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細菌による膜小胞分泌機構の解明と膜小胞を基盤とした異種タンパク質生産への応用

研究課題

研究課題/領域番号 18J13035
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
研究分野 応用微生物学
研究機関京都大学

研究代表者

横山 文秋  京都大学, 農学研究科, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2018-04-25 – 2020-03-31
研究課題ステータス 完了 (2019年度)
配分額 *注記
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2019年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
2018年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワード膜小胞 / メンブレンベシクル / バイオフィルム
研究実績の概要

グラム陰性細菌である Shewanella vesiculosa HM13が分泌する膜小胞から同定され、センサータンパク質と推定される HM1275 に着目し、本タンパク質を介した膜小胞生産制御機構について研究を進めた。
リシン添加条件において野生株の膜小胞生産量が HM1275 欠損株に対して増加していたことから、本タンパク質のシグナル分子としてリシンに着目した。リシン濃度に応じた膜小胞生産量の増加率が野生株と比較して欠損株では緩やかであった。緑膿菌のバイオフィルム分散関連タンパク質と相同性を有している本タンパク質は類似の機能を有するのではないかと考え実験を行なった。経時的なバイオフィルム形成量を野生株と欠損株とで比較すると、野生株でのみ有意な減少が見られた。また、リシン添加条件において欠損株に対して野生株では有意なバイオフィルム形成量の減少が見られた。さらに欠損株ではバイオフィルム中の死細胞の割合が上昇していた。標識した膜小胞を用いてバイオフィルムへの取り込みを評価した。バイオフィルムと考えられる細胞集団の周囲に膜小胞に由来する標識が観察されたことから、膜小胞はバイオフィルムに取り込まれていると考えられた。
以上より、推定センサータンパク質 HM1275 が培地中のリシン濃度を感知し、膜小胞生産およびバイオフィルム分散を誘導することを明らかにした。本タンパク質がこれら二種類の反応を制御することから、これらの反応には関連性があるのではないかと考えられる。一例として、リシン濃度を感知した細胞によって分泌された膜小胞に内包された HM1275 がバイオフィルム中の他の細胞に届けられることによってセンサー機能を付与し、集団としての細胞死を回避するためにバイオフィルム分散を誘導しているのではないかと考えている。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2019 実績報告書
  • 2018 実績報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2020 2019 2018

すべて 学会発表 (9件) (うち国際学会 3件)

  • [学会発表] Regulation of Vesiculation and Biofilm Dispersion of Shewanella vesiculosa HM13 by a Sensor Protein in Response to Extracellular Environment2020

    • 著者名/発表者名
      Fumiaki Yokoyama, Tomoya Imai, Jun Kawamoto, Takuya Ogawa, Tatsuo Kuriahra
    • 学会等名
      3rd Bacterial Cell Biology Conference
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 細菌のセンサータンパク質によるベシクル生産とバイオフィルム分散の誘導2020

    • 著者名/発表者名
      横山 文秋、川本 純、今井 友也、小川 拓哉、栗原 達夫
    • 学会等名
      日本農芸化学会2020年度大会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] Identification of a protein that presumably controls bacterial vesiculation in response to the extracellular environments2019

    • 著者名/発表者名
      Fumiaki Yokoyama, Jun Kawamoto, Chen Chen, Tomoya Imai, Tatsuo Kuriahra
    • 学会等名
      Annual Meeting of International Society for Extracellular Vesicles 2019
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] バイオフィルム分散に関与するセンサータンパク質のホモログを介した 細菌ベシクル生産制御2019

    • 著者名/発表者名
      横山 文秋、川本 純、今井 友也、小川 拓哉、栗原 達夫
    • 学会等名
      第66回日本生化学会近畿支部例会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] バイオフィルム分散関連タンパク質 BdlA ホモログの細菌ベシクル中からの同定2019

    • 著者名/発表者名
      横山 文秋、川本 純、今井 友也、小川 拓哉、栗原 達夫
    • 学会等名
      第33 回バイオフィルム学会学術集会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] 低温菌 Shewanella vesiculosa HM13 のセンサータンパク質による ベシクル生産およびバイオフィルム分散の制御2019

    • 著者名/発表者名
      横山 文秋、川本 純、今井 友也、小川 拓哉、栗原 達夫
    • 学会等名
      極限環境生物学会2019年度(第20回)年会
    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
  • [学会発表] 細胞外環境に応答した推定センサータンパク質を介する細菌のベシクル生産制御2019

    • 著者名/発表者名
      横山 文秋、川本 純、陳 晨、今井 友也、栗原 達夫
    • 学会等名
      日本農芸化学会2019年度大会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Methyl-Accepting Chemotaxis Protein is Related to Vesicle Production in a Poor Nutrient Environment2018

    • 著者名/発表者名
      Fumiaki Yokoyama, Jun Kawamoto, Chen Chen, Tomoya Imai, Tatsuo Kuriahra
    • 学会等名
      Extremophiles2018
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 貧栄養条件下における細菌細胞外ベシクル生産に関わるメチル受容走化性タンパク質ホモログの同定2018

    • 著者名/発表者名
      横山 文秋、川本 純、陳 晨、今井 友也、栗原 達夫
    • 学会等名
      第91回日本生化学会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書

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公開日: 2018-05-01   更新日: 2024-03-26  

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