| 研究課題/領域番号 |
18599001
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児科学
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| 研究機関 | 山形大学 |
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研究代表者 |
北中 幸子 山形大学, 医学部, 講師 (30431638)
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| 研究分担者 |
沼倉 周彦 山形大学, 医学部, 助教 (00400549)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
4,010千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 510千円)
2007年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
2006年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
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| キーワード | HNF-1β / 糖尿病 / インスリン / IGF-I / MRP2 / 転写活性 / 家族性 / 変異体機能解析 / MPR2 / 子宮内発育不全 / 胆汁うっ滞 |
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| 研究概要 |
家族性若年発症糖尿病の原因であるHNF-1β異常症には、糖尿病以外にも多様な症状があることが報告されてきたが、その発症メカニズムは不明である。本研究では、HNF-1β異常によっておこる糖尿病やその他の多様な症状の発症メカニズムを、分子生物学的に解析することを目的とした。まず、これまでのHNF-1β異常症報告例と自験例の症状を詳細に検討し、HNF-1β異常に関連すると考えられる症状を選定した。ほとんどの症例で認められた糖尿病、一部の症例に認められた子宮内発育不全と胆汁うっ滞について発症メカニズムを検討することにした。これら3つの症状に関連する下流候補遺伝子より選別し、プロモーターにHNF-1 siteをもつ、インスリン、insulin-like growth factor-I
(IGF-1)、multidrug resistance protein2(MRP2)を選択した。ヒト生体内での作用に近い系でみるため、これらのヒト遺伝子のプロモーターを含むレポータープラスミドを作成し、HNF-1βの転写活性を検討した。その結果、ヒトインスリン、IGF-I、MRP2は、HNF-1βによって転写が活性化されることが明らかとなった。生体内では、HNF-1βはHNF-1αとヘテロダイマーをとるため、次にHNF-1α存在下でのHNF-1βの作用を検討した。その結果、ヒトインスリンプロモーターでは、HNF-1βとHNF-1α単独より、両者の協調作用によって転写活性が顕著に増大することが判明した。つぎに、HNF-1βの変異体の作用を解析した。変異体としては、先の3つの症状が認められたH153N変異体と、糖尿病のみが認められた変異体を用いて解析した。その結果、ヒトインスリンプロモーターでは、いずれのHNF-1β変異体も、HNF-1αとの協調作用が全く認められないことが判明した。つまり、HNF-1β異常症では、インスリン転写が障害されていることが、糖尿病の発症に関連していると考えられた。一方、ヒトIGF-IとMRP2プロモーターでは、H153N変異体に、変異特異的なHNF-1αおよび野生型HNF-1βの転写抑制作用が認められた。このような変異体特有の標的遺伝子転写制御の異常により、症例によって異なる症状を呈すると考えられた。
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