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リパーゼ・スーパーインデューサー作用機構の解明と有用蛋白質大量生産システムの構築

研究課題

研究課題/領域番号 18658037
研究種目

萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 応用微生物学
研究機関中央大学

研究代表者

石塚 盛雄  中央大学, 理工学部, 教授 (50168241)

研究期間 (年度) 2006 – 2008
研究課題ステータス 完了 (2008年度)
配分額 *注記
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
2008年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2007年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2006年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
キーワードリパーゼ超誘導機構 / リパーゼ / 高級アルコール / 二成分制御システム / 脂質の資化 / 発現制御 / 界面活タンパク質超誘導 / 長鎖炭化水素の資化 / スーパーインデューサー / 高級アルコールの資化 / 界面活タンパク質 / タンパク質分泌制御 / ステアリルアルコール / パルミチルアルコール / 蛋白質分泌制御
研究概要

1.一連のリパーゼ・スーパー・インデューサー群のうち、高級アルコールの作用機構に関しては、翻訳後の活性レベルと膜の透過性への寄与は少ないため、リパーゼ遺伝子発現レベルでのシグナル伝達機構が示唆された。センサーキナーゼとレスポンスレギュレーターからなる二成分制御システム(BT. Nixon, et al. PNAS, 83,7850-7854,1986)は、べん毛回転方向の制御や転写調節等に重要な役割を演じているが、最近、リパーゼ発現レベルでも二成分制御システムが働くとの報告が出された(J. Krzeslak, et al. Appl. Environ. Microbiol.74,1402-1411,2008)。Nixonらの系では約3倍程度で、我々のスーパーインデューサーシステムの数十倍よりも劣っていたため、更に詳細な検討を加える為、このシステムの大腸菌等への移築を試みている。
2.リパーゼ・スーパーインデューサーの添加よって菌体外に大量分泌される15kDa蛋白質(昨年度、長鎖炭化水素や脂質を乳化する界面活性タンパク質であることが判明)は、更なる機能解析とアミノ酸配列データの相同性解析から、久塚らが発見したプロテインアクティベーター(K. Hisatsuka, et al. Agr ic. Biol. Chem. 41,445-450,1977)と示唆された。最近,細菌のトリグリセリド、脂肪酸、n-アルカン等の細胞外脂質の資化システムにおいても、二成分制御システムが機能して環境変化に適応していることが判明しつつある。
3.高級アルコールの添加よって、トリグリセリド資化システムと長鎖炭化水素資化システムの双方が極端に活性化される(共通の代謝産物である脂肪酸は活性化にほとんど寄与しない)ことは、バクテリアの環境適応システム解明の格好の材料を得たと思われる。リパーゼと界面活性タンパク質の共分泌および誘導機構のさらに詳細な解明により、有用蛋白質の大量分泌システム確立等への応用が期待できる。

報告書

(3件)
  • 2008 実績報告書
  • 2007 実績報告書
  • 2006 実績報告書
  • 研究成果

    (25件)

すべて 2008 2007 2006 その他

すべて 雑誌論文 (13件) (うち査読あり 7件) 学会発表 (10件) 図書 (1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Co-super-induction system of lipase and n-alkane emulsifying protein from Pseudomonas-like bacteria2008

    • 著者名/発表者名
      M. Ishizuka, K. Ushio
    • 雑誌名

      FEBS Journal 277(sup. 1)

      ページ: 378-378

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Complementation of Bacillus subtilis motility with flagelln genefrom thermophilic Bacillus sp. PS32008

    • 著者名/発表者名
      J. Hayakawa, M. Ishizuka
    • 雑誌名

      Biochim. Biophys. Acta 1777 (sup. 1)

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cloning of the D-amino acid dehydrogenase gene from the hyperthermophilic archaeon Pyrobaculum islandicum2008

    • 著者名/発表者名
      Y. Maekawa, M. Tanigawa, Y. Nagata, M. Ishizuka
    • 雑誌名

      Special Issue of Nihon University College of Science and Technology 2007 Annual Conference, Short Notes 2

      ページ: 145-146

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [雑誌論文] Purification and characterization of serine racemase from a hyperthermophilic Archaeon, Pyrobaculum islandicum2008

    • 著者名/発表者名
      Ohnishi, M., Saito, M., Wakabaya shi, S., Ishizuka, M., Nishimura, K., Nagata, Y., and Kasai, S.
    • 雑誌名

      J. Bacteriol. 190(4)

      ページ: 1359-1365

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Interaction of flagellar components from thermophilic Bacillus PS32007

    • 著者名/発表者名
      J.Hayakawa, A.Wakabayashi, F.Nakazawa, and M.Ishizuka
    • 雑誌名

      FEBS Journal 274(sup.1)

      ページ: 131-131

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Lipase super-induction system from Pseudomonas-like bacteria by fatty alcohols2007

    • 著者名/発表者名
      M.Ishizuka, Y.Komatsu, W.Tsuk imura and K.Ushio
    • 雑誌名

      FEBS Journal 274(sup.1)

      ページ: 224-224

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Alanine racemase from Helicobacter pylori NCTC 11637 : Purification, characterization and gene cloning2007

    • 著者名/発表者名
      M.Saito, K.Nishimura, Y.Hasegawa, T.Shinohara, S.Wakabayashi, T.Kurihara, M.Ishizuka, Y.Nagata
    • 雑誌名

      Life Sciences 80・8

      ページ: 788-794

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Flagellar motor from the thermophilic PS32006

    • 著者名/発表者名
      M.Ishizuka, K.Ogawa, Y.kondoh, J.Hayakawa, Y.Takahashi, A.Wakabayashi, H.Nakazawa
    • 雑誌名

      BBA-EBEC2006 Short Reports 8

      ページ: 307-308

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Lipase and other proteins strongly induced by lipase super-inducers from Pseudomonas-like bacteria2006

    • 著者名/発表者名
      M.Ishizuka, Y.Suzuki, K.Ushio
    • 雑誌名

      Abstract Book of 20th International Congress of Biochemistry and Molecular Biology

      ページ: 493-493

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Purification and characterization of alanine racemase from Helicobacter pylori2006

    • 著者名/発表者名
      M.Saito, K.Nishimura, M.Ishizuka, Y.Nagata
    • 雑誌名

      Abstract Book of 20th International Congress of Biochemistry and Molecular Riology

      ページ: 174-174

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] Flagellar components interaction property from the thermophilic Bacillus PS32006

    • 著者名/発表者名
      J.Hayakawa, Y.Takahashi, A.Wakabayashi, F.Nakazawa, K.Ogawa, Y.Kondoh, M.Ishizuka
    • 雑誌名

      Abstract Book of 20th International Congress of Biochemistry and Molecular Biology

      ページ: 128-128

    • 関連する報告書
      2006 実績報告書
  • [雑誌論文] D-Amino acid dehydrogenase from Helicobacter pylori NCTC 11637

    • 著者名/発表者名
      Tanigawa, M., Shinohara, T., Saito, M., Nishimura, K., Hasegawa, Y., Wakabayashi, S., Ishizuka, M., Nagata, Y.
    • 雑誌名

      Aiaino Acids (印刷中)

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cloning and characterization of flagellin genes and identification of flagellin glycosylation from thermophilic Bacillus species

    • 著者名/発表者名
      Hayakawa, J., Kondoh, Y., Ishizuka, M.
    • 雑誌名

      Biosci. Biotechnol. Biochem. (印刷中)

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 好熱性Bacillus属のフラジェリン糖鎖修飾及び枯草菌べん毛運動回復2008

    • 著者名/発表者名
      早川准平, 若林明生, 石塚盛雄
    • 学会等名
      第31回日本分子生物学会/第81回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場他
    • 年月日
      2008-12-10
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 高級アルコールは細菌のトリグリセリドおよびn-アルカン資化システムに共通の超誘導剤としてはたらく2008

    • 著者名/発表者名
      石塚盛雄, 牛尾一利
    • 学会等名
      第31回日本分子生物学会/第81回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場他
    • 年月日
      2008-12-09
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 好熱性Bacillus属フラジェリン遺伝子を用いた枯草菌べん毛運動回復とその糖鎖修飾2008

    • 著者名/発表者名
      早川准平, 石塚盛雄
    • 学会等名
      日本生体エネルギー研究会第34回討論会
    • 発表場所
      東京医科歯科大学
    • 年月日
      2008-11-06
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 好熱菌Bacillus PS3由来Flagellinの相互作用2007

    • 著者名/発表者名
      早川 准平、若林 明生、石塚 盛雄
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-14
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Helicobacter pylori NTCT11637 シトクロムbc_1の精製と電子伝達系2007

    • 著者名/発表者名
      谷川 実、篠原 智光、西村 克史、石塚 盛雄、曽根 のぶ史、長田 洋子
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-14
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Co-super-induction system of lipase and n-alkane emulsifying protein from Pseudomonas-like bacteria by fatty alcohols2007

    • 著者名/発表者名
      Morio Ishizuka and Kazutoshi Ushio
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-12
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Helicobacter pylori D-アミノ酸脱水素酵素遺伝子のクローニングと発現2007

    • 著者名/発表者名
      斎藤 誠、篠原 智光、谷川 実、西村 克史、石塚 盛雄、長田 洋子
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会/第80回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-11
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 好熱菌PS3スイッチタンパク遺伝子を用いた枯草菌べん毛運動の回復2007

    • 著者名/発表者名
      飯田 将史、早川 准平、石塚 盛雄
    • 学会等名
      日本生体エネルギー研究会 第33回討論会
    • 発表場所
      山口大学
    • 年月日
      2007-11-17
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 好熱菌PS3フラジェリン遺伝子を用いた枯草菌べん毛運動の回復2007

    • 著者名/発表者名
      早川 准平、石塚 盛雄
    • 学会等名
      日本生体エネルギー研究会 第33回討論会
    • 発表場所
      山口大学
    • 年月日
      2007-11-15
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Purification and properties of serine racemase from a hyperthermophylum Pyrobacvlum islandicum2007

    • 著者名/発表者名
      M.Ohnishi, M.Saitol, S.Wakabayashi, M.Ishizuka, K.Nishimura, Y.Nagata, and S.Kasai
    • 学会等名
      10th International Congress on Amino Acids and Proteins (ICAAP)
    • 発表場所
      Kallithea,Greece
    • 年月日
      2007-08-23
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [図書] 生体分子化学(第2版)2008

    • 著者名/発表者名
      秋久俊博, 浅田泰男, 石塚盛雄, 神野英毅, 長田洋子, 西尾俊幸, 宮澤三雄
    • 総ページ数
      238
    • 出版者
      共立出版株式会社
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.chem.chuo-u.ac.jp/~celltech/index.html/ishizuka/public-j.html

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書

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公開日: 2006-04-01   更新日: 2016-04-21  

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