| 研究概要 |
シグナル脂質代謝酵素である,ジアシルグリセロールキナーゼ(DGK)は10個の独立した遺伝子によりコードされているが,今回は我々によりI型に分類されたアイソザイムの機能を検討した.
DGKαは正常ヒト色素細胞では検出不能であるが,メラノーマ細胞には強く発現している.DGKαはメラノーマ細胞のTNFα依存性のアポトーシスを強く抑制し,この効果は核内DGKαによるNF-κB活性化によることを発見した.更に,DGKαとNF-KBの間にはプロテインキナーゼCζが介在する可能性が高いことが明らかになった.
DGKγは既にRac1の上流に位置する抑制因子であることを報告している.細胞の上皮増殖因子及び過酸化水素/ホルボールエステル刺激時に,DGKγはRac-特異的GAPである,β2-chimaerinと一過性に速やかに結合し,活性化することにより,Rac1活性を阻害することが分かった.また,DGKγとβ2-chimaerinの結合部位(それぞれSH2/C1ドメインとC4aドメイン)を同定し,更に,その結合にはβ2-chimaerinのC1ドメインからの亜鉛の遊離が必要であることを明らかにした.一方,β2-chimaerinはSrc kinaseによりTyr-21がリン酸化され,この結果GAP活性が亢進して,インテグリン依存性の細胞伸展が阻止されることを発見した.
先に我々によりクローン化されたLPP(Lipid phosphate phosphatase,Type IIボスファチジン酸ボスファターゼ)の細胞膜での存在様式を検討した.LPP-3はTritonX-100不溶性のラフトに存在するが,LPP-1もCHAPS-不溶性の性質の異なるラフトにLPP-3と分離して存在することを発見した.
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