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大腸菌におけるタンパク質膜挿入に関与する膜内在性新因子の構造決定

研究課題

研究課題/領域番号 18651109
研究種目

萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 生物分子科学
研究機関大阪大学

研究代表者

松森 信明  大阪大学, 理学研究科, 助教 (50314357)

研究分担者 西山 賢一  東京大学, 分子細胞生物学研究所, 准教授 (80291334)
村田 道雄  大阪大学, 理学研究科, 教授 (40183652)
安達 清治  大阪大学, 理学研究科, 技術専門職員 (90379305)
研究期間 (年度) 2006 – 2007
研究課題ステータス 完了 (2007年度)
配分額 *注記
3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
2007年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2006年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
キーワード大腸菌 / 膜タンパク質 / 膜挿入 / 膜透過装置
研究概要

膜タンパク質はリボソームによって生合成された後、最終的に機能発現するために膜へ挿入される。多くの膜タンパク質の膜挿入は、その生合成に共役して起こることが知られている。膜タンパク質は通常疎水性の高い領域で膜を貫通しており、この疎水性の高い領域が合成されるとリボソーム上でシグナル認識粒子(SRP)と結合する。SRPはリボソーム/新生ポリペプチド鎖複合体を膜上のSRP受容体に受け渡し、続いてタンパク質膜透過装置(大腸菌ではSecYEG)上で膜挿入が進行すると考えられている。
研究分担者である西山らは、膜挿入反応には既知のSecYEGだけでなく、7kDaの新因子も必要であることを見出した。この因子は大部分が糖脂質であるが、異常アミノ酸を含むペプチド部分も有しており、さらに核酸の存在も示唆されたことから、この新因子は極めて複雑な構造をしていることが予想される。こうした因子はこれまでどのような生物にも知られておらず、まったく新しい化合物であるといえる。そこで、本研究ではこの新因子の構造を決定するとともに、タンパク質膜挿入反応におけるこの因子の構造と機能の関係を明らかにすることを目的とする。
今年度は昨年度に引き続き、この新因子の構造決定に向けて、大腸菌からの新因子の精製法の確立に努めた。昨年度までは不純物がまだ多く、構造解析はできなかったが、今年度は種々の精製手法を試みた結果、活性成分を精製するための精製法をほぼ確立することができた。まだ微量であるが、今後サンプル量を上げることで、構造解析が可能であると期待される。

報告書

(2件)
  • 2007 実績報告書
  • 2006 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2008 2007 2006

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (6件)

  • [雑誌論文] Topology inversion of SecG is essential for the cytosolic SecA-dependent stimulation of protein translocation2007

    • 著者名/発表者名
      Sugai R., et. al.
    • 雑誌名

      J. Biol. Chem. 282

      ページ: 29540-29548

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 大腸菌における膜内在性タンパク質の膜挿入機構2007

    • 著者名/発表者名
      西山 賢一
    • 雑誌名

      生化学 79巻(印刷中)

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] A Derivative of Lipid A Is Involved in Signal Recognition Particle/SecYEG-dependent and -independent Membrane Integrations.2006

    • 著者名/発表者名
      Nishiyama K., Ikegami A., Moser M., Schiltz E., Tokuda H., Mueller M.
    • 雑誌名

      Journal of Biological Chemistry 281

      ページ: 35667-35676

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [学会発表] 大腸菌における膜内在性タンパク質の膜挿入機構2008

    • 著者名/発表者名
      西山賢一
    • 学会等名
      大阪大学蛋白質研究所セミナー「蛋白質の膜透過と膜挿入の分子メカニズム」
    • 発表場所
      大阪府吹田市
    • 年月日
      2008-01-25
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Pure systemを用いたタンパク質膜挿入反応の再構成2008

    • 著者名/発表者名
      阿部真人, 他
    • 学会等名
      大阪大学蛋白質研究所セミナー「蛋白質の膜透過と膜挿入の分子メカニズム」
    • 発表場所
      大阪府吹田市
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] PURE systemによる膜タンパク質の合成2007

    • 著者名/発表者名
      阿部真人, 他
    • 学会等名
      分子生物学会・生化学会合同大会
    • 発表場所
      神奈川県横浜市
    • 年月日
      2007-12-14
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 最小構成因子での膜タンパク質挿入2007

    • 著者名/発表者名
      阿部真人, 他
    • 学会等名
      無細胞生命科学研究会
    • 発表場所
      千葉県柏市
    • 年月日
      2007-10-19
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] ジアシルグリセロールによる自発的膜挿入抑制機構の解析2007

    • 著者名/発表者名
      川嶋洋介, 他
    • 学会等名
      農芸化学会大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2007-03-26
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 膜内在性タシパク質膜挿入の再構成2007

    • 著者名/発表者名
      西山賢一, 他
    • 学会等名
      大腸菌研究会
    • 発表場所
      静岡県藤枝市
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書

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公開日: 2006-04-01   更新日: 2016-04-21  

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