| 研究課題/領域番号 |
18591152
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児科学
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| 研究機関 | 神戸大学 |
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研究代表者 |
竹島 泰弘 神戸大学, 医学系研究科, 准教授 (40281141)
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| 研究分担者 |
松尾 雅文 神戸大学, 医学系研究科, 教授 (10157266)
八木 麻理子 神戸大学, 医学系研究科, 助教 (60362787)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,950千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 450千円)
2007年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2006年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | 筋ジストロフィー / 分子治療 / アンチセンスオリゴヌクレオチド / エクソン・スキッピング / スプライシング / エクソンスキッピング / 小児神経学 |
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| 研究概要 |
ジストロフィン遺伝子のエクソン欠失を有するDuchenne型筋ジストロフィー(以下DMD)に対して、アンチセンスオリゴヌクレオチド(以下AS-oligo)によってエクソンスキッピングを誘導し、アウト・オフ・フレーム欠失をイン・フレーム欠失に修正する方法が有効な治療法として注目されている。私たちは、この治療法をすでに臨床へ応用し、その有効性を示してきた。しかし、本治療法を検討するために適したモデル動物が無かったため、モデル動物での治療効果の検証は全くなされてなく、臨床応用をさらに進めていく上での障害になっていた。本研究では、新たに作成されたDMDモデルマウスであるエクソン52ノックアウトマウスを用いて、エクソン51あるいは53のスキッピングを誘導するAS-oligo治療について検討を行った。
エクソン52ノックアウトマウスより骨格筋初代培養細胞を作成し、筋細胞への分化を誘導した後リポフェクチン法を用いてエクソン51あるいは53の塩基配列に対する18-20塩基のAS-oligoを導入した。導入後48時間培養を行いRNAを抽出し、RT-PCR法によってエクソン51あるいは53のスキッピングを検討したところ、これらのエクソンのスキッピングを誘導するAS-oligoが見出された。スキッピング誘導によりアウト・オフ・フレーム欠失はイン・フレーム欠失に修正されていた。さらに、エクソン52欠失DMDモデルマウスに対しAS-oligoの静脈内および腹腔内投与を行なった。その結果明らかな副作用などはみられず、安全に投与することが可能であった。
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