小腸粘膜上皮細胞の分化誘導における転写因子Math1とCdx2の関係

• 研究課題/領域番号: 18590697
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 武藤 弘行 自治医科大学, 医学部, 講師 (50322392)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,710千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 510千円); 2007年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2006年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
• キーワード: Cdx2 / Math1 / トランスジェニックマウス / 腸上皮化生 / luciferase assay / EMSA / RT-PCR / Western blot / Western-blot

研究概要

正常胃粘膜にはMath1が発現していないが、Cdx2トランスジェニックマウスの腸上皮化生粘膜にMath1が発現していることを確認した。Math1の誘導が転写レベルで起きていることを確認するためCdx2トランスジェニックマウスの胃粘膜を剥離してRNAを抽出しRT-PCRとNorthern blotにてMath1の発現を確認した。同時にWestern blotにより蛋白レベルでの発現の確認した。次に小腸陰窩由来の未分化細胞であるIEC-6 cellを用いてdx2の発現ベクターのtransfectionによりMath1が誘導されることをRT-PCR、Northemlot、Western blotにてCdx2によるMath1の誘導を確認した。さらにMath1のプロモーター領域をマウスのゲノムを鋳型としてPCRによりとり、luciferase assayを用いて転写活性を検討した。Deletion mutantを作成してCdx2 binding siteを決め、binding siteにmutationを導入することによりMathlプロモーター領域のCdx2の結合部位を決定した。
Electrophoretic Mobility Shit Assay(EMSA)によりこの結合領域を確認した。以上よりMath1がCdx2により誘導されることをin vitroおよび遺伝子レベルで解明した。

研究成果

• [雑誌論文] Homeobox protein CDX2 reduces Cox-2 transcription by inactivating the DNA-binding capacity of nuclear factor-kappaB (2007)
  • 著者名/発表者名: Mutoh H
  • 雑誌名: J Gastroenterol 42 ページ: 719-729
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] A close relationship between intestinal metaplasia and Cdx2 expression in human gallbladders with cholelithiasis (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto H
  • 雑誌名: Hum Pathol 38 ページ: 66-71
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] A close relationship between intestinal metaplasia and Cdx2 expression in human gallbladders with cholelithiasis (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto, H
  • 雑誌名: Hum Pathol 38 ページ: 66-71
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Homeobox protein CDX2 reduces Cox-2 transcription by inactivating the DNA-binding capacity of nuclear factor-kB (2007)
  • 著者名/発表者名: Mutoh, H
  • 雑誌名: J Gastroenterol 42 ページ: 719-729
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Homeobox protein CDX2 reduces Cox-2 transcription by inactivating the DNA-binding capatity of nuclear factor-kappaB (2007)
  • 著者名/発表者名: Mutoh H
  • 雑誌名: J Gastroenterol 42 ページ: 719-729
  • 査読あり
• [雑誌論文] A close relationaship between intestinal metaplasia and Cdx2 expression in human gallbladders with cholelithiasis. (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto H, Mutoh H, Ido K, Satoh K, Hayakawa H, Sugano K
  • 雑誌名: Hum Pathol 38 ページ: 66-71
• [雑誌論文] The intestine-specific homeobox gene Cdx2 induces expression of the basic helix-loop-helix transcription factor Math1 (2006)
  • 著者名/発表者名: Mutoh H
  • 雑誌名: Differentiation 74 ページ: 313-321
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Helicobacter pylori eradication induces marked increase in H^+/K^+-adenosine triphosphatase expression without altering parietal cell number in human gastric mucosa (2006)
  • 著者名/発表者名: Osawa, H
  • 雑誌名: Gut 55 ページ: 152-7
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The intestine-specific homeobox gene Cdx2 induces expression of the basic helix-loop-helix transcription factor Math1 (2006)
  • 著者名/発表者名: Mutoh, H
  • 雑誌名: Differentiation 74 ページ: 313-21
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Differential gene expression between flat adenoma and normal mucosa in the colon using microarray (2006)
  • 著者名/発表者名: Kita, H
  • 雑誌名: J Gastroenterol 41 ページ: 1053-63
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] The intestine-specific homeobx gene Cdx2 induces expression of the basic helix-loop-helix transcription factor Math 1. (2006)
  • 著者名/発表者名: Mutoh H, Sakamoto H, Hayakawa H, Arao Y, Satoh K, Nokubi M, Sugano K
  • 雑誌名: Differentiation 74 ページ: 313-321
• [雑誌論文] Differential gene expression between flat adenoma and normal mucasa in the colon using microarray. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kita H, Hikichi Y, Hikami K, Tsuneyama K, Cui Z-G, Osawa H, Ohnishi H, Mutoh H, Hoshino H, Bowlus CL, Yamamoto H, Sugano K
  • 雑誌名: J Gastroenterol 41 ページ: 1053-1063
• [雑誌論文] Helicobacter pylori eradication induces marked increase in H^+/K^+-adenosine triphosphatase expression without altcring parictal cell number in human gastric (2006)
  • 著者名/発表者名: Osawa H, Kita H, Ohnishi H, Hoshino H, Mutoh H, Ishino Y, Watanabe E, Satoh K, Sugano K
  • 雑誌名: Gut 55 ページ: 152-157
• [学会発表] The development of differentiated gastric adenocarcinoma from intestinal metaplasia (2007)
  • 著者名/発表者名: Mutoh, H
  • 学会等名: 7th conference of risk factor of gastric carcinoma
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2007-06-16
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] Transcription factor Cdx2, intestinal metaplasia, and gastric carcinoma.In Recent adVances in gastrointestinal carcinogenesis (2006)
  • 著者名/発表者名: Mutoh H
  • 総ページ数: 62
  • 出版者: Transworld Research Network
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より