乳腺アポクリン癌の細胞形態とPI3K遺伝子変異との関連性の解明

• 研究課題/領域番号: 18K15096
• 研究種目: 若手研究
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 小区分49020:人体病理学関連
• 研究機関: 日本大学 (2021-2023); 聖路加国際大学 (2018-2020)
• 研究代表者: 野嵜 史 日本大学, 医学部, 助教 (10409021)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2024-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2023年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2019年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2018年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 乳癌 / アポクリン癌 / PI3K遺伝子 / PIK3CA / PI3K遺伝子変異 / PI3K

研究実績の概要

最終年度にはヒト乳癌手術検体におけるPIK3CA遺伝子変異解析を行い、アポクリン癌において3/20例(15.0%)にexon20(H1047R[c.3140A>G])の変異を認めた。
研究期間全体を通じては、PIK3CA遺伝子変異ホットスポットの変異を有さない非アポクリン癌培養細胞HCC1428において、PIK3CA遺伝子exon20のkinase domainである(H1047R[c.3140A>G])部位の変異導入による、細胞形態変化の状態を確認する目的でCRISPR-Cas9法を用い変異導入には成功したが、シングルセルクローニングが困難であり、研究期間内では変異細胞株の樹立ができず、PIK3CA遺伝子変異の有無による細胞形態の変化の観察には至らなかった。PIK3CA遺伝子発現抑制による細胞増殖抑制効果の有無について検討するために、PIK3CA遺伝子変異を有するアポクリン癌培養細胞MDA-MB-453とMFM223、コントロールの細胞としてHCC1428を用い、siRNAによるPIK3CA遺伝子のノックダウン実験を行った。アポクリン癌培養細胞では細胞増殖が有意に抑制されたが、非アポクリン癌培養細胞では有意な抑制はみられなかった(MDA-MB-453:p<0.05、MFM223:p<0.05、HCC1428:p=0.67)。培養細胞においては、PI3K阻害薬のIC50(50％阻害濃度)はPIK3CA遺伝子変異を有する乳癌培養細胞株で低いことより、PIK3CA遺伝子変異は PI3K阻害薬の効果を予測するバイオマーカーとして知られている。ヒト乳癌手術検体アポクリン癌においてPIK3CA遺伝子変異が認められたこと、PIK3CA遺伝子のノックダウンによりアポクリン癌培養細胞増殖が抑制されたことより、アポクリン癌はPIK3分子生物薬などの治療標的となる可能性があることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Different effects of crizotinib treatment in two non-small cell lung cancer patients with SDC4::ROS1 fusion variants (2023)
  • 著者名/発表者名: Yuta Ohishi, Yoko Nakanishi, Yukari Hirotani, Atsuko Suzuki, Tomoyuki Tanino, Haruna Nishimaki-Watanabe, Hiroko Kobayashi, Fumi Nozaki, Sumie Ohni, Xiaoyan Tang, Kentaro Hayashi, Yoshiko Nakagawa, Tetsuo Shimizu, Ichiro Tsujino, Noriaki Takahashi, Yasuhiro Gon, Shinobu Masuda
  • 雑誌名: Thoracic cancer 巻: 15 号: 1 ページ: 89-93
  • DOI: 10.1111/1759-7714.15168
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correlations between class I glucose transporter expression patterns and clinical outcomes in non‐small cell lung cancer (2023)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi Yoko、Iwai Momoko、Hirotani Yukari、Kato Ren、Tanino Tomoyuki、Nishimaki‐watanabe Haruna、Nozaki Fumi、Ohni Sumie、Tang Xiaoyan、Masuda Shinobu、Sasaki‐Fukatsu Kayoko
  • 雑誌名: Thoracic Cancer 巻: 14 号: 27 ページ: 2761-2769
  • DOI: 10.1111/1759-7714.15060
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] コラーゲン・ゲル包埋法の手法および増殖乳癌培養細胞の形状についての報告 (2023)
  • 著者名/発表者名: 野嵜史 , 廣谷ゆかり , 山平 真也 , 増田しのぶ
  • 学会等名: 第64回日本組織細胞化学会総会・学術集会
• [学会発表] 妊娠期乳癌における遺伝子発現解析 (2022)
  • 著者名/発表者名: 野嵜 史
  • 学会等名: 第68回日本病理学会秋期特別総会
• [学会発表] 低異型度乳管内病変の診断と臨床の対応 乳管内癌の異型度 (2022)
  • 著者名/発表者名: 増田 しのぶ, 野嵜 史
  • 学会等名: 第111回日本病理学会総会
• [学会発表] 乳腺アポクリン癌培養細胞における、PIK3CA抑制効果の検討 (2020)
  • 著者名/発表者名: 野嵜史
  • 学会等名: 第66回日本病理学会秋期特別総会