| 研究課題/領域番号 |
18591441
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
外科学一般
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
蒲原 英伸 熊本大学, 医学部附属病院, 助教 (90398222)
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| 研究分担者 |
馬場 秀夫 熊本大学, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (20240905)
岩瀬 弘敬 (岩瀬 広敬) 熊本大学, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (40211065)
猪山 堅一 (猪山 賢一) 熊本大学, 医学部附属病院, 准教授 (10040536)
石河 隆敏 熊本大学, 医学部附属病院, 非常勤診療医師 (00343351)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,920千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 420千円)
2007年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2006年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | チロシンキナーゼレセプター / コラーゲン / 癌細胞 / 間質浸潤(転移) / RNA干渉 / RNA平渉 |
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| 研究概要 |
1.DDR1(Discoidin domain receptor 1)の強発現株のMCF7を用いたDDR1のstably knock down cell(K/D)細胞において、形態学的に細胞間接着が解離し偽足を伸長したが、PI3K阻害剤の存在により偽足の伸長は抑制され、filopodia形成に関与するcdc42活性、lamellipodiaとmembrane ruffles形成に関与するRacの活性が亢進していた。この活性は細胞の運動・浸潤能に関与しておりDDR1は癌の悪性度を負に制御していることが示唆される。
2.K/D細胞において、細胞増殖の系にWTS assayを用いて再検討を行った。コラーゲンの非存在下、及び存在下のいずれの場合においても増殖活性は増強し、PI3K阻害剤によってその活性は抑制された。
3.K/D細胞において、FAK、Cas1のリン酸化が促進し、互いに結合することが分かったが、市販されているFAKの特異的部位のphosphorylationを認識する抗体を用いて検証したが、明らかなリン酸化部位の同定にはまだ至ってない。PI3Kを介したシグナル伝達がK/D細胞においては重要であるが、PTENの発現量に影響はなかった。
4.DDR1の下流に発現する遺伝子を検証するため、DDR1のknock down cell(K/D)を用いてコラーゲンの存在の有無、および接着後の経時的変化について検討するため。各種条件下における細胞培養でmRNAを精製し、cDNA arrayによる解析を行い、幾つかの遺伝子群について解析をしている。
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