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無細胞翻訳系を用いた天然ゴム生合成酵素複合体の再構築手法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 18K05428
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分38030:応用生物化学関連
研究機関崇城大学 (2020-2021)
東北大学 (2018-2019)

研究代表者

小島 幸治  崇城大学, 生物生命学部, 准教授 (80457382)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2022-03-31
研究課題ステータス 完了 (2021年度)
配分額 *注記
3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円)
2020年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2019年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2018年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
キーワード天然ゴム / 無細胞翻訳系 / パラゴムノキ / ゴム粒子 / 大腸菌 / イソプレノイド / ラテックス / 無細胞翻訳 / 酵素複合体の再構築 / イソプレン / cis-prenyltransferase / Hevea brasilliensis
研究成果の概要

天然ゴムはイソプレンの重合体であり、生合成はパラゴムノキのラテックスに存在するゴム粒子上で行われると考えられており、現在までにゴム粒子上のタンパク質因子を同定し、それぞれの役割の解明がなされてきた。その過程において、小麦胚芽由来の無細胞翻訳系を用い、シスプレニルトランスフェラーゼを含む因子をゴム粒子上に適切に組み込むことにより、分子量百万のポリマー合成活性をもつタンパク質複合体を再構築することに成功した(山下ら2016)。本研究では、天然ゴム合成酵素複合体の合成およびゴム粒子上への再構成には、真核生物由来の特別な因子に依存せずに、原核生物の無細胞翻訳系を用いても可能であることがわかった。

研究成果の学術的意義や社会的意義

天然ゴム生合成の機構の理解がさらに深まれば、今後高品質で高生産な天然ゴムの人工的な合成手法が確立できることが期待できる。また、合成酵素の合成や再構築には、複雑な因子の関与を必要としないことも考慮し、大腸菌などの原核生物の無細胞翻訳系を用いれば、安価な天然ゴム合成系の開発が可能になる。天然ゴム合成や複合体構築に関して、各因子の相互作用の重要性と合成活性のとの相関の解明から、今回実現が不可能であった複合体の単離や立体構造の解明に向けて一歩ずつ近づくことが可能になってきた。このように、本研究で得られる天然ゴム合成機構に関する理解は、学術(工学系、農学系)や産業へと幅広く応用されることが期待される。

報告書

(5件)
  • 2021 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2020 実施状況報告書
  • 2019 実施状況報告書
  • 2018 実施状況報告書
  • 研究成果

    (17件)

すべて 2022 2021 2020 2019 2018

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (12件) (うち国際学会 3件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Irradiation of sound waves to Aspergillus kawachii and the characterization of enzyme activities in rice-koji.2021

    • 著者名/発表者名
      Taku Matsumoto, Kouji Kojima, Noriaki Saigusa, Yuji Teramoto
    • 雑誌名

      International Journal of Biomass and Renewables

      巻: 10 ページ: 18-24

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] High-Light-Induced Stress Activates Lipid Deacylation at the sn-2 Position in the Cyanobacterium Synechocystis Sp. PCC 68032021

    • 著者名/発表者名
      Kojima Kouji、Matsumoto Ui、Keta Sumie、Nakahigashi Kenji、Ikeda Kazutaka、Takatani Nobuyuki、Omata Tatsuo、Aichi Makiko
    • 雑誌名

      Plant and Cell Physiology

      巻: 63 号: 1 ページ: 82-91

    • DOI

      10.1093/pcp/pcab147

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 食品におけるイソプレノイド化合物の役割2020

    • 著者名/発表者名
      小島幸治
    • 雑誌名

      BIO九州

      巻: 228 ページ: 7-12

    • NAID

      40022349104

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [雑誌論文] Two nucleolar proteins, GDP1 and OLI2, function as ribosome biogenesis factors and are preferentially involved in promotion of leaf cell proliferation without strongly affecting leaf adaxial-abaxial patterning in Arabidopsis thaliana.2018

    • 著者名/発表者名
      Kojima K, Tamura J, Chiba H, Fukuda K, Tsukaya H, Horiguchi G
    • 雑誌名

      Frontiers in Plant Science

      巻: ー ページ: 2240-2240

    • DOI

      10.3389/fpls.2017.02240

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Plastid gene expression is essential for lateral root stem-cell patterning, symplastic connectivity, and root plastid distribution in Arabidopsis thaliana2018

    • 著者名/発表者名
      Nakata MT, Sato M, Wakazaki M, Sato N, Kojima K Sekine A, Nakamura S, Shikanai T, Toyooka K, Tsukaya H, Horiguchi G
    • 雑誌名

      Biology Open

      巻: 7 ページ: 028175-028175

    • DOI

      10.1242/bio.028175

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Aspergillus oryzae RIB40株で製麹した米麹のグルコアミラーゼ活性に及ぼす音波照射の影響2022

    • 著者名/発表者名
      松本 拓,小島 幸治,三枝 敬明,寺本 祐司
    • 学会等名
      日本農芸化学会 2021年度大会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] サポジラ(Manilkara zapota)由来 trans型プレニルトランスフェラーゼの酵素機能解析2021

    • 著者名/発表者名
      三輪 幸祐,廣森 美樹,青木 裕一,和氣 駿之,小島 幸治,山下 哲,山口 晴彦,宮城 ゆき乃,戸澤 譲,中山 亨,高橋 征司
    • 学会等名
      第31回イソプレノイド研究会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] Aspergillus属の分生子に対する音波照射と米麹の酵素活性への影響2021

    • 著者名/発表者名
      松本 拓,小島 幸治,三枝 敬明,寺本 祐司
    • 学会等名
      日本農芸化学会 2021年度西日本・中四国・関西支部 合同大会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] サポジラ(Manilkara zapota)由来trans型ポリイソプレノイド 生合成酵素のクローニングと機能解析2020

    • 著者名/発表者名
      三輪幸祐,廣森美樹,青木裕一,和氣駿之,小島幸治,山下哲,山口晴彦,宮城ゆき乃,戸澤譲,中山亨,高橋征司
    • 学会等名
      第30回 イソプレノイド研究会
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] パラゴムノキの天然ゴム生合成関連タンパク質の機能解析2019

    • 著者名/発表者名
      小島幸治、山口真琴、廣森美樹、和氣駿之、山下哲、戸澤譲、山口晴彦、宮城ゆき乃、伏原和久、中山亨、高橋征司
    • 学会等名
      第2回天然ゴム研究会(理研、鶴見)
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
  • [学会発表] Interaction and its functional correlation of factors constituting the biosynthetic machinery of natural rubber from Hevea brasiliensis2019

    • 著者名/発表者名
      Kouji Kojima, Makoto Yamaguchi, Tomoki Ishii, Miki Suenaga-Hiromori, Toshiyuki Waki, Satoshi Yamashita, Yuzuru Tozawa, Haruhiko Yamaguchi, Yukino Miyagi-Inoue, Kazuhisa Fushihara, Toru Nakayama, Seiji Takahashi
    • 学会等名
      Japan-Taiwan Plant Biology 2019 (JTPB2019)、Nagoya Univ. Nagoya, Japan
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] In vitro natural rubber biosynthesis by prenyltransferases introduced on rubber particles from Hevea brasiliensis2018

    • 著者名/発表者名
      Tomoki Ishii, Miki Suenaga-Hiromiri, Satoshi Yamashita, Fumihiro Yanbe, Toshiyuki Waki, Kouji Kojima, Haruhiko Yamaguchi, Yukino Miyagi-Inoue, Kazuhisa Fushihara
    • 学会等名
      23th International Symposium on Plant Lipids (ISPL2018)、Osanbashi-Hall, Yokohama, Japan
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Production of natural rubber in vitro from reconstituted-rubber synthase complex on rubber particles with Escherichia coli cell-free translation system2018

    • 著者名/発表者名
      Kouji Kojima,Miki Suenaga-Hiromori, Satoshi Yamashita,Yuzuru Tozawa, Haruhiko Yamaguchi,Yukino Miyagi-Inoue,Kazuhisa Fushihara,Toru Nakayama, Seiji Takahashi
    • 学会等名
      23th International Symposium on Plant Lipids (ISPL2018)、Osanbashi-Hall, Yokohama, Japan
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 天然ゴム生合成機構におけるゴム粒子の重要性2018

    • 著者名/発表者名
      石井 智樹,末永 美樹,山下 哲,山家 史大,和氣 駿之,小島 幸治, 山口 晴彦,井之上 ゆき乃,伏原 和久,中山 亨,高橋 征司
    • 学会等名
      農芸化学会2018年度名古屋大会(名城大学、名古屋)
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] 大腸菌無細胞翻訳系を用いた天然ゴム合成酵素の再構成2018

    • 著者名/発表者名
      小島 幸治、山下 哲、戸澤 譲、山口 晴彦、井之上 ゆき乃、伏原 和久、 中山 亨、高橋 征司
    • 学会等名
      第59回日本植物生理学会年会(札幌コンベンションセンター、札幌)
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] パラゴムノキの天然ゴム合成反応におけるゴム粒子の役割2018

    • 著者名/発表者名
      小島 幸治、廣森 美樹、山家 史大、石井 智樹、和氣 駿之、山下 哲、 戸澤 譲、山口 晴彦、井之上 ゆき乃、伏原 和久、中山 亨、高橋 征司
    • 学会等名
      日本農芸化学会 東北・北海道支部合同大会(東北支部第153回大会、東北大学、仙台)
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] パラゴムノキの天然ゴム生合成マシナリを構成する因子の相互作用と機能相関2018

    • 著者名/発表者名
      小島 幸治、山口 真琴、石井 智樹、廣森 美樹、和氣 駿之、山下 哲、戸澤 譲、 山口 春彦、井之上 ゆき乃、伏原 和久、中山 亨、高橋 征司
    • 学会等名
      第60回日本植物生理学会年会(名古屋大学、名古屋)
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書

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公開日: 2018-04-23   更新日: 2023-01-30  

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