新規アポトーシス誘導遺伝子の動脈硬化性疾患発症機構解析への応用研究

• 研究課題/領域番号: 18590810
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 安田 修 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (00372615)
• 研究分担者: 福尾 惠介 武庫川女子大学, 生活環境学部, 教授 (40156758)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,890千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 390千円); 2007年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2006年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: 動脈硬化 / アポトーシス / ミトコンドリア / 平滑筋細胞

研究概要

1.PL-3の発現調節機構と分子間相互作用:マウスPL-3の発現を測定するリアルタイムPCRによるアッセイ法を確立した。またPL-3タンパク質に対して特異的な抗体を作製し、ウェスタンブロットによる発現測定を可能にした。ウェスタンブロットを用いて発現解析を行ったところ、動脈硬化プラークにおいて多量に存在する酸化LDLで刺激した細胞では発現上昇がみられ、動脈硬化プラークの形成にPL-3が関与していることが示唆された。
2.PL-3遺伝子における新しい疾患感受性遺伝子多型の同定:インフォームドコンセントが得られたヒト遺伝子を用いてPL-3遺伝子近傍に存在するSingle Nucleotide Polymorphysm(SNP)解析を行った結果、PL-3遺伝子と生活習慣病における関連が示唆された。
3.ヒト動脈硬化プラークにおけるPL-3発現解析:大腸菌に発現させ、アフィニティーカラムを用いて精製したPL-3タンパク質をウサギに感作し、高力価のヒトPL-3タンパク質抗体を得た。得られた抗血清を用いて頚動脈の動脈硬化プラークの組織学的解析を行った結果、PL-3蛋白質は動脈硬化プラーク内の泡沫化したマクロファージあるいは平滑筋細胞において発現していることが確認された。
4.心筋細胞のPL-3発現抑制と虚血再還流による細胞死抑制:RNAiを導入することによりPL-3の発現を抑制したラット心筋細胞を初代培養し、虚血再酸素化の条件でアポトーシスを誘導させた結果、アポトーシスが抑制されていることが確認された。この結果から心筋梗塞治療後の心不全発症にPL-3発現が関与しているものと考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Potential Role of CYLD(Cylindromatosis)as a Deubiquitinating Enzyme in Vascular Cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takami Y.
  • 雑誌名: The American journal of pathology 172(3) ページ: 818-829
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Potential Role of CYLD (Cylindromatosis) as a Deubiquitinating Enzyme in Vascular Cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Takami, Y, Nakagami, H, Morishita, R, Katsuya, T, Hayashi, H, Mori, M, Koriyama, H, Baba, Y, Yasuda, O, Rakugi, H, Ogihara, T, Kaneda, Y
  • 雑誌名: American journal of pathology 172(3) ページ: 818-829
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Aspirin : recent developments (2008)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O, Takemura, Y, Kawamoto, H, Rakugi, H
  • 雑誌名: Cellular and molecular life sciences 65(3) ページ: 354-358
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Potential Role of CYLD (Cylindromatosis) as a Deubiquitinating Enzyme in Vascular Cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takami Y.
  • 雑誌名: The American journal of pathology (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Different changes of bone mineral density and the nutritional status after hospitalization between vascular dementia and Alzheimer's disease in elderly female patients. (2007)
  • 著者名/発表者名: Suzuki A
  • 雑誌名: Geriatrics and Gerontology International 7 ページ: 363-370
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1, a novel deubiquitinating enzyme in the vasculature, attenuates NF-kappaB activation. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takami Y
  • 雑誌名: Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology 27(10) ページ: 2184-2190
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aspirin prevents adhesion of T lymphoblasts to vascular smooth muscle cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yotsui T
  • 雑誌名: FEBS letters 581(3) ページ: 427-432
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tissue inhibitor of metalloproteinase-3 deficiency inhibits blood pressure elevation and myocardial microvascular remodeling induced by chronic administration of Nomega-nitro-L-arginine methyl ester in mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Higuchi M
  • 雑誌名: Hypertension Research 30(6) ページ: 563-571
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Different changes of bone mineral density and the nutritional status after hospitalization between vascular dementia and Alzheimer's disease in elderly female patients (2007)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, A, Fukuo, Osamu, Yasuda, Kazuhisa, Taniguchi, Shoichi, Kitano, Toshio, Ogihara
  • 雑誌名: Geriatrics and Gerontology International 7 ページ: 363-370
  • NAID: 10020020786
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase Ll, a novel deubiquitinating enzyme in the vasculature, attenuates NF-kappaB activation (2007)
  • 著者名/発表者名: Takami, Y, Nakagami, H, Morishita, R, Katsuya, T, Cui, TX, Ichikawa, T, Saito, Y, Hayashi, H, Kikuchi, Y, Nishikawa, T, Baba, Y, Yasuda, Rakugi, H, Ogihara, T, Kaneda, Y
  • 雑誌名: Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology 27(10) ページ: 2184-2190
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Aspirin prevents adhesion of T lymphoblasts to vascular smooth muscle cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yotsui, T, Yasuda, O, Kawamoto, H, Higuchi, M, Chihara, Y, Umemoto, E, Tanaka, T, Miyasaka, M, Rakugi, H, Ogihara, T
  • 雑誌名: FEBS letters 581(3) ページ: 427-432
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Tissue inhibitor of metalloproteinase-3 deficiency inhibits blood pressure elevation and myocardial microvascular remodeling induced by chronic administration of Nomega-nitro-L-arginine methyl ester in mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Higuchi, M, Yasuda, O, Kawamoto, H, Yotsui, T, Baba, Y, Ozaki, T, Maeda, N, Fukuo, K, Rakugi, H, Ogihara, T
  • 雑誌名: Hypertension Research 30(6) ページ: 563-571
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Aspirin prevents adhesion of T lymphoblasts to vascular smooth muscle cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Yotsui T
  • 雑誌名: FEBS Letters 581(3) ページ: 427-427
• [雑誌論文] Apop-1, a novel protein inducing cyclophilin D-dependent but Bax/Bak-related channel-independent apoptosis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yasuda O
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 281(33) ページ: 23899-23907
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tissue inhibitor of metalloproteinase-3 plays important roles in the kidney following unilateral ureteral obstruction (2006)
  • 著者名/発表者名: Kawamoto H
  • 雑誌名: Hypertension Research 29(4) ページ: 285-294
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fas ligand mRNA levels of circulating leukocytes reflect endothelial dysfunction in hyperlipidemic but not in non-hyperlipidemic patients (2006)
  • 著者名/発表者名: Kotani N
  • 雑誌名: Hypertension Research 29(4) ページ: 217-225
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Apoptosis Signal-Regulating Kinase 1 Mediates Cellular Senescence Induced by High Glucose in Endothelial Cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Yokoi T
  • 雑誌名: Diabetes 55(6) ページ: 1660-1665
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Apop-1, a novel protein inducing cyclophilin D-dependent but Bax/Bak-related channel-independent apoptosis (2006)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O, Fukuo, K, Sun, X, Nishitani, M, Yotsui, T, Higuchi, M, Suzuki, T, Rakugi, H, Smithies, O, Maeda, N, Ogihara, T
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 281(33) ページ: 23899-23907
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Tissue inhibitor of metalloproteinase-3 plays important roles in the kidney following unilateral ureteral obstruction (2006)
  • 著者名/発表者名: Kawamoto, H, Yasuda, 0, Suzuki, T, Ozaki, T, Yotsui, T, Higuchi, M, Rakugi, H, Fukuo, K., Ogihara, T., Maeda, N
  • 雑誌名: Hypertension Research 29(4) ページ: 285-294
  • NAID: 10017985701
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Fas ligand mRNA levels of circulating leukocytes reflect endothelial dysfunction in hyperlipidemic but not in non-hyperlipidemic patients (2006)
  • 著者名/発表者名: Related, Articles, LinksKotani, N, Fukuo, K, Yasuda, O, Sugimoto, K, Katuya, T, Takemura, Y, Kawamoto, H, Yokoi, T, Suzuki, A, Ogihara T
  • 雑誌名: Hypertension Research 29(4) ページ: 217-225
  • NAID: 10017985402
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Apoptosis Signal-Regulating Kinase 1 Mediates Cellular Senescence Induced by High Glucose in Endothelial Cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Yokoi, T, Fukuo, K, Yasuda, O, Hotta, M, Miyazaki, J, Takemura, Kawamoto, H, Ichijo, H, Ogihara, T
  • 雑誌名: Diabetes 55(6) ページ: 1660-1665
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Timp-3欠損による高血圧誘導の抑制 (2007)
  • 著者名/発表者名: 河本秀宣
  • 学会等名: 第11回 日本新血管内分泌代謝学会学術総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-11-16
• [学会発表] ヒト頚動脈プラークにおけるApop遺伝子発現の検討 (2007)
  • 著者名/発表者名: 馬場義親
  • 学会等名: 第30回 日本高血圧学会総会
  • 発表場所: 宜野湾
  • 年月日: 2007-10-26
• [学会発表] 血管内膜肥厚におけるApop遺伝子の発現解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 安田 修
  • 学会等名: 第11回 Molecular Cardiovascular Conference
  • 発表場所: 北海道
  • 年月日: 2007-09-15
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Expression analysis ofApop gene in neointimal thickening (2007)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O, Rakugi, H, Ogihara
  • 学会等名: 11st Molecular Cardiovascular Conference
  • 発表場所: Hokkaido
  • 年月日: 2007-09-15
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Apop蛋白質の機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 安田 修
  • 学会等名: 第18回 老年疾患研究会
  • 発表場所: 長野
  • 年月日: 2007-07-28
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Analysis ofApop protein function (2007)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O
  • 学会等名: 18st Geriatric Disease Symposium
  • 発表場所: Nagano
  • 年月日: 2007-07-28
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Timp-3発現が尿管結紮後の腎組織変化に与える影響の検討 (2007)
  • 著者名/発表者名: 安田 修
  • 学会等名: 第14回 遺伝子診療学会
  • 発表場所: 松山
  • 年月日: 2007-07-27
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Study of Timp-3 expression and Renal Structure after Unilateral Ureteral Obstruction (2007)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O, Kawamoto, H, Higuchi, M, Baba, Y, Okita, M, Rakugi, H, Ogihara, T
  • 学会等名: 14st The Japanese Society for Gene Diagnosis and Therapy
  • 発表場所: Matsuyama
  • 年月日: 2007-07-27
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] 高齢者手術における包括的高齢者生活機能評価(CGA)の臨床的意義の検討 (2007)
  • 著者名/発表者名: 河本秀宣
  • 学会等名: 第49回 日本老年医学会学術集会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2007-06-22
• [学会発表] Apop遺伝子の機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 安田 修
  • 学会等名: 第1回 地域健康科学研究会
  • 発表場所: 西宮
  • 年月日: 2007-01-31
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Functional Analysis ofApop gene (2007)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O
  • 学会等名: 1st Heath Science Symposium
  • 発表場所: Nishinomiya
  • 年月日: 2007-01-31
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] 遺伝子解析により診断したWerner症候群の2例 (2006)
  • 著者名/発表者名: 安田 修
  • 学会等名: 第17回 日本老年医学会近畿地方会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2006-11-25
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Two cases of Werner's Syndrome diagnosed by DNA analysis (2006)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O, Kawamoto, H, Shindo, N, Sugimoto, K, Fujisawa, T, Ohishi, M, Rakugi, H, Ogihara, T
  • 学会等名: 17st Japan Geriatric Society Meeting in Kinki
  • 発表場所: Osaka
  • 年月日: 2006-11-25
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Apop-1, a novel gene, inducing cyclophilin D-dependent apoptosis (2006)
  • 著者名/発表者名: 安田 修
  • 学会等名: 第21回 国際高血圧学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2006-10-16
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Apop-1, a novel gene, inducing cyclophilin D-dependent apoptosis (2006)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O, Fukuo, K, Higuchi, M, Yotsui, T. Rakugi, H, Othhara, T
  • 学会等名: 21st International Society of Hypertension
  • 発表場所: Fukuoka
  • 年月日: 2006-10-16
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Timp-3欠損マウスの血圧解析 (2006)
  • 著者名/発表者名: 安田 修
  • 学会等名: 第1回 加齢医学研究会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2006-01-14
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Study of Blood pressure of Timp-3 deficient mice (2006)
  • 著者名/発表者名: Yasuda, O, Kawamoto, H, Fukuo, K, Rakugi, H, Ogihara, T
  • 学会等名: 1st Aging Science Symposium
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2006-01-14
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] Aspirin: recent developments. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yasuda O
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: Birkhauser
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より