| 研究課題/領域番号 |
18591952
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児外科学
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| 研究機関 | 岐阜大学 |
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研究代表者 |
本橋 力 岐阜大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40334932)
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| 研究分担者 |
國貞 隆弘 (國定 隆弘) 岐阜大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (30205108)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,950千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 450千円)
2007年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2006年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | 神経堤細胞 / ES細胞 / 転写因子Sox10 / 蛍光タンパク質 / セルソーター / 神経堤症 |
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| 研究概要 |
本研究は、「神経堤症の治療をめざして、ES細胞から誘導した神経堤細胞を用いて、その移動機構や分化機構を解明するもの」である。神経堤細胞の移動・分化を詳細に解析するためには、ES細胞から誘導した神経堤細胞のみを純化して、解析することが必要であった。このため、神経堤細胞の発生初期から発現する転写因子Sox10のゲノムの下流に、蛍光タンパク質(GFP)を相同組み換えによって導入した遺伝子改変ES細胞を作成し、Sox10陽性(GFP陽性)を指標にES細胞由来の神経堤細胞を純化することを計画した。本研究の初年度に、その遺伝子改変ES細胞を樹立する事に成功した。
このES細胞を用いてSox10陽性(GFP陽性)を指標にセルソーターを用いてES細胞由来の神経堤細胞を純化する事にも成功した。純化したES細胞由来の神経堤細胞は移植実験により、生体内の神経堤細胞と同様の移動能を有していることが観察された。樹立したES細胞を用いて神経堤細胞への分化過程を他の神経堤細胞のマーカーKit分子の発現と合わせて詳細に調べたところ、神経堤細胞には未熟なもの(Sox10+/Kit-細胞)と、より分化したもの(Sox10+/Kit+細胞)が存在することが見いだされた。
樹立したES細胞を用いて遺伝子改変マウスの作成にも成功した。このマウスは、Sox10陽性(GFP陽性)を指標に生体での神経堤細胞の挙動が観察できるのみならず、生体から神経堤細胞を単離して、その分化能等を詳細に解析することが可能である。今後、このマウスの神経堤細胞の解析を通して、神経堤細胞由来の各組織の発生を明らかにするとともに、生体から神経堤細胞を単離し、その分化能の解析・移植応用により、神経堤症治療に貢献していく。
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