子宮頸部発癌に関与する新規アポトーシス関連蛋白の探索とそれに基づく治療戦略の開発

• 研究課題/領域番号: 18591824
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 中川 俊介 東京大学, 医学部・附属病院, 助教 (70270874)
• 研究分担者: 矢野 哲 東京大学, 医学部・附属病院, 准教授 (90251264)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,890千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 390千円); 2007年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2006年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
• キーワード: ヒトパピローマウイルス / human Scribble / E6癌蛋白 / ユビキチン化 / アポトーシス / 新規癌抑制遺伝子 / 子宮頸部腺癌

研究概要

子宮頸癌の発症には約95%においてヒトパピローマウイルス(HPV)の感染が関与するとされている。HPVはE6およびE7という2つの癌遺伝子をもち、それらのコードする癌蛋白はユビキチンープロテアソーム系を介して、ヒトの癌組織において遺伝子変異が認められる癌抑制蛋白質であるp53およびpRbを分解する。私はGST fusion蛋白としてE6APを発現させ、baculovirusを用いてE6蛋白を発現し、GST pull-down法により、E6-E6AP複合体の結合蛋白の同定を試み、細胞極性の決定に関わる癌抑制蛋白としてhuman Scribble(hScrib)を同定した。ショウジョウバエにおいてはScribbleは上皮の形成に不可欠な細胞極性決定因子であり、その遺伝子変異により、細胞は極性を失い、組織の異常増殖と腫瘍形成を来す。そのヒトホモログであるhScribは細胞に与えられたTNFもしくはUVなどのアポトーシスシグナルにより、分解されるdeath substrateであることが分かった。このdeath signalにより分解を受けないhScribの変異体(Asp-504-Ala)を導入した細胞では、UVを照射しても細胞膜に発現したhScribやE-cadherinは分解されなかった。このため、hScribはアポトーシスシグナル伝達経路においてdeath signalにより分解を受けることがアポトーシスの進展に重要な役割を持つことが分かった。この研究成果をGenes to Cellsに発表した。また、GST fusion E6蛋白に選択的に結合する蛋白をペプチドマススペクトロメトリー(PMF)法により解析し、新規のE6の結合蛋白として、乳癌において遺伝子の欠失が報告されているdeleted in breast cancer-1(DBC-1)を同定された。DBC-1はそのEF hand motif等を介してE6と結合し、E6はubiquitin-protein ligaseであるE6APとともにDBC-1をユビキチン化することにより分解する。細胞内において、プロテアソーム阻害剤もしくはE6に対するRNAiを添加したところ、HPV陽性の子宮頸癌細胞内のDBC-1の発現が増加することより、DBC-1の発現がこの細胞内ではE6によりコントロールされていることが明らかになった。プロテアソーム阻害剤の投与がこれらのE6により分解を受けているhScribおよびDBC-1の発現抑制を回復することから、プロテアソーム阻害剤の子宮頸癌に対する新規治療薬としての意義を現在検討しており、マウスの移殖したHPV陽性の子宮頸癌細胞の移植片に対して抗腫瘍効果を発揮することが明らかになった。今後は臨床への応用を検討して行く

研究成果

• [雑誌論文] hScrib, a human homologue of Drosophila neoplastic tumor suppressor, is a novel death substrate targeted by caspase during the process of apoptosis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Tsuruga T, Nakagawa S, et. al.
  • 雑誌名: Genes to Cells. (In press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cellular mechanisms of growth inhibition of human endometrial cancer cell line by an antagonist of growth hormone-releasing hormone. (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhao L, Yano T, Osuga Y, Nakagawa S., et. al.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 32(3) ページ: 593-601
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cellular mechanisms of growth inhibition of human endometrial cancer cell line by an antagonist of growth hormone-releasing hormone (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhao L, Yano T, Osuga Y, Nakagawa S, Oishi H, Wada-Hiraike O, Tang X, Yano N, Kugu K, Schally AV, Taketani Y.
  • 雑誌名: Int J Oncol 32(3) ページ: 593-601
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Combined phospho-Akt and PTEN expressions associated with post-treatment hysterectomy after conservative progestin therapy in complex atypical hyperplasia and stage la, G1 adenocarcinoma of the endometrium (2008)
  • 著者名/発表者名: Minaguchi T, Nakagawa S, Takazawa Y, Nei T, Horie K, Fujiwara T, Osuga Y, Yasugi T, Kugu K, Yano T, Yoshikawa H, Taketani Y.
  • 雑誌名: Cancer Lett 248(1) ページ: 112-22
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Cellular mechanisms of growth inhibition of human endometrial cancer cell line by anantagonist of growth hormone-releasing hormone. (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhao L, Yano T, Osuga Y, Naka, gawa S, et. al.
  • 雑誌名: Int J oncol 32(3) ページ: 593-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] hScrib, a human homologue of Drosophila neoplastic tumor suppressor, is a novel death substrate targeted by caspase during process of apoptosis (2008)
  • 著者名/発表者名: Sone K, Nakagawa S, et. al.
  • 雑誌名: Genes to Cells 掲載確定
  • 査読あり
• [雑誌論文] Loss of Hugl-1 expression associates with lymph node metastasis in endometrial cancer. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsuruga T, Nakagawa S, et. al.
  • 雑誌名: Oncol Res. 16(9) ページ: 431-5
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Treatment with paclitaxel plus carboplatin, alone or with irradiation, of advanced or recurrent endometrial carcinoma. (2007)
  • 著者名/発表者名: Arimoto T, Nakagawa S, et. al.
  • 雑誌名: Gynecol Oncol. 104(1) ページ: 32-5
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combined phospho-Akt and PTEN expressions associated with post-treatment hysterectomy after conservative progestin therapy in complex atypical hyperplasia and stage Ia, G1 adenocarcinoma of the endometrium. (2007)
  • 著者名/発表者名: Minaguchi T, Nakagawa S, et. al.
  • 雑誌名: Cancer Lett 8;248(1) ページ: 112-22
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Loss of Hugl-1 expression associates with lymph node metastasis in endometrial cancer (2007)
  • 著者名/発表者名: Tsuruga T, Nakagawa S, Watanabe M, Takizawa S, Matsumoto Y, Nagasaka K, Sane K, Hiraike H, Miyamoto Y, Hiraike O, Minaguchi T, Oda K, Yasugi T, Yano T, Taketani Y.
  • 雑誌名: Oncol Res 16(9) ページ: 431-5
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Treatment with paclitaxel plus carboplatin, alone or with irradiation, of advanced or recurrent endometrial carcinoma (2007)
  • 著者名/発表者名: Arimoto T, Nakagawa S, Yasugi T, Yoshikawa H, Kawana K, Yano T, Taketani Y.
  • 雑誌名: Gynecol Oncol 104(1) ページ: 32-5
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Treatment with pacliaxel plus carboplatin, alone or with irradiation, of advanced or recurrent endometrial carcinoma. (2007)
  • 著者名/発表者名: Arimoto T, Nakagawa S, et. al.
  • 雑誌名: Gynecol Oncol. 104(1) ページ: 32-35
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combined phospho-Akt and PTEN expressions associated with post-treatment hysterectomy after conservative progestin therapy in complex atypical hyperplasia and stage Ia, G1 adenocarcinoma of the endometrium (2007)
  • 著者名/発表者名: Minaguchi T, Nakagawa S, Takazawa Y, Nei T, Horie K, Fujiwara T, Osuga Y, Yasugi T, Kugu K, Yano T, Yoshikawa H, Taketani Y.
  • 雑誌名: Cancer Lett. 248(1) ページ: 112-122
• [雑誌論文] Human homolog of Drosophila tumor suppressor Scribble negatively regulates cell-cycle progression from G1 to S phase by localizing at the basolateral membrane in epithelial cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagasaka K, Nakagawa S
  • 雑誌名: Cancer Sci. 1217-25. 97(11) ページ: 1217-25
  • NAID: 10019377176
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human scribble, a novel tumor suppressor identified as a target of high-risk HPV'E6 for ubiquitin-mediated degradation, interacts with adenomatous polyposis coli. (2006)
  • 著者名/発表者名: Takizawa S, Nagasaka K, Nakagawa S, Et al.
  • 雑誌名: Genes Cells. 11(4) ページ: 453-64
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of a cellular ubiquitin-protein ligase E6AP in the ubiquitin-mediated degradation of extensive substrates of high-risk human papillomavirus E6. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y, Nakagawa S, et. al.
  • 雑誌名: J Med Virol. 78(4) ページ: 501-7
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human homolog of Drosophila tumor suppressor Scribble negatively regulates cell-cycle progression from G1 to S phase by localizing at the basolateral membrane in epithelial cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagasaka K, Nakagawa S, Yano T, Takizawa S, Matsumoto Y, Tsuruga T, Nakagawa K, Minaguchi T, Oda K, Hiraike-Wada O, Ooishi H, Yasugi T, Taketani Y.
  • 雑誌名: Cancer Sci 97(11) ページ: 1217-25
  • NAID: 10019377176
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Human scribble, a novel tumor suppressor identified as a target of high-risk HPV E6 for ubiquitin-mediated degradation, interacts with adenomatous polyposis coli (2006)
  • 著者名/発表者名: Takizawa S, Nagasaka K, Nakagawa S, Yano T, Nakagawa K, Yasugi T, Takeuchi T, Kanda T, Huibregtse JM, Akiyama T, Taketani Y.
  • 雑誌名: Genes Cells 11(4) ページ: 453-64
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Involvement of a cellular ubiquitin-protein ligase E6AP in the ubiquitin-mediated degradation of extensive substrates of high-risk human papillomavirus E6 (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y, Nakagawa S, Yano T, Takizawa S, Nagasaka K, Nakagawa K, Minaguchi T, Wada O, Ooishi H, Matsumoto K, Yasugi T, Kanda T, Huibregtse JM, Taketani Y.
  • 雑誌名: J Med Virol 78(4) ページ: 501-7
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Human Scribble, a novel tumor suppressor identified as a target of high-risk HPV E6 for ubiquitin-mediated degradation, interacts with adenomatous polyposis coli (2006)
  • 著者名/発表者名: Takizawa S, Nagasaka K, Nakagawa S, Yano T, Matsumoto Y, Nakagawa K, Minaguchi T, Oda K, Hiraike-Wada O, Ooishi H, Matsumoto K, Yasugi T, Taketani Y
  • 雑誌名: Genes to Cells. 2006 11 ページ: 453-464
• [雑誌論文] Involvement of a cellular ubiquitin-protein ligase E6AP in the ubiquitin-mediated degradation of extensive substrates of high-risk human papillomavirus E6. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y, Nakagawa S, Yano T, Takizawa S, Nagasaka K, Nakagawa K, Minaguchi T, Wada O, Ooishi H, Matsuiuoto K, Yasugi T, Kanda T, Huibregtse JM, Taketani Y.
  • 雑誌名: J Med Virol. 78(4) ページ: 501-507
• [雑誌論文] Human scribble, a novel tumor suppressor identified as a target of high-risk HPV E6 for ubiquitin-mediated degradation, interacts with adenomatous polyposis coli (2006)
  • 著者名/発表者名: Takizawa S, Nagasaka K, Nakagawa S, Yano T, Nakagawa K, Yasugi T, Takeuchi T, Kanda T, Huibregtse JM, Akiyama T, Taketani Y.
  • 雑誌名: Genes to Cells 11(4) ページ: 453-464
• [雑誌論文] Human homolog of Drosophila tumor suppressor Scribble negatively regulates cell-cycle progression from G1 to S phase by localizing at the basolateral membrane in epithelial cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Nagasaka K, Nakagawa S, Yano T, Takizawa S, Matsumoto Y, Tsuruga T, Nakagawa K, Minaguchi T, Oda K, Hiraike-Wada O, Ooishi H, Yasugi T, Taketani Y.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 97(11) ページ: 1217-1225
  • NAID: 10019377176
• [雑誌論文] hScrib, a human homologue of Drosophila neoplastic tumor suppressor, is a novel death substrate targeted by caspase during the process of apoptosis
  • 著者名/発表者名: Kenbun Sone, Shunsuke Nakagawa
  • 雑誌名: Genes to Cells (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Analysis of the expression and localisation of a LAP protein, human scribble, in the normal and neoplastic epithelium of uterine cervix.
  • 著者名/発表者名: Nakagawa S., Yano T, Nakagawa K, Takizawa S, Suzuki Y, Yasugi T, Huibregtse JM, Taketani Y.
  • 雑誌名: Br J Cancer.
• [雑誌論文] The DNA mismatch repair gene hMSH2 is a potent coactivator of oestrogen receptor alpha
  • 著者名/発表者名: Wada-Hiraike O, Yano T, Nei T, Matsumoto Y, Nagasaka K, Takizawa S, Oishi H, Arimoto T, Nakagawa S, Yasugi T, Kato S, Taketani Y.
  • 雑誌名: Br J Cancer. 2005 ページ: 2286-2291
• [雑誌論文] Comparison between conventional surgery and radiotherapy for FIGO stage I-II cervical carcinoma : a retrospective Japanese study
  • 著者名/発表者名: Yamashita H, Nakagawa K, Tago M, Shiraishi K, Nakamura N, Ohtomo K, Oda K, Nakagawa S., Yasugi T, Taketani Y.
  • 雑誌名: Gynecol Oncol. ページ: 834-839
• [学会発表] hScrib, a human homologue of Drosophila neoplastic tumor suppressor, is a novel death substrate targeted by caspase during process of apoptosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Sone K, Nakagawa S, et. al.
  • 学会等名: 日本癌学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-10-27
• [学会発表] Deleted in breast cancer-1 (DBC-1) is targeted for the 2007 July, ubiquitie-mediated degradation by human papillomavirus E6 oncoprotein (2007)
  • 著者名/発表者名: Yoko Matsumoto
  • 学会等名: DNA tumor virus
  • 発表場所: Trieste, Italia
  • 年月日: 2007-07-21
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [学会発表] Deleted in breast cancer-1(DBC-1) is targeted for the ubiquitin-mediated degradation by human papillomavirus E6 oncoprotein (2007)
  • 著者名/発表者名: Yoko Matsumoto
  • 学会等名: DNA tumor virus
  • 発表場所: Trieste, Italia
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より