プロテオームを基盤とする膠原病関連新規自己抗体の同定・解析法の確立

• 研究課題/領域番号: 18651097
• 研究種目: 萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用ゲノム科学
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 小森 浩章 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (30372725)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2007
• 研究課題ステータス: 完了 (2007年度)
• 配分額: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円); 2007年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円); 2006年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
• キーワード: 無細胞蛋白質合成系 / AlphaScreen法 / 自己抗体 / 自己免疫疾患 / 疾患モデル動物 / 組み換え近交系 / 膠原病 / 無細胞タンパク質合成系 / 疾患モデル / MRL / lprマウス / 組換え近交系 / genomics

研究概要

目的:無細胞タンパク質合成系とAlphaScreen法、ならびに膠原病関連組換え近交系MXH/lprマウスを組合わせ、膠原病の病因・病態解析や病状の把握に有用な新規自己抗体をhigh-throughputに検出、同定する手法の確立を試みた。
方法:これまでにMRL/lprマウスとC3H/lprマウス(組換え近交系MXH/lprの親系統)の交配系を用いて同定された膠原病関連疾患感受性遺伝子座から位置的候補遺伝子を120個選び、無細胞タンパク質合成系によりビオチン融合蛋白質を合成した。これらの合成蛋白質に対する血清中自己抗体の有無を、組換え近交系MXH/lprマウスと両親系統の計15系統を対象に、AlphaScreen法を用いて解析した。検出された自己抗体価と血管炎病態の組織学的スコアとの関連を統計学的に解析した。
結果:解析の結果、血管炎病態と統計学的に有意な相関(P<0.05)を示す17個の新規自己抗体が認められた。検出された自己抗体は月齢により異なるものであった。今後は無細胞合成蛋白質系を用いたELISA systemの樹立によりAlphaScreen法による解析結果を定量的に検証する実験系の確立を目指す。
結論:本systemはhigh throughputな新規自己抗体検出に非常に有用である。

研究成果

• [雑誌論文] An epistatic effect of the female specific loci on the development of autoimmune vasculitis and antinuclear autoantibody in murine lupus. (2006)
  • 著者名/発表者名: Zhang MC, Misu N, Furukawa H, Watanabe Y, Terada M, Komori H, Miyazaki T, Nose M, Ono M.
  • 雑誌名: Ann Rheum Dis 65 ページ: 495-500
• [雑誌論文] A signal adaptor SLAM-associated protein regulates spontaneous autoimmunity and Fas-dependent lymphoproliferation in MRL-Faslprlupus mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Komori H, Furukawa H, Mori S, Ito MR, Terada M, Zhang MC, Ishii N, Sakuma N, Nose M, Ono M.
  • 雑誌名: J Immunol 176 ページ: 395-400
• [雑誌論文] Cappuccino mutation in an autoimmune-prone strain of mice suggests a role of platelet function in the progression of immune complex crescentic glomerulonephritis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yoshida M, Saiga K, Hato T, Iwaki S, Niiya T, Arita N, Komori H, Tsubaki T, Furukawa H, Terada M, Maeyama K, Nemoto K, Nose M, Ono M.
  • 雑誌名: Arthritis Rheum ページ: 2934-2943