ゼノフリー型セルフフィーダーシステムによるiPS細胞由来血小板製剤の臨床応用実現

• 研究課題/領域番号: 18K19910
• 研究種目: 挑戦的研究(萌芽)
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 中区分90:人間医工学およびその関連分野
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 田村 彰吾 名古屋大学, 医学系研究科(保健), 講師 (60722626)
• 研究分担者: 小嶋 哲人 名古屋大学, 医学系研究科(保健), 教授 (40161913) ; 佐々木 知幸 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (40739124)
• 研究期間 (年度): 2018-06-29 – 2020-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2019年度)
• 配分額: 6,370千円 (直接経費: 4,900千円、間接経費: 1,470千円); 2019年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円); 2018年度: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円)
• キーワード: 巨核球 / 造血微小環境 / iPS細胞 / 骨髄微小環境 / 血小板

研究成果の概要

本研究は、研究代表者が発見した骨髄巨核球・血小板造血微小環境を構成する新規間質細胞「podoplanin (PDPN) 陽性間葉系細胞」をin vitroにおける血小板培養システムに応用し、iPS細胞由来血小板製剤の高効率作製方法を樹立することを目的とした。PDPN陽性間葉系細胞は明らかに巨核球前駆細胞の自己増殖を促進することを確認した。しかし、成熟巨核球から産生される血小板がフィーダーであるPDPN陽性間葉系細胞に接着してしまい、血小板の回収率が極端に低下することも明らかになった。

研究成果の学術的意義や社会的意義

in vitorにおける巨核球・血小板培養効率を向上させるためには骨髄の造血環境の再構築が必須である。本研究は我々が新たに発見したPDPN間葉系細胞をフィーダー細胞として用いたが、静置条件下での培養ではフィーダー細胞への血小板の接着が問題になることを明らかにした。今後は、非静置条件での培養システムや、血小板産生に関わる分子に着目したビーズなどの非フィーダー細胞系の血小板大量産生培養システムの開発が必要になることが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Higher FVIII:C Measured by Chromogenic Substrate Assay Than by One-Stage Assay Is Associated With Silent Hemophilic Arthropathy (2020)
  • 著者名/発表者名: Mika Ogawa, Nobuaki Suzuki, Nobunori Takahashi, Shogo Tamura, Atsuo Suzuki, Sachiko Suzuki, Yuua Hattori, Misaki Kakihara, Takeshi Kanematsu, Toshihisa Kojima, Akira Katsumi, Fumihiko Hayakawa, Tetsuhito Kojima, Naoki Ishiguro , Hitoshi Kiyoi , Tadashi Matsushita
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 188 ページ: 103-105
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2020.01.003
  • NAID: 120006872431
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Soluble CLEC-2 is generated independently of ADAM10 and is increased in plasma in acute coronary syndrome: comparison with soluble GPVI (2019)
  • 著者名/発表者名: Inoue Osamu、Osada Makoto、Nakamura Junya、Kazama Fuminori、Shirai Toshiaki、Tsukiji Nagaharu、Sasaki Tomoyuki、Yokomichi Hiroshi、Dohi Tomotaka、Kaneko Makoto、Kurano Makoto、Oosawa Mitsuru、Tamura Shogo、Satoh Kaneo、Takano Katsuhiro、Miyauchi Katsumi、Daida Hiroyuki、Yatomi Yutaka、Ozaki Yukio、Suzuki-Inoue Katsue
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 110 号: 3 ページ: 285-294
  • DOI: 10.1007/s12185-019-02680-4
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Molecular basis of SERPINC1 mutations in Japanese patients with antithrombin deficiency (2019)
  • 著者名/発表者名: Tamura Shogo、Hashimoto Erika、Suzuki Nobuaki、Kakihara Misaki、Odaira Koya、Hattori Yuna、Tokoro Mahiru、Suzuki Sachiko、Takagi Akira、Katsumi Akira、Hayakawa Fumihiko、Suzuki Atsuo、Okamoto Shuichi、Kanematsu Takeshi、Matsushita Tadashi、Kojima Tetsuhito
  • 雑誌名: Thrombosis Research 巻: 178 ページ: 159-170
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2019.04.004
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Apparent Synonymous Mutation F9 c.87A>G Causes Secretion Failure by In-Frame Mutation With Aberrant Splicing (2019)
  • 著者名/発表者名: Odaira K, Tamura S, Suzuki N, Kakihara M, Hattori Y, Tokoro M, Suzuki S, Takagi A, Katsumi A, Hayakawa F, Okamoto S, Suzuki A, Kanematsu T, Matsushita T, Kojima T.
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 179 ページ: 95-103
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2019.04.022
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Successful Perioperative Combination of High-Dose FVIII Therapy Followed by Emicizumab in a Patient with Hemophilia A with Inhibitors (2019)
  • 著者名/発表者名: Okamoto Shuichi、Suzuki Nobuaki、Suzuki Atsuo、Suzuki Sachiko、Tamura Shogo、Suzuki Mochihito、Takahashi Nobunori、Kojima Toshihisa、Kanematsu Takeshi、Kojima Tetsuhito、Kiyoi Hitoshi、Ishiguro Naoki、Matsushita Tadashi
  • 雑誌名: TH Open 巻: 03 号: 04 ページ: e364-e366
  • DOI: 10.1055/s-0039-3401001
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] マウス骨髄のPodoplanin 陽性傍細動脈間質細胞はCLEC-2 を介して巨核球系細胞の増殖とproplatelet formation を促進する (2018)
  • 著者名/発表者名: TAMURA Shogo
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 29 号: 4 ページ: 389-397
  • DOI: 10.2491/jjsth.29.389
  • NAID: 130007432250
  • ISSN: 0915-7441, 1880-8808
  • 査読あり
• [雑誌論文] Platelets play an essential role in murine lung development through Clec-2/podoplanin interaction (2018)
  • 著者名/発表者名: Tsukiji Nagaharu、Inoue Osamu、Morimoto Mitsuru、Tatsumi Norifumi、Nagatomo Hiroaki、Ueta Koji、Shirai Toshiaki、Sasaki Tomoyuki、Otake Shimon、Tamura Shogo、Tachibana Toshiaki、Okabe Masataka、Hirashima Masanori、Ozaki Yukio、Suzuki-Inoue Katsue
  • 雑誌名: Blood 巻: 132 号: 11 ページ: 1167-1179
  • DOI: 10.1182/blood-2017-12-823369
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional characterization of recombinant snake venom rhodocytin: rhodocytin mutant blocks CLEC-2/podoplanin-dependent platelet aggregation and lung metastasis (2018)
  • 著者名/発表者名: Sasaki T.、Shirai T.、Tsukiji N.、Otake S.、Tamura S.、Ichikawa J.、Osada M.、Satoh K.、Ozaki Y.、Suzuki-Inoue K.
  • 雑誌名: Journal of Thrombosis and Haemostasis 巻: 16 号: 5 ページ: 960-972
  • DOI: 10.1111/jth.13987
  • NAID: 130008080766
  • 査読あり
• [雑誌論文] Optimisation of antithrombin resistance assay as a practical clinical laboratory test: Development of prothrombin activator using factors Xa/Va and automation of assay (2018)
  • 著者名/発表者名: Tamura S.、Suga Y.、Tanamura M.、Murata-Kawakami M.、Takagi Y.、Hottori Y.、Kakihara M.、Suzuki S.、Takagi A.、Kojima T.
  • 雑誌名: International Journal of Laboratory Hematology 巻: 40 号: 3 ページ: 312-319
  • DOI: 10.1111/ijlh.12786
  • 査読あり
• [学会発表] 先天性凝固異常症の遺伝子解析 「解析のStrategyとPitfall」 (2019)
  • 著者名/発表者名: 田村彰吾、高木明、早川文彦、小嶋哲人
  • 学会等名: 第20回日本検査血液学会学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] プロトロンビン R593L マウスの作製と解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 伸明，鈴木 敦夫，鈴木 幸子，田村 彰吾，高木 明， 小嶋 哲人，松下 正
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 血小板・巨核球上の C 型レクチン様受容体(CLEC-2)が，赤血球造血に及ぼす役割 (2019)
  • 著者名/発表者名: 大竹 志門，白井 俊光，築地 長治，佐々木知幸，田村 彰吾， 尾崎由基男，井上 克枝
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] int1h-1 を介した組換えではあるが Inv1 ではなく F8 イントロン 1 での複雑な大規模欠 失挿入変異による重症血友病 A (2019)
  • 著者名/発表者名: 所 真昼，田村 彰吾，鈴木 伸明，垣原美紗樹，服部 有那， 大平 晃也，鈴木 幸子，高木 明，早川 文彦，岡本 修一，兼松 毅， 松下 正，小嶋 哲人
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] F9 サイレント変異 c.87A ＞ G(p.Thr29 =)に起因するスプライシング異常の分子病態解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 大平 晃也，田村 彰吾，所 真昼，垣原美紗樹，服部 有那， 鈴木 幸子，高木 明，早川 文彦，岡本 修一，兼松 毅，鈴木 伸明， 松下 正，小嶋 哲人
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 新規伸長型変異を認めた先天性血液凝固第 XI 因子欠乏症の 1 例 (2019)
  • 著者名/発表者名: 早川 友梨，田村 彰吾，鈴木 伸明，大平 晃也，垣原美紗樹， 服部 有那，所 真昼，河島 史華，鈴木 幸子，早川 文彦，高木 明， 岡本 修一，兼松 毅，松下 正，小嶋 哲人
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 産科関連静脈血栓症における血栓性素因検索 -名古屋大学医学部附属病院における症例 第 2 報- (2019)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 幸子，垣原美紗樹，服部 有那，大平 晃也，所 真昼， 河島 史華，早川 友梨，岡本 修一，兼松 毅，中野 知子，今井 健史， 牛田 貴文，森山 佳則，小谷 友美，鈴木 伸明，田村 彰吾，早川 文彦， 小嶋 哲人，松下 正
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 特発性血小板減少性紫斑病の病勢に対し，サイトメガロウイルス再活性化の関与が疑わ れた 2 例 (2019)
  • 著者名/発表者名: 兼松 毅，鈴木 伸明，岡本 修一，鈴木 敦夫，川上 萌， 三田 直美，田村 彰吾，小嶋 哲人，清井 仁，松下 正
  • 学会等名: 第41回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] A Complex F8 Rearrangement Associated with Template Switching and int1h-related Homologous Recombination in a Patient with Severe Hemophilia A (2019)
  • 著者名/発表者名: M. Tokoro, S. Tamura, N. Suzuki, M. Kakihara, Y. Hattori, K. Odaira, S. Suzuki, A. Takagi, F. Hayakawa, S. Okamoto, T. Kanematsu, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [学会発表] F9 c.87A>G is a Double-faced Deleterious Mutation which Causes a Synonymous and Inframed-mutant FIX due to an Aberrant mRNA Splicing (2019)
  • 著者名/発表者名: K. Odaira, S. Tamura, N. Suzuki, M. Kakihara, Y. Hattori, M. Tokoro, S. Suzuki, A. Takagi, A. Katsumi, F. Hayakawa, S. Okamoto, A. Suzuki, T. Kanematsu, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [学会発表] An Inv22-like F8 Inverted Disruption in Severe Hemophilia a Brothers Possibly Occurring from Template Switching between Sister Chromatids (2019)
  • 著者名/発表者名: M. Kakihara, S. Tamura, M. Tokoro, K. Odaira, Y. Hattori, S. Suzuki, F. Hayakawa, M. Ogawa, T. Kanematsu, N. Suzuki, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [学会発表] Genetic Abnormalities of Japanese Patient with Symptomatic- and Asymptomatic-dysfibrinogenemia (2019)
  • 著者名/発表者名: Y. Hattori, S. Tamura, N. Suzuki, M. Kakihara, S. Suzuki, K. Odaira, M. Tokoro, F. Hayakawa, S. Okamoto, T. Kanematsu, T. Matsushita, T. Kojima
  • 学会等名: ISTH2019
  • 国際学会
• [学会発表] ト ロ ン ビ ン Na binding regionの ミ ス セ ン ス 変異は 多く が ア ン チ ト ロ ン ビ ン 抵抗性を 示す が 、 凝固活性も 低下す る (2019)
  • 著者名/発表者名: 田村彰吾、 川上萌、 勝見章、 高木明、 早川文彦 、 小嶋哲人
  • 学会等名: ト ロ ン ビ ン Na binding regionの ミ ス セ ン ス 変異は 多く が ア ン チ ト ロ ン ビ ン 抵抗性を 示す が 、 凝固活性も 低下す る
  • 招待講演
• [学会発表] Peri-arteriolar megakaryopoietic microenvironment via reciprocal CLEC-2/PDPN axis in mouse bone marrow (2018)
  • 著者名/発表者名: Shogo Tamura, Katsue Suzuki-Inoue, Yukio Ozaki, Tetsuhito Kojima
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] ス プ ラ イ シ ン グ 異常を 引き 起こ す 血液凝固第IX遺伝子サ イ レ ン ト 変異・ 血友病Bの 分子病態解析 (2018)
  • 著者名/発表者名: 大平晃也、 田村彰吾、 坂根寛人、 所 真昼、 垣原美紗樹、 服部有那、 橋本恵梨華、 鈴木幸子、 高木夕希、 高木明、 兼松毅、 岸本磨由子、 鈴 木伸明、 松下正、 小嶋哲人
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] F8 Inv22を 含む 複雑な 変異を 同定し た 重症血友病A症例の 遺伝学的変異ア レ ル 由来の 検索 (2018)
  • 著者名/発表者名: 垣原美紗樹、 田村彰吾、 服部有那、 高木夕希、 鈴木幸子、 橋本恵梨華、 坂根寛人、 大平晃也、 所真昼、 高木明、 小川実加、 兼松毅、 鈴木伸 明、 松下正、 小嶋哲人
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 脳梗塞の 増悪因子で あ る ア ク ロ レ イ ン の 抗血小板作用 (2018)
  • 著者名/発表者名: 梅谷徳彦、 白井俊光、 築地長治、 佐々 木知幸、 田村彰吾、 佐藤金夫、 大竹志門、 高野勝弘、 横道洋司、 尾崎由基男、 井上克枝
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 脳梗塞を 発症し た フ ィ ブ リ ノ ゲ ン 異常症の 分子病態機能解析 (2018)
  • 著者名/発表者名: 服部有那、 垣原美紗樹、 高木夕希、 鈴木幸子、 橋本恵梨華、 坂根寛人、 田村彰吾、 高木明、 松下正、 小嶋哲人
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 血友病Aに お い て 関節症の 進行抑制に は 出血抑制よ り も 高い FVIII活性が 必要で あ る (2018)
  • 著者名/発表者名: 鈴木伸明、 鈴木敦夫、 高橋伸典、 田村彰吾、 兼松毅、 高木明、 小嶋俊久、 清井仁、 小嶋哲人、 石黒直樹、 松下正
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 血小板・ 巨核球上の C型レ ク チ ン 様受容体（ CLEC-2） が 、 赤芽球の 分化・ 成熟に 及ぼ す 役割 (2018)
  • 著者名/発表者名: 大竹志門、 白井俊光、 築地長治、 佐々 木知幸、 田村彰吾、 佐藤金夫、 尾崎由基男、 井上克枝
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 血小板受容体GPVIア ゴ ニ ス ト 蛇毒コンバルキシンの 遺伝子組換え 体の 作製と そ の 機能解析 (2018)
  • 著者名/発表者名: 佐々 木知幸、 白井俊光、 築地長治、 大竹志門、 田村彰吾、 長田誠、 佐藤金夫、 尾崎由基男、 井上克枝
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 血液凝固第V因子欠乏症を 合併す る 血友病A症例： 第２ 報・ 凝血学的評価 (2018)
  • 著者名/発表者名: 鈴木幸子、 髙木夕希、 坂根寛人、 橋本恵梨華、 垣原美紗樹、 服部有那、 大平晃也、 所真昼、 田村彰吾、 高木明、 鈴木敦夫、 鈴木伸明、 松下 正、 山崎鶴夫、 小嶋哲人
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 鈴木敦夫、 鈴木伸明、 兼松毅、 岸本磨由子、 田村彰吾、 高木明、 川上萌、 梶浦容子、 小嶋哲人、 松下正 (2018)
  • 著者名/発表者名: 鈴木敦夫、 鈴木伸明、 兼松毅、 岸本磨由子、 田村彰吾、 高木明、 川上萌、 梶浦容子、 小嶋哲人、 松下正
  • 学会等名: 第40回日本血栓止血学会学術集会
• [学会発表] 血漿検体測定を 目指し た ア ン チ ト ロ ン ビ ン 抵抗性凝固第X因子検出法の 構築 (2018)
  • 著者名/発表者名: 田村彰吾、 藤岡亮也、 服部有那、 垣原美紗樹、 鈴木幸子、 高木夕希、 高木明、 小嶋哲人
  • 学会等名: 第19回日本検査血液学会学術集会
• [学会発表] Haploid origin of unusual Inv22 X-chromosome carrying wild-type telomere region in severe hemophilia A patients (2018)
  • 著者名/発表者名: Misaki Kakihara, Shogo Tamura, Yuna Hattori, Sachiko Suzuki, Koya Odaira, Mahiru Tokoro, Takeshi Kanematsu, Nobuaki Suzuki, Tadashi Matsushita, Tetsuhito Kojima
  • 学会等名: APSTH2018
  • 国際学会
• [学会発表] Functional analysis of a variant fibrinogen from dysfibrinogenemia patient with cerebral infarction (2018)
  • 著者名/発表者名: Hattori Y, Takagi Y, Kakihara M, Suzuki S, Odaira K, Tokoro M, Tamura S, Suzuki N, Matushita T, Kojima T
  • 学会等名: APSTH2018
  • 国際学会
• [備考] 名古屋大学大学院医学系研究科 総合保健学専攻 オミックス医療科学分野 造血・凝固チーム
  • URL: https://bloodgene-coag-hematopoiesis.jimdofree.com/
• [備考] 名古屋大学大学院医学系研究科 病態解析学講座 血液・ 遺伝子研究室
  • URL: http://square.umin.ac.jp/bloodlab/Hematol_%26_Gene_Res_Lab/Welcome.html