肝線維化への造血幹細胞の関与:単一細胞移植法を用いた肝星細胞起源の解明

• 研究課題/領域番号: 18591055
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 桝屋 正浩 三重大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (30281083)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,950千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 450千円); 2007年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2006年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: 造血幹細胞 / 単一細胞移植 / 四塩化炭素 / 肝星細胞 / 単球 / 単一細胞移植法

研究概要

造血幹細胞由来の非血液細胞が四塩化炭素(CCl_4)による肝傷害時に肝臓内に存在することはわかっていたが、その細胞の詳細な解析は行っていなかった。そこで、EGFPマウスから分離したLin^-c-kit^+Sca-1^+CD34^-細胞を1個ずつ96well plateにソートし、IL-11+SCF存在下で7日間培養後に20細胞までしか増殖しなかったwellの細胞全てを9.5Gy照射C57BL/6Jマウスに移植した。移植2ケ月後の末梢血キメリズム解析で高率に生着が確認されたマウスに、CCl_4を投与し慢性肝傷害モデルを作成した。このマウスの肝臓の解析から、造血幹細胞由来の肝星細胞(Oil-red-O陽性、Vimentin陽性、GFAP陽性)が傷害肝に出現し、collagen-IやADAMTS13を産生することを証明した。さらに、この現象が細胞融合の結果でないことをY染色体FISH解析により確認した。これらの結果は2006年12月のアメリカ血液学会で発表し、論文はBlood誌(2008;111:2427-2435)に受理された。
造血幹細胞が肝星細胞に分化する事は証明できたが、その分化経路や機序は全くのブラックボックスである。研究代表者は造血幹細胞と腎糸球体メサンギウム細胞の関連を研究する過程で、造血細胞系列の中で特に骨髄球系細胞がメサンギウム細胞に分化する能力を有することを発見していた。そこで、肝星細胞への分化においても骨髄球系細胞が分化能力を有するのかを検討した。EGFPマウスから分離したLin^-細胞をSCF+M-CSF存在下で培養して単球・マクロファージを準備し、肝傷害マウスに移植した。対象とした全骨髄細胞を移植した場合とほぼ同頻度で肝臓内にEGFP陽性細胞を検出した。現在、EGFP陽性細胞がKupffer細胞、肝星細胞のいずれなのか検討中である。

研究成果

• [雑誌論文] Hematopoietic origin of hepatic stellate cells in the adult liver (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyata E, Masuya M, Yoshida S, et. al.
  • 雑誌名: Blood 111 ページ: 2427-2435
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ex vivo culture of human cord blood hematopoietic stem/progenitor cells adversely influences their distribution to other bone marrow compartments after intra-bone marrow transplantation (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamamura K, Ohishi K, Masuya M, et. al.
  • 雑誌名: Stem Cells 26 ページ: 543-549
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hematopoietic origin of hepatic stellate cells in the adult liver (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyata, E, Masuya, M, Yoshida, S, Nakamura, S, Kato, K, Sugimoto, Y, Shibasaki, T, Yamamura, K, Ohishi, K, Nishii, K, Ishikawa, F, Shiku, H, Katayama, N
  • 雑誌名: Blood 111(4) ページ: 2427-2435
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Ex vivo culture of human cord blood hematopoietic stem/progenitor cells adversely influences their distribution to other bone marrow compartments after intra-bone marrow transplantation (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamamura, K, Ohishi, K, Masuya, M, Miyata, E, Sugimoto, Y, Nakamura, S, Fujieda, A, Araki, H, Katayama, N
  • 雑誌名: Stem Cells 26(2) ページ: 543-549
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Hematopoietic origin of hepatic stellate cells in the adult liver (2008)
  • 著者名/発表者名: Miyata E, Masuya M, Yoshida S, et. al
  • 雑誌名: Blood 111 ページ: 2427-2435
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thymomegaly, microsplenia, and defective homeostatic proliferaion of peripheral lymphocytes in p51-Ets1 isoform-specific null mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Higuchi T, Bartel FO, Masuya M, et. al.
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 27 ページ: 3353-3366
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Notch ligand Delta-1 differentially modulates the effects of gp130 activationon interleukin-6 receptor α-positive and-negative human hematopoietic progenitors (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamamura K, Ohishi K, Katayama N, et. al.
  • 雑誌名: Cancer Sci 98 ページ: 1597-1603
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jak inhibitor induce S phase cell-cycle arrest and augments TRAIL-induced apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Fuke H, Shiraki K, Sugimoto K, et. al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 363 ページ: 738-744
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selective blast cell reduction in elderly patients with acute myeloid leukemia secondary to myelodysplastic syndrome treated with methylprednisolone (2007)
  • 著者名/発表者名: Suzuki K, Ohishi K, Sekine T, et. al.
  • 雑誌名: Int J Hematol 85 ページ: 344-349
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] IL-3 can not replace GM-CSF in inducing human monocytes to differentiate into Langerhans cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Shibasaki T, Katayama N, Ohishi K, et. al.
  • 雑誌名: Int J Oncol 30 ページ: 549-555
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thymomegaly, microsplenia, and defective homeostatic proliferation of peripheral lymphocytes in p51-Ets1 isoform-specific null mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Higuchi, T, Bartel, FO, Masuya, M, Deguchi, T, Henderson, KW, Li, R, Muise-Helmericks, RC, Kern, MJ, Watson, DK, Spyropoulos, DD
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 27(9) ページ: 3351-3366
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Notch ligand Delta-1 differentially modulates the effects of gp130 activation on interleukin-6 receptor a-positive and-negative human hematopoietic progenitors (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamamura, K, Ohishi, K, katayama, N, Kato, K, Shibasaki, T, Sugimoto, Y, Miyata, E, Shiku, H, Masuya, M, Nishioka, J, Nobori, T, Nishikawa, M, Inagaki, Y, Hiramatsu, H, Nakahata, T
  • 雑誌名: Cancer Sci 98(10) ページ: 1597-1603
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Jak inhibitor induces S phase cell-cycle arrest and augments TRAIL-induced apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Fuke, H, Shiraki, K, Sugimoto, K, Tanaka, J, Beppu, T, Yoneda, K, Yamamoto, N, Ito, K, Masuya, M, Takei, Y
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Comrnun 363(3) ページ: 738-744
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Selective blast cell reduction in elderly patients with acute myeloid leukemia secondary to myelodysplantic syndrome treated with methylprednisoloile (2007)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, K, Ohishi, K, Sekine, T, Masuya, M, Katayama, N
  • 雑誌名: Int J Hematol 85(4) ページ: 344-349
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] IL-3 can not replace GM-CSF in inducing human monocytes to differentiate into Langerhans cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Shibasaki, T, Katayama, N, Ohishi, K, Fujieda, A, Monma, F, Nishii, K, Masuya, M, Shiku, H
  • 雑誌名: Int J Oncol 30(3) ページ: 549-555
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] HER2-specific T-cell immune responses in patients vaccinated with truncated HER2 protein complexed with nanogels of cholesteryl pullulan (2007)
  • 著者名/発表者名: Kitano, S, Kageyama, S, Nagata, Y, Miyahara, Y, Hiasa, A, Naota, H, Okumura, S, Imai, H, Shiraishi, T, Masuya, M, Nishikawa, M, Sunamoto, J, Akiyoshi, K, Kanematsu, T, Scott, AM, Murphy, R, Hoffman, EW, Old, LJ, Shiku, H
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12(24) ページ: 7397-7405
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Differential cell division history between neutrophils and macrophages in their development from granulocyte-macrophage progenitors (2007)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto, Y, Katayama, N, Masuya, M, Miyata, E, Ueno, M, Ohishi, K, Nishii, K, Takakura, N, Shiku, H
  • 雑誌名: Br J Haematol 135(5) ページ: 725-731
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Development of mixed-type autoimmune hemolytic anemia and Evans' syndrome following chicken pox infection in a case of low-titer cold agglutinin disease (2007)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, Y, Masuya, M, Katayama, N, Miyata, E, Sugimoto, Y, Shibasaki, T, Yamamura, K, Ohishi, K, Minami, N, Shiku, H, Nobori, T
  • 雑誌名: Int J Hernatol 84(3) ページ: 220-223
  • NAID: 10018303966
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Pleiotropic role of histone deacetylases in the regulation of human adult erythropoiesis (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamamura, K, Ohishi, K, Katayama, N, Yu, Z, Kato, K, Masuya, M, Fujieda, A, Sugimoto, Y, Miyata, E, Shibasaki, T, Heike, Y, Takaue, Y, Shiku, H
  • 雑誌名: Br J Haematol 135(2) ページ: 242-253
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Thymomegaly,microsplenia,and defective homeostatic proliferaion of peripheral lymphocytes in p51-Ets 1 isoform-specific null mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Higuchi T, Bartel FO, Maeuya M, et. al.
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 27 ページ: 3353-3366
  • 査読あり
• [雑誌論文] Notch ligand Delta-1 differentially modulates the effects of gp130 activa tionon interleukin-6 receptor α-positive and-negative human hematopoietic progemitors (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamamura K, Ohishi K, Katayama N, et. al.
  • 雑誌名: Cancer Sci 98 ページ: 1597-1603
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jak inhibitor induce S phase cell-cyele arrest and augments TRAIL-induced apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Fuke H, Shirah K, Sugimoto K, et. al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 363 ページ: 738-744
  • 査読あり
• [雑誌論文] HER2-specific T-cell immune responses in patients vaccinated with truncated HER2 protein complexed with nanogels of cholesteryl pullulan (2006)
  • 著者名/発表者名: Kitano S, Kageyama S, Nagata Y, et. al.
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12 ページ: 7397-7405
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential cell division history between neutrophils and macrophages in their development from granulocyte-macrophage progenitors (2006)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto Y, Katayama N, Masuya M, et. al.
  • 雑誌名: Br J Haematol 135 ページ: 725-731
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of mixed-type autoimmune hemolytic anemia and Evans' syndrome following chicken pox infection in a case of low-titer cold agglutinin disease (2006)
  • 著者名/発表者名: Tanaka Y, Masuya M, Katayama N, et. al.
  • 雑誌名: Int J Hematol 84 ページ: 220-223
  • NAID: 10018303966
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pleiotropic role of histone diacetylases in the regulation of human adult erythropoiesis (2006)
  • 著者名/発表者名: Yamamura K, Ohishi K, Katayama N, et. al.
  • 雑誌名: Br J Haematol 135 ページ: 242-253
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] An invivo analysis of hematopoietic stem cell potential : hematopoietic origin of cardiac valve interstitial cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Visconti RP et al.
  • 雑誌名: Circulation Research 98 ページ: 690-696
• [雑誌論文] Hematopoietic origins of fibroblasts : I. In vivo studies of fibroblasts associated with solid tumors. (2006)
  • 著者名/発表者名: LaRue AC et al.
  • 雑誌名: Experimental Hematology 34 ページ: 203-218
• [雑誌論文] Hematopoietic origins of fibroblasts : II. In vitro studies of fibroblasts, CFU-F, and fibrocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ebihara Y et al.
  • 雑誌名: Experimental Hematology 34 ページ: 219-229
• [雑誌論文] Pleiotropic role of histone deacetylases in the regulation of human adult erythropoiesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yamamura K et al.
  • 雑誌名: British Journal of Haematology 135 ページ: 242-253
• [雑誌論文] Differential cell division history between neutrophils and macrophages in their development from granulocyte-macrophage progenitors. (2006)
  • 著者名/発表者名: Sugimoto Y et al.
  • 雑誌名: British Journal of Haematology 135 ページ: 725-731
• [雑誌論文] HER2-specific T-cell immune responses in patients vaccinated with truncated HER2 protein complexed with nanogels of cholesteryl pullulan. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kitano S et al.
  • 雑誌名: Clinical Cancer Research 12 ページ: 7397-7405
• [学会発表] 生体肝移植後のドナーとレシピエントにおける末梢血への造血幹細胞動員 (2007)
  • 著者名/発表者名: 桝屋正浩, 他
  • 学会等名: 第69回日本血液学会、第49回日本臨床血液学会合同総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-10-13
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] 生体肝移植後のドナーとレシピエントにおける末梢血への造血幹細胞動員 (2007)
  • 著者名/発表者名: 桝屋 正浩, 他
  • 学会等名: 第69回日本血液学会、第49回日本臨床血液学会合同総会
  • 発表場所: パシフィ、コ横浜
  • 年月日: 2007-10-13
• [学会発表] ヒト臍帯血造血前駆細胞を培養後に骨髄内移植すると、生着していない他の部位の骨髄への遊走が低下する (2007)
  • 著者名/発表者名: 山村賢太郎, 他
  • 学会等名: 第69回日本血液学会、第49回日本臨床血液学会合同総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-10-11
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] ヒト臍帯血造血前駆細胞を培養後に骨髄内移植すると、生着していない他の部位の骨髄への遊走が低下する (2007)
  • 著者名/発表者名: 山村 賢太郎, 他
  • 学会等名: 第69回日本血液学会、第49回日本臨床血液学会合同総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2007-10-11
• [学会発表] Hematopoietic origin of hepatic stellate cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Masahiro Masuya
  • 学会等名: Japanese-German Conference Regenerative Medicine 2007
  • 発表場所: Rostock, Germany
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Mobilization of hematopoietic stem cells after living donor liver transplantation (2007)
  • 著者名/発表者名: Masuya, M, Shiraki, K, Tanaka, Y, Miyata, E, Sugimoto, Y, Fujieda, A, Ohishi, K, Miyazaki, H, Katayama, N
  • 学会等名: 69th Annual meeting of Japanese Society of Hematology/ 49th Annual meeting of Japanese Society of Clinical Hematology
  • 発表場所: Yokohama, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Ex vivo culture affects the migration of hematopoietic progenitors after intra-bone marrow injection (2007)
  • 著者名/発表者名: Yamamura, K, Ohishi, K, Masuya, M, Katayama, N
  • 学会等名: 69th Annual meeting of Japanese Society of Hematology/49th Annual meeting of Japanese Society of Clinical Hematology
  • 発表場所: Yokohama, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Hematopoietic origin of hepatic stellate cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Masuya, M
  • 学会等名: Japanese-German Conference Regenerative Medicine
  • 発表場所: Rostock, Germany
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Association of circulating hematopoietic stem cells with liver injury (2007)
  • 著者名/発表者名: Masuya, M, Katayama, N, Shiraki, K, Miyazaki, H, Ohishi, K, Shiku, H
  • 学会等名: 68th Annual meeting ofJapanese Society of Hematology/48th Annual meeting of Japanese Society of Clinical Hematology
  • 発表場所: Fukuoka, Japan
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] 末梢血造血幹細胞と肝傷害の関係 (2006)
  • 著者名/発表者名: 桝屋正浩, 他
  • 学会等名: 第68回日本血液学会、第48回日本臨床血液学会合同総会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2006-10-08
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] 肝星細胞は造血幹細胞起源である (2006)
  • 著者名/発表者名: 宮田恵里, 他
  • 学会等名: 第4回幹細胞シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2006-05-19
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Hematopoietic origin of hepatic stellate cell (2006)
  • 著者名/発表者名: Miyata, E, Masuya, M, Katayama, N
  • 学会等名: 4th stem cell research symposium
  • 発表場所: Tokyo, Japan
  • 年月日: 2006-05-19
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [学会発表] Hematopoietic origin of hepatic stellate cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Miyata E, Masuya M, Ishikawa F, et. al.
  • 学会等名: 48th Annual Meeting of American Society of Hematology.
  • 発表場所: Orlando, USA
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Hematopoietic origin of hepatic stellate cell (2006)
  • 著者名/発表者名: Miyata, E, Masuya, M, Ishikawa, F, Yoshida, S, Kato, K, Ohishi, K, Katayama, N
  • 学会等名: 48th Annual Meeting of American Society of Hematology
  • 発表場所: Orlando, USA
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より