| 研究課題/領域番号 |
18K06100
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分43020:構造生物化学関連
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| 研究機関 | 国立研究開発法人理化学研究所 |
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研究代表者 |
篠田 雄大 国立研究開発法人理化学研究所, 生命機能科学研究センター, 研究員 (10597868)
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| 研究分担者 |
松波 秀行 沖縄科学技術大学院大学, 生体分子電子顕微鏡解析ユニット, スタッフサイエンティスト (80444511)
染谷 友美 国立研究開発法人理化学研究所, 生命機能科学研究センター, 客員研究員 (80450401)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2021年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2020年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2019年度: 130千円 (直接経費: 100千円、間接経費: 30千円)
2018年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
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| キーワード | 膜タンパク質 / 大腸菌無細胞タンパク質合成技術 / 密着結合 / モノクローナル抗体 / クライオ電子顕微鏡 / X線結晶構造解析 / 血液精巣関門 / 立体構造解析 |
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| 研究成果の概要 |
血液精巣関門のバリア機能に関わる密着結合膜タンパク質ヒトクローディン-11について、大腸菌無細胞タンパク質合成技術を利用した高品質試料調製手法を確立した。
この無細胞合成ヒトクローディン-11をラットへの免疫原とスクリーニング用の抗原として用いることで、立体構造解析に有用である立体構造認識性の抗ヒトクローディン-11抗体産生ハイブリドーマのモノクローナル化を達成し、さらに、ヒトクローディン-11の立体構造解析では、この抗体断片との複合体のクライオ電子顕微鏡による単粒子解析よって、二次元の粒子像と低分解能の三次元マップを取得し、クローディンと抗体が結合する様子を捉えることに成功した。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
ヒトクローディン-11の高品質精製試料の生産手法の確立は本研究課題が初となる。これにより、ヒトクローディン-11を標的とした新規薬剤の探索や効果測定においても分子レベルでの実験と評価が可能となる。また、同じく本研究課題内で作成した立体構造認識性の抗ヒトクローディン-11モノクローナル抗体についても抗体医薬品としての利用の可能性を秘めていることから、本研究成果は、男性型不妊症、特にクローディン-11の発現異常を原因とする先天性男性型不妊症の研究および治療手法の創出に大いに貢献できるものと期待している。
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