研究概要 |
(1)成体脂肪由来前駆細胞からの神経前駆細胞単離法の開発(adipocluster法)本研究における神経堤幹細胞ソースの候補組織として、胎児真皮由来細胞(SKP細胞)などを含めた種々の比較検討を行い、現在のところ最も回収効率の良い脂肪組織由来前駆細胞の解析を行っている。咋年度以降方法論としての試行錯誤を重ね、ラット・マウス由来のいわゆるadipose-derived stromalcells(ASC)をアガロースロートによる非接着処理を行った培養容器を用いてで数目浮遊培養させてsphere様細胞塊を得た。この細胞塊は神経幹細胞マーカーnestin, musashi-1の発現を認めたほか(Nagase, et. al.2007)、神経堤マーカーSlug,p75などの発現、血管内皮マーカーCD31,Flk-1などの発現も認めた。この細胞塊は細胞の凝集体であって従来のneurosphereとは異なるため、adipoclusterと名づけて特許出願を行った。 (2)adipoclusterの神経系への分化誘導及び神経堤的性質の解祈すでに前年度にヒト脂肪由来neurosphereをラベルしてマウス全胚培養系に移植し、神経堤幹細胞様の遊走能を認めている(Nagase, et. al.2007)。本年度はさらにラット・マウス由来adipoclusterにおける神経系への分化誘導を、neurosphereや脊髄explantとの共培養の系において試み、神経系マーカー(Tuj-1など)やグリア系マーカー(5-100,p75など)の発現の増強を認めた。 (3)その他全胚培養を用いて、神経堤異常に伴う胎児奇形のmicro CTによる形態評価法について論文発表した。(Nagase,in press)また胎生期のShhシグナルの役割についての総説を執筆した.
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