| 研究課題/領域番号 |
18770120
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| 研究種目 |
若手研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
機能生物化学
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| 研究機関 | 甲南大学 |
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研究代表者 |
渡辺 洋平 甲南大学, 理工学部, 講師 (40411839)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2008
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| 研究課題ステータス |
完了 (2008年度)
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| 配分額 *注記 |
4,050千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 150千円)
2008年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円)
2007年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
2006年度: 2,900千円 (直接経費: 2,900千円)
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| キーワード | 酵素の作用機作と調節 / 分子シャペロン / 凝集体 / 脱凝集 / ClpB / AAA / DnaK / 蛋白質 / ストレス |
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| 研究概要 |
分子シャペロンClpBは、他の分子シャペロンDnaKとその補助因子と協力して、変性、凝集したタンパク質を活性のある状態にまで再生することができる。ClpBの結晶構造をもとに変異体解析を行い、ClpBがどのように凝集タンパク質を再生するのかを調べた。
ClpBはNドメイン、AAA1、ミドルドメイン、AAA2、の4つのドメインからなり、リング状の6量体を形成して働く。ClpBは、凝集したタンパク質をほぐす際、そのリングの中央の孔にタンパク質を通す(糸通し)といわれている。まずこの糸通し活性を、脱凝集活性とは区別して検出できる実験系を構築した。また、4つのドメインのうちNドメインはαへリックスに富んだ球状のドメインであるが、ClpBによる変性タンパク質の結合を助けるとともに、それ自身大きく構造変化することによって、脱凝集過程を促進することを見出した。ミドルドメインは棒状のコイルドコイル構造をしており、これがさらに2つの羽のような構造(wing-1,wing-2)に分かれている。今回、ミドルドメインのwing-1、wing-2はそれぞれ脱凝集過程に必須の役割を持っていることを示唆する結果を得た。さらに、Wing-2の動きを蛍光エネルギー移動法(FRET)で検出することに成功した。
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