• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

遺伝子工学的手法による乳歯歯髄細胞からの体性幹細胞単離とその特性解析

研究課題

研究課題/領域番号 18K09839
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分57070:成長および発育系歯学関連
研究機関鹿児島大学

研究代表者

稲田 絵美  鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 講師 (30448568)

研究分担者 佐藤 正宏  鹿児島大学, 総合科学域総合研究学系, 教授 (30287099)
齊藤 一誠  新潟大学, 医歯学系, 准教授 (90404540)
野口 洋文  琉球大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50378733)
研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2020年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2019年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2018年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
キーワード遺伝子工学的手法 / 乳歯歯髄幹細胞 / 体性幹細胞
研究成果の概要

我々の過去の研究で得られた仮説「アルカリホスファターゼ(ALP)活性が高く、OCT-3/4をはじめとする複数の幹細胞特異的遺伝子を発現する乳歯歯髄細胞(HDDPC)は、山中4因子の導入により、初期化(iPS細胞化)を受けやすい」に基づき、ALP陽性、陰性細胞を単一細胞として分取し、その遺伝子発現を解析した。その結果、ALP陽性細胞はALPとOCT-3/4を発現していた。一方、ALP陰性細胞はALPとOCT-3/4の発現がなく、SOX2の発現を認めた。以上から、「HDDPCには遺伝子発現プロファイルを異にする体性幹細胞(SSC)が存在する」と考えられた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

幹細胞を特徴付けるマーカーの多くはOCT-3/4、SOX2等の核内転写因子やALP等の細胞内因子であり、これらを発現する幹細胞は生きた形では細胞表面分子を標的としたFACS等による細胞捕捉で単離・濃縮できない。本研究では、HDDPCから幹細胞特異的遺伝子を発現する少数個の細胞を単離し、微量なmRNAを調製した。これを基にする分子生物学的解析から、個々の細胞における遺伝子発現様式を解明することができた。
本法により未知の分子マーカー発見の可能性があること、少数個の細胞で特定の遺伝子発現プロファイル作成が可能となることが期待され、HDDPCに含まれる幹細胞の特性をあぶりだす点で学術的意義は高い。

報告書

(4件)
  • 2020 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2019 実施状況報告書
  • 2018 実施状況報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて 2021 2020 2019 2018

すべて 雑誌論文 (12件) (うち国際共著 1件、 査読あり 12件、 オープンアクセス 12件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] RNA analysis based on a small number of manually isolated fixed cells (RNA-snMIFxC) to profile stem cells from human deciduous tooth-derived dental pulp cells2021

    • 著者名/発表者名
      Inada E, Saitoh I, Kubota N, Iwase Y, Kiyokawa Y, Noguchi H, Yamasaki Y, Sato M
    • 雑誌名

      Biological Procedure Online

      巻: -

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] piggyBac-Based Non-Viral In Vivo Gene Delivery Useful for Production of Genetically Modified Animals and Organs.2020

    • 著者名/発表者名
      Sato M, Inada E, Saitoh I, Watanabe S, Nakamura S.
    • 雑誌名

      Pharmaceutics

      巻: 12 号: 3 ページ: 277-277

    • DOI

      10.3390/pharmaceutics12030277

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書 2019 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Drug-induced naive iPS cells exhibit better performance than primed iPS cells with respect to the ability to differentiate into pancreatic β-cell lineage2020

    • 著者名/発表者名
      Kiyokawa Y, Sato M, Noguchi H, Inada E, Iwase Y, Kubota N, Sawami T, Terunuma M, Maeda T, Hayasaki H, Saitoh I
    • 雑誌名

      Journal of Clinical Medicine

      巻: 9 号: 9 ページ: 2838-2838

    • DOI

      10.3390/jcm9092838

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Development of a novel, pipette tip-aided cell cloning method for effective isolation of genome-edited porcine cell2020

    • 著者名/発表者名
      Sato M, Saitoh I, Akasaka E, Inada E
    • 雑誌名

      OBM Genetics

      巻: 5 号: 1 ページ: 16-16

    • DOI

      10.21926/obm.genet.2101126

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Increased Expression of Cell Surface SSEA-1 is Closely Associated with Na?ve-Like Conversion from Human Deciduous Teeth Dental Pulp Cells-Derived iPS Cells2019

    • 著者名/発表者名
      Inada Emi、Saitoh Issei、Kubota Naoko、Iwase Yoko、Murakami Tomoya、Sawami Tadashi、Yamasaki Youichi、Sato Masahiro
    • 雑誌名

      International Journal of Molecular Sciences

      巻: 20 号: 7 ページ: 1651-1651

    • DOI

      10.3390/ijms20071651

    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書 2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] In Vivo Piggybac-Based Gene Delivery towards Murine Pancreatic Parenchyma Confers Sustained Expression of Gene of Interest.2019

    • 著者名/発表者名
      Sato M, Inada E, Saitoh I, Nakamura S, Watanabe S
    • 雑誌名

      International Journal of Molecular Science

      巻: 20 号: 13 ページ: 3116-3116

    • DOI

      10.3390/ijms20133116

    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Potential for Isolation of Immortalized Hepatocyte Cell Lines by Liver-Directed In Vivo Gene Delivery of Transposons in Mice.2019

    • 著者名/発表者名
      Sato M, Saitoh I, Inada E, Nakamura S, Watanabe S
    • 雑誌名

      Stem Cells International

      巻: 2 ページ: 5129526-5129526

    • DOI

      10.1155/2019/5129526

    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] piggyBac Transposon-Based Immortalization of Human Deciduous Tooth Dental Pulp Cells with Multipotency and Non-Tumorigenic Potential.2019

    • 著者名/発表者名
      Inada E, Saitoh I, Kubota N, Iwase Y, Kiyokawa Y, Shibasaki S, Noguchi H, Yamasaki Y, Sato M
    • 雑誌名

      International Journal of Molecular Science

      巻: 20 号: 19 ページ: 4904-4904

    • DOI

      10.3390/ijms20194904

    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Repeated human deciduous tooth-derived dental pulp cell reprogramming factor transfection yields multipotent intermediate cells with enhanced iPS cell formation capability2019

    • 著者名/発表者名
      Soda Miki、Saitoh Issei、Murakami Tomoya、Inada Emi、Iwase Yoko、Noguchi Hirofumi、Shibasaki Shinji、Kurosawa Mie、Sawami Tadashi、Terunuma Miho、Kubota Naoko、Terao Yutaka、Ohshima Hayato、Hayasaki Haruaki、Sato Masahiro
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 9 号: 1 ページ: 1490-1490

    • DOI

      10.1038/s41598-018-37291-2

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Timing of CRISPR/Cas9-related mRNA microinjection after activation as an important factor affecting genome editing efficiency in porcine oocytes2018

    • 著者名/発表者名
      Sato M, Maeda K, Koriyama M, Inada E, Saitoh I, Ohtsuka M, Nakamura S, Sakurai, T, Watanabe S, Miyoshi K
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 108 ページ: 29-38

    • DOI

      10.1016/j.theriogenology.2017.11.030

    • NAID

      120007099790

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Intrapancreatic Parenchymal Cell Transplantation as a Possible Model for the Development of a Cell-based Therapy for Type I Diabetes Mellitus2018

    • 著者名/発表者名
      Sato M, Inada E, Nakamura S, Saitoh I
    • 雑誌名

      OBM Transplantation

      巻: 2 号: 3 ページ: 1-1

    • DOI

      10.21926/obm.transplant.1803016

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Advance in drug-free acquisition of gene-engineered mammalian cells: A mini-review.2018

    • 著者名/発表者名
      Sato M, Inada E, Saitoh I, Yamasaki Y, Watanabe S
    • 雑誌名

      Current Topics in Biotechnology

      巻: 9 ページ: 1-9

    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 免疫染色された少数細胞の簡便な取得に基づくヒト歯髄細胞の遺伝子発現解析2020

    • 著者名/発表者名
      稲田絵美, 齊藤一誠, 清川裕貴, 早崎治明, 山崎要一
    • 学会等名
      第58回日本小児歯科学会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] 初期胚特異的糖鎖抗原SSEA-1は乳歯歯髄細胞由来iPS細胞の高度未分化状態を特定するマーカーとして有用である2018

    • 著者名/発表者名
      稲田絵美, 齊藤一誠, 窪田直子, 村上智哉, 澤味 規, 松枝一成, 早崎治明, 山崎要一
    • 学会等名
      第56回日本小児歯科学会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書

URL: 

公開日: 2018-04-23   更新日: 2022-01-27  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi