ペプチドを含む機能性食品開発法の創造に関する研究

• 研究課題/領域番号: 18650220
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 食生活学
• 研究機関: 京都府立大学
• 研究代表者: 佐藤 健司 京都府立大学, 人間環境学部, 教授 (00202094)
• 研究分担者: 朴 恩榮 京都府立大学, 人間環境学部, 助手 (50405239)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円); 2007年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円); 2006年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
• キーワード: コラーゲンペプチド / 食事由来ペプチド / 固相抽出 / プレカラム誘導化 / ピログルタミン酸ペプチド / 問脈血 / Pro-Hyp / Hyp-Gly / ペプチド / 機能性食品 / 吸収 / 構造解析 / HPLC

研究概要

ポリスチレンにスルフォン酸を導入した強カチオン交換樹脂を導入したスピンカラムを用い、て数mLのヒト末梢血中に存在する食事由来ペプチドのキャプチャリングに成功した。このペプチド画分を用いて、サイズ排除クロマトグラフィーで分画後、フェニルイソチオシアネート(PITC)によりペプチドを誘導化した。この処理により親水性ペプチドの逆相HPLCによる分離が劇的に改善され、さらにフェニル基の存在に基づく254nmにおける特異的な検出が可能となった。この手法を用い、コラーゲンペプチドを摂取したヒト末梢血から主要な食事由来コラーゲンペプチドであるPro-Hypが妨害無く検出された。さらにこれまでは分離できなかった親水性ペプチドであるHyp-Glyも主要な食事由来コラーゲンペプチドとしてヒト末梢血中に存在することを明らかにした。さらに大豆たんぱく質分解物、エラスチン分解物を摂取したヒト末梢血からも食事由来ペプチドの分離に成功した。
またアミノ末端がピログルタミン酸となったアミン末端閉鎖ペプチドを摂取したラットもン脈血から前述のスピンカラムによりアミノ基を持つペプチド・アミノ酸を除去した後、ピログルタメートアミノペプチダーゼで消化し、遊離してきたピログルタミン酸をジニトロヒドラジンと反応させ、反応物を逆相HPLCで分離することによりピログルタミン酸ペプチドがラット問脈血中に移行することを初めて証明した。

研究成果

• [雑誌論文] Transport of a tripeptide, Gly-Pro-Hyp, across the porcine intestinal brush-border membrane (2007)
  • 著者名/発表者名: Aito-lnoue, M.
  • 雑誌名: Journal of Peptide Science 13 ページ: 468-474
  • 査読あり
• [雑誌論文] タンパク質酵素分解物を含む市販食品中の遊離およびペプチド型ピログルタミン酸含量 (2007)
  • 著者名/発表者名: 佐藤健司
  • 雑誌名: 食品加工技術 27 ページ: 18-22
• [雑誌論文] Comparison of quantity and structures of hydroxyproline-containing peptides in human blood after oral ingestion of gelatin hydrolysates from different sources. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ohara, H., Matsumoto, H., Ito, K., Iwai, K., Sato, K
  • 雑誌名: J.Agric.Food Chem. 55 ページ: 1532-1533
• [雑誌論文] Improvement in isolation and identification of food-derived peptides in human plasma based on precolumn derivatization of peptides with phenyl isothiocyanate. (2006)
  • 著者名/発表者名: Aito-Inoue, M., Ohtsuki, K., Nakamur, Y., Park, E.Y., Iwai, K., Morimatsu, F., Sato, K.
  • 雑誌名: J.Agric.Food Chem. 54 ページ: 5261-5266
• [雑誌論文] 活性ペプチド同定の最近の話題 (2006)
  • 著者名/発表者名: 佐藤健司, 橋本香織, 岩井浩二, 井上美佐子
  • 雑誌名: 食品加工技術 26 ページ: 123-127
• [雑誌論文] 経口摂取ペプチドの血中検出 (2006)
  • 著者名/発表者名: 佐藤健司, 岩井浩二, 森松文毅佐, 藤典子, 井上美佐子
  • 雑誌名: バイオインダストリー 23 ページ: 19-25