| 研究課題/領域番号 |
18592039
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
機能系基礎歯科学
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
根本 孝幸 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (90164665)
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| 研究分担者 |
馬場 友巳 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (60189727)
山田 慎一 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (50380853)
金谷 直子 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教務職員 (10380982)
小早川 健 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教務職員 (10153587)
根本 優子 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (10164667)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
3,980千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 480千円)
2007年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2006年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | 分子シャペロン / Hsp90 / ダイマー / アイソフォーム / SNP / 2-ハイブリッドシステム / HSP90 / 熱ショックタンパク質 / ミスセンス変異 |
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| 研究概要 |
ヒトには異なる遺伝子にコードされる2つのアイソフォーム、Hsp90αとHsp90βが存在する。両者の物化学的性質の違いとしてHsp90βのダイマー形成能が低下していることが知られている。その差はC末側の543-685アミノ酸内に局在するアミノ酸の変異による(Nemotoら、1995)。そこで本研究では、その領域のアイソフォームで置換している16アミノ酸を、Hsp90α型からHsp90α型へ置換し、大腸菌2-ハイブリッド法でダイマー形成能を定量的に解析した。その結果、16種類の中で5アミノ酸の置換においてダイマー能の有意な上昇が見られた。特にAla566>Thr、Met629>Alaの置換ではHsp90αレベルまでダイマー形成能が回復した(小早川ら,Cell Stress&Chaperones印刷中)。ヒトHsp90には、アミノ酸変異を伴うミスセンス変異が2例報告されている。そのうちHsp90αの488番目のGlnがHisに置換したケースでは,酵母Hsp90発現系を用いた実験によって,この変異型HSP90が機能できないこと示されている.この変異がHsp90のどの機能を変化させるのかを検討した.その結果、ダイマー形成能はHsp90α同士、Hsp90と変異型Hsp90、変異型Hsp90同士の順に低下した。この結果はGln488>Hisの変異はHsp90のダイマー形成能の低下をもたらすためにHSP90が機能しないという可能性を示している。Gln488はほとんどのHsp90ファミリータンパク質で保存されているものの、マウスやヒトのミトコンドリア型Hsp90であるTrap1ではThrに置換していた。そこでHsp90αのGln488をThrに置換したところ、ダイマー形成能が保たれた。この結果からもこの位置のアミノ酸がダイマー形成に重要であることが支持された。
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