B型肝炎ウイルス感染性粒子（Dane粒子）の出芽部位の同定

• 研究課題/領域番号: 18K08004
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分53010:消化器内科学関連
• 研究機関: 甲南女子大学
• 研究代表者: 堀田 博 甲南女子大学, 医療栄養学部, 教授 (40116249)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2020年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2019年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2018年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: B型肝炎ウイルス(HBV) / 感染性粒子(Dane粒子) / エンベロープリン脂質 / 出芽・放出部位 / 小胞体(ER) / 多胞体(MVB) / エクソソーム / 電子顕微鏡 / 出芽部位 / 細胞外放出 / 酵素親和性 / 多小胞体(MVB) / B型肝炎ウイルス / 感染性粒子（Dane粒子） / 小胞体（ER） / 多小胞体（MVB）

研究成果の概要

B型肝炎ウイルス(HBV)粒子の出芽、放出、細胞間伝播について、HBV粒子のホスホリパーゼA2感受性、超遠心後の浮遊密度、電子顕微鏡所見、小胞体や多胞体機能に関わる分子のノックダウン、エクソソームの関与を指標に解析し、C型及びD型肝炎ウイルス(HCV及びHDV)とも比較した。HBV感染性粒子の出芽部位の詳細な同定には至らなかったが、HBVとHCVのエンベロープの性状及びHBVとHDVの脱殻過程の差異を明らかにし、HBV感染細胞からの感染伝播は、個々のHBV粒子の放出のみならず、HBV粒子やHBVゲノムを包含するエクソソームを介する放出と標的細胞による貪食の経路が関与することを明らかにした。

研究成果の学術的意義や社会的意義

B型肝炎ウイルス(HBV)とC型肝炎ウイルス(HCV)の感染性は、ある種のホスホリパーゼA2により非常に効率よく中和されるが、中和の機序は、HCVではエンベロープ破壊であるのに対して、HBVでは脱殻阻害であり、両ウイルスで明らかに異なることを実証した。また、HBVとD型肝炎ウイルス(HDV)は同じエンベロープを有しているが、細胞内侵入後の脱殻の過程が、両ウイルスで明らかに異なることを実証した。さらに、HBV感染細胞からの感染伝播に、HBV粒子やHBVゲノムを包含するエクソソームが関与することを実証した。これらの研究成果は、HBVのウイルス学的性質を明らかにするうえで重要なものと考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of an antiviral component from the venom of the scorpion Liocheles australasiae using transcriptomic and mass spectrometric analyses (2021)
  • 著者名/発表者名: Miyashita Masahiro、Mitani Naoya、Kitanaka Atsushi、Yakio Mao、Chen Ming、Nishimoto Sachiko、Uchiyama Hironobu、Sue Masayuki、Hotta Hak、Nakagawa Yoshiaki、Miyagawa Hisashi
  • 雑誌名: Toxicon 巻: 191 ページ: 25-37
  • DOI: 10.1016/j.toxicon.2020.12.007
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Potent virucidal activity of honeybee "Apis mellifera" venom against hepatitis C virus (2020)
  • 著者名/発表者名: Sarhan M, El-Bitar AMH, Hotta H.
  • 雑誌名: Toxicon 巻: 188 ページ: 55-64
  • DOI: 10.1016/j.toxicon.2020.10.014
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Prevalence and genotype distribution of hepatitis B virus among migrant workers in Lombok Island, Indonesia (2020)
  • 著者名/発表者名: Yamani LN, Triani E, Amin M, Juniastuti, Utsumi T, Soetjipto, Nasronudin, Yano Y, Hotta H, Hayashi Y, Lusida MI.
  • 雑誌名: Asian Pacific Journal of Tropical Medicine 巻: 13 ページ: 8-16
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] revalence and genotype distribution of hepatitis B virus among migrant workers in Lombok Island, Indonesia (2020)
  • 著者名/発表者名: 2.Yamani LN, Triani E, Amin M, Juniastuti, Utsumi T, Soetjipto, Nasronudin, Yano Y, Hotta H, Hayashi Y, Lusida MI
  • 雑誌名: Asian Pacific Journal of Tropical Medicine 巻: 13 号: 1 ページ: 8-16
  • DOI: 10.4103/1995-7645.273568
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Smp76, a scorpine like-peptide isolated from the venom of the scorpion Scorpio maurus palmatus, with a potent antiviral activity against hepatitis C virus and dengue virus (2019)
  • 著者名/発表者名: 1.El-Bitar AMH, Sarahan M, Abdel-Rahman MA, Quintero-Hernandez V, Aoki-Utsubo C, Moustafa MA, POssani LD, Hotta H
  • 雑誌名: International Journal of Peptide Research and Therapeutics 巻: None (0nline) 号: 2 ページ: 811-821
  • DOI: 10.1007/s10989-019-09888-2
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Peroxiredoxin 1, a novel HBx-interacting protein, interacts with exsome component 5 and negatively regulates hepatitis B virus (HBV) propagation through degradation of HBV RNA. (2019)
  • 著者名/発表者名: Lin Deng, Xiang Gan, Masahiko Ito, Ming Chen, Hussein H. Aly, Chieko Matsui, Takayuki Abe, Koichi Watashi,Takaji Wakita, Tetsuro Suzuki, Toru Okamoto, Yoshiharu Matsuura, Masashi Mizokami, Ikuo Shoji, and Hak Hotta.
  • 雑誌名: J. Virol 巻: 93 号: 6
  • DOI: 10.1128/jvi.02203-18
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Antiviral activities of Curcuma genus against hepatitis C virus (2018)
  • 著者名/発表者名: Wahyuni TS, Permatasari AA, Widiandani T, Fuad A, Widyawaruyanti A, Aoki-Utsubo C, Hotta H
  • 雑誌名: Natural Product Communications 巻: 13 ページ: 1579-1582
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Virucidal and neutralizing activity tests for antiviral substances and antibodies (2018)
  • 著者名/発表者名: Aoki-Utsubo C, Chen M, Hotta H
  • 雑誌名: Bio-protocol 巻: 8 号: 10
  • DOI: 10.21769/bioprotoc.2855
  • 査読あり
• [雑誌論文] Time-of-addition and temperature-shift assays to determine particular step(s) in the viral life cycle that is blocked by antiviral substance(s) (2018)
  • 著者名/発表者名: Aoki-Utsubo C, Chen M, Hotta H
  • 雑誌名: Bio-protocol 巻: 8 号: 9
  • DOI: 10.21769/bioprotoc.2830
  • 査読あり
• [学会発表] アメントフラボンのB型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス感染阻害活性について (2021)
  • 著者名/発表者名: 靱千恵、亀岡正典、Jamilah Abbas、Muhammad Hanafi、堀田博
  • 学会等名: 日本薬学会
• [学会発表] センソ及びゴオウの抗デングウイルス活性に関する研究 (2021)
  • 著者名/発表者名: 増井涼、杉本智潮、清水康晴、須藤慶一、渕野裕之、村瀬明香、河上仁美、川原信夫、西本幸子、堀田博
  • 学会等名: 日本薬学会
• [学会発表] Venomics approach for identification of bioactive peptides from scorpion venom (2020)
  • 著者名/発表者名: Miyashita M, Mitani N, Kitanaka A, Yakio M, Chen M, Nishimoto S, Hotta H, Nakagawa Y, Miyagawa H.
  • 学会等名: Asia Oceania Mass Spectrometry Conference
  • 国際学会
• [学会発表] ヤエヤマサソリ毒液に含まれる抗ウイルス活性成分の単離・同定 (2020)
  • 著者名/発表者名: 宮下正弘、三谷直也、北中淳史、焼尾真緒、陳明、西本幸子、堀田博、中川好秋、宮川恒
  • 学会等名: 日本農芸化学会
• [学会発表] 5.Venomics approach for identification of bioactive peptides from scorpion venom (2020)
  • 著者名/発表者名: Miyashita M, Mitani N, Kitanaka A, Yakio M, Chen M, Nishimoto S, Hotta H, Nakagawa Y, Miyagawa H
  • 学会等名: Asia-Oceania Mass Spectrometry Conference
  • 国際学会
• [学会発表] 1.Peroxiredoxin 1, a novel HBx-interacting protein, interacts with Exosc5 and negatively regulates HBV propagation through degradation of HBV RNA (2019)
  • 著者名/発表者名: Deng L, Hotta H, Shoji I
  • 学会等名: The 7th Japan-Taiwan-Korea HBV Research Symposium
  • 国際学会
• [学会発表] 2.Further analysis of possible antiviral activity of CM-II-sPLA2 against HBV, HCV and HDV (2019)
  • 著者名/発表者名: Hotta H, Aoki-Utsubo C, Chen M, Nishimoto S, Deng L, Miyayama Y, Hijikata M, Shindo K, Noda T, Kohara M, Tsukuda S, Watashi K, Wakita T
  • 学会等名: The 2019 International HBV Meeting
  • 国際学会
• [学会発表] 3.Identification of antimicrobial components from the venom of the scorpion Liocheles australasiae using an integrated mass spectrometric and transcriptomic approach (2019)
  • 著者名/発表者名: Miyashita M, Mitani N, Kitanaka A, Yakio M, Chen M, Nishimoto S, Hotta H, Nakagawa Y, Miyagawa H
  • 学会等名: The 20th World Congress of the International Society on Toxinology
  • 国際学会
• [学会発表] 4.Potent anti-HCV activity of bufalin and gamabufotalin obtained from dried toad cake (2019)
  • 著者名/発表者名: Hotta, H, Aoki-Utsubo C, Nishimoto S, Fuchino H, Kawahara N, Masui R, Sugimoto C, Shimizu Y, Sudo K
  • 学会等名: The 26 th International Symposium on Hepatitis C virus and Related Viruses
  • 国際学会
• [学会発表] インドネシア原産薬用植物の抗B型肝炎ウイルス活性について (2019)
  • 著者名/発表者名: 靱千恵，Puguh Indrasetiawan，Yan Mardian，Muhammad Hanafi，Sri Hartati，Tutik Sri Wahyuni，亀岡正典，矢野嘉彦，堀田博，林祥剛
  • 学会等名: 日本生薬学会第66回年会
• [学会発表] 7.A chlorophyll derivative, methyl-pheophorbide A inhibits hepatitis C virus assembly by affecting apolipoprotein production (2019)
  • 著者名/発表者名: Aoki-Utsubo C, Hotta H
  • 学会等名: 第67回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] 8.Antiviral activity of steroidal cardiac glycosides obtained from dried toad cake against hepatitis C virus (2019)
  • 著者名/発表者名: Hotta, H, Aoki-Utsubo C, Nishimoto S, Fuchino H, Kawahara N, Masui R, Sugimoto C, Shimizu Y, Sudo K
  • 学会等名: 第67回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] Comparative analysis of antiviral activity of sPLA2 against HBV and HCV (2018)
  • 著者名/発表者名: Hotta H, Chen M, Aoki-Utsubo C, Deng L, Miyayama Y, Hijikata M, Shindo K, Noda T, Kohara M, Watashi K, Wakita T
  • 学会等名: 2018 International HBV Meeting
  • 国際学会
• [学会発表] Broad-spectrum antivirals that target viral envelope lipid bilayers (2018)
  • 著者名/発表者名: Hotta H
  • 学会等名: Bromo Conference
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Effect of antiviral activity of sPLA2 against HBV and HCV (2018)
  • 著者名/発表者名: Miyayama Y, Chen M, Aoki-Utsubo C, Deng L, Shindo K, Noda T, Kohara M, Watashi K, Wakita T, Hijikata M, Hotta H
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] 4.A crude extract from Cananga odorata exhibits antiviral activity against hepatitis B virus (2018)
  • 著者名/発表者名: Indrasetiawan P, Aoki-Utsubo C, Hanafi M, Hartati S, Kameoka M, Hotta H, Hayashi Y
  • 学会等名: 日本薬学会第139年会