名: Hara K, 間4名、Kanai-Azuma M, 以下2名
  • 学会等名: 第40回日本発生学会、第59回日本細胞生物学会合同大会
  • 発表場所: 至 福岡
• [学会発表] 性分化期のセルトジ細胞におけるSox9発現維持と高エネルギー要求 (2007)
  • 著者名/発表者名: 的場 省悟、全敗 正美、以下5名
  • 学会等名: BMB2007第30回日本分子生物学会
  • 発表場所: 至 パシフィコ横浜
• [学会発表] The role of Sox17 and Soxl8 in mouse embryonic cardiocasculogenesis (2006)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Y, 間4名、Kanai-Azuma M, 以下2名
  • 学会等名: 第141回日本獣医学会
  • 発表場所: つくば国際会議場
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] A POSSIBLE SIGNALING PATHWAY TO INDUCE SRY-DEPENDENT GLYCOGENESIS IN PRE-SERTOLI CELLS IN MOUSE EARLY TESTIS DIFFERENTIATION (2006)
  • 著者名/発表者名: Kanai-Azuma M., 以下7名
  • 学会等名: Forth international symposium on vertebrate sex detemination
  • 発表場所: Royal Kona Resort in Kona on t he Big Island of Hawaii
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] The role os Sox17 and Sox18 in mouse embryonic cardiocasculogenesis (2006)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto, Y., Matui, T., Hara, K., Nagata, T., Tsunekawa, N., Kanai-Azuma, M., Kanai, Y., Kurohmaru, M
  • 学会等名: 141th Japanse society of Veterinary Science
  • 発表場所: EPOCAL TSUKUBA
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] A POSSIBLE SIGNALING PATHWAY TO INDUCE SRY-DEPENDENT GLYCOGENESIS IN PRE-SERTOLI CELLS IN MOUSE EARLY TESTIS DIFFERENTIATION (2006)
  • 著者名/発表者名: Kanai-Azuma, M., et. al.
  • 学会等名: Forth international symposium on vertebrate sex detemination
  • 発表場所: Royal Kona Resort in Kona on the Big Island of Hawaii
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] 実験医学別冊 ホールマウントISH(分担)染色・バイオイメージング実験ハンドブック (2006)
  • 著者名/発表者名: 金井 正美
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 羊土社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] 組織細胞化学2006 (2006)
  • 著者名/発表者名: 金井正美, 川上速人, 平松竜司, 金井克晃
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: ホールマウントIn situハイブリダイゼーション-up to date
• [備考] 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • URL: http://www.kyorin-u.ac.jp/univ/user/medicine/anat2/res.html
• [備考]
  • URL: http://www.kyorin-u.ac.jp/univ/user/medicine/anat2/