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核膜選択的な蛍光ラベル化技術を活用した細胞核の動態解析

研究課題

研究課題/領域番号 18K05177
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分34020:分析化学関連
研究機関九州工業大学

研究代表者

末田 慎二  九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 教授 (00325581)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2020年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2020年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2019年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2018年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
キーワード核膜 / 核膜ラベル化 / 蛍光ラベル化 / 細胞分裂 / 核内膜タンパク質 / 核膜崩壊 / 核膜形成 / 核膜崩壊・再構成
研究成果の概要

本研究では、核内膜タンパク質を利用しない、核膜に対する新規な蛍光ラベル化技術の開発を行った。ここでは、古細菌のSulfolobus tokodaii由来のビオチン化酵素反応系を利用して蛍光タンパク質を核内膜上に固定化することにより、核膜選択的なラベル化を行った。実際にこの技術を活用してラベル化した哺乳動物細胞を共焦点レーザー顕微鏡で観察することにより、細胞分裂過程における核膜の動きを追跡することに成功した。

研究成果の学術的意義や社会的意義

核膜の蛍光ラベル化技術としては核内膜上に存在するタンパク質を利用する手法が開発されているが、この場合、核内膜タンパク質がそれぞれ独自の局在性を示すため、核膜の動きを正確に追跡することができない。本研究では、古細菌由来の特殊なビオチン化酵素反応を利用して、核内膜タンパク質を利用しない、新規な蛍光ラベル化技術を開発することに成功した。本ラベル化技術は、核膜に関連した様々な生命現象の解明に活用されることが期待される。

報告書

(4件)
  • 2020 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2019 実施状況報告書
  • 2018 実施状況報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて 2021 2020 2019 2018

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (9件) (うち国際学会 1件、 招待講演 3件)

  • [雑誌論文] Stepwise Preparation of a Polymer Comprising Protein Building Blocks on a Solid Support for Immunosensing Platform2020

    • 著者名/発表者名
      Hiroki Miyao, Utaro Uemura, and Shinji Sueda
    • 雑誌名

      Analytical Sciences

      巻: 36 号: 2 ページ: 213-219

    • DOI

      10.2116/analsci.19P318

    • NAID

      130007796150

    • ISSN
      0910-6340, 1348-2246
    • 年月日
      2020-02-10
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Enzyme-based protein-tagging systems for site-specific labeling of proteins in living cells2020

    • 著者名/発表者名
      Sueda Shinji
    • 雑誌名

      Microscopy

      巻: 69 号: 3 ページ: 156-166

    • DOI

      10.1093/jmicro/dfaa011

    • NAID

      120006997083

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Fluorescent Labeling of the Nuclear Envelope by Localizing Green Fluorescent Protein on the Inner Nuclear Membrane2018

    • 著者名/発表者名
      Taniyama Toshiyuki、Tsuda Natsumi、Sueda Shinji
    • 雑誌名

      ACS Chemical Biology

      巻: 13 号: 6 ページ: 1463-1469

    • DOI

      10.1021/acschembio.8b00219

    • NAID

      120006630935

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 核膜選択的な蛍光ラベル化技術における核移行シグナルの機能に関する検証2021

    • 著者名/発表者名
      荒木優花、 深川凌平、都田菜摘、末田慎二
    • 学会等名
      第81回分析化学討論会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 酵素反応を基軸としたタンパク質分析に資する蛍光ラベル化技術の開発2021

    • 著者名/発表者名
      末田慎二
    • 学会等名
      第58回化学関連支部合同九州大会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] IRES発現系を利用した核膜選択的な蛍光ラベル化技術の効率化2019

    • 著者名/発表者名
      荒木優花、都田菜摘、谷山俊之、末田慎二
    • 学会等名
      第56回化学関連支部合同九州大会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光タンパク質の細胞内局在制御技術を活用した核膜の動態解析2019

    • 著者名/発表者名
      都田菜摘、谷山俊之、末田慎二
    • 学会等名
      日本分析化学会第68年会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光タンパク質の細胞内局在制御に基づいた核膜選択的な蛍光プローブの開発2019

    • 著者名/発表者名
      都田菜摘、谷山俊之、末田慎二
    • 学会等名
      第61回日本顕微鏡学会九州支部会
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光タンパク質の局在制御に基づいた核膜に対する選択的なラベル化技術の開発2018

    • 著者名/発表者名
      谷山俊之、都田菜摘、末田慎二
    • 学会等名
      第78回分析化学討論会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] 細胞内での核膜の動態解析を可能にする蛍光ラベル化技術の開発2018

    • 著者名/発表者名
      都田菜摘、谷山俊之、末田慎二
    • 学会等名
      第55回化学関連支部合同九州大会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] 古細菌由来のユニークな酵素反応系を利用した蛍光タンパク質によるラベル化技術の機能拡張2018

    • 著者名/発表者名
      末田慎二
    • 学会等名
      第31回バイオメディカル分析科学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Functional extension of the labeling technology with fluorescent proteins based on a unique biotinylation reaction2018

    • 著者名/発表者名
      Shinji Sueda
    • 学会等名
      The 11th Japan-Korea Joint Symposium on Bio-microsensing Technology
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演

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公開日: 2018-04-23   更新日: 2022-01-27  

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