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金ナノ粒子を用いたラベルフリー細胞内シグナル迅速アッセイ法

研究課題

研究課題/領域番号 19021035
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 理工系
研究機関九州大学

研究代表者

片山 佳樹  九州大学, 工学研究院, 教授 (70284528)

研究分担者 新留 琢郎  九州大学, 工学研究院, 准教授 (20264210)
森 健  九州大学, 工学研究院, 助教 (70335785)
研究期間 (年度) 2007 – 2008
研究課題ステータス 完了 (2008年度)
配分額 *注記
3,700千円 (直接経費: 3,700千円)
2008年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2007年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
キーワードプロテインキナーゼ / 金ナノ粒子 / 基質 / ペプチド / ハイスループットスクリーニング / 比色分析 / 細胞内シグナル / 薬物探索
研究概要

昨年、確立した金ナノ粒子を用いるプロテインキナーゼ活性評価システムを用いて、種々のキナーゼの阻害剤の阻害能の検定を行った。いずれも、報告値とほぼ矛盾のないI C50値が得られ、本システムが阻害剤評価法として優れていることを実証した。また、本システムを用いたプロテインキナーゼ阻害剤ハイスループットスクリーニングを検討した。ケミカルライブラリを用い、プロテインキナーゼCに対する阻害能を評価したところ、0.8と高いZ'値が得られ、本法がハイスループットスクリーニング法として、十分適用可能であることが分かった。また、実際に阻害能を探索したところ、ケミカルライブラリに含まれていた既知の阻害剤2種は、すべてヒットした。その他にも、新規な阻害能を有する物質がヒットした。
また、実際にがん患者の摘出標本を用いて、がん細胞内で亢進しているプロテインキナーゼCαの活性を評価することにも成功した。11例の乳がん患者の摘出標本を用い、正常組織部分では、本キナーゼの活性は見られなかったのに対し、がん組織部位では顕著な活性が認められた。このことより、本法ががんの診断に適用できる可能性が示された。

報告書

(2件)
  • 2008 実績報告書
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (25件)

すべて 2009 2008 2007

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件) 学会発表 (16件) 図書 (1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Colorimetric enzymatic activity assay based on "non-crosslinking aggr egation" of gold nanoparticles induced by adsorption of substrate nentides2008

    • 著者名/発表者名
      Jun Oishi, et.al.
    • 雑誌名

      Biomacromolecules 9

      ページ: 2301-2308

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Correlation between phosphorylation ratios by MALDI-TOF MS analysis and enzyme kinetics2008

    • 著者名/発表者名
      Jeong-Hun Kang, et.al.
    • 雑誌名

      Eur. J. Mass Spectrom 14

      ページ: 261-265

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] A short peptide is a protein kinase C (PKC)a-specific substrate2008

    • 著者名/発表者名
      Jeong-Hun Kang, et.al.
    • 雑誌名

      Proteomics 8

      ページ: 2006-2011

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Evaluation of protein kinase activities of cell lysates using peptide microarrays based on SPR imaging2008

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Mori, et.al.
    • 雑誌名

      Anal. Biochem 8

      ページ: 223-231

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] High-throughput colorimetric detection of tyrosine kinase inhibitors based on the aggregation of gold nanoparticles2008

    • 著者名/発表者名
      Jun, Oishui, et. al.
    • 雑誌名

      Anal. Biochem. 373

      ページ: 161-163

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Measurement of homogeneous kinase activityfor cell lysates based on the aggregation of gold nanoparticles2007

    • 著者名/発表者名
      Jun, Oishui, et. al.
    • 雑誌名

      ChemBioChem 8

      ページ: 875-879

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] A peptide microarray for the detection of protein kinase activity in cell lysate2007

    • 著者名/発表者名
      Shuhei, Shigaki, et. al.
    • 雑誌名

      Anal. Sci. 23

      ページ: 271-275

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] High throughput assay of protein kinase using Au nano-particles2009

    • 著者名/発表者名
      Yoshiki Katayama, et.al.
    • 学会等名
      ライフサーベイヤーシンポジウム
    • 発表場所
      日立中央研究所
    • 年月日
      2009-01-29
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 金ナノ粒子を用いるラベルフリー迅速プロテインキナーゼアッセイ2008

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹, 他
    • 学会等名
      第18回化学とマイクロナノシステム研究会
    • 発表場所
      京都大学桂キャンパス
    • 年月日
      2008-12-09
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 細胞内シグナル網羅的解析・シグナローム2008

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹
    • 学会等名
      第26回医用高分子研究会講座
    • 発表場所
      産業技術総合研究所臨海副都心センター別館
    • 年月日
      2008-11-11
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 金ナノ粒子を用いる迅速プロテインキナーゼアッセイと診断への応用2008

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹, 他
    • 学会等名
      第57回高分子討論会
    • 発表場所
      大坂市立大学
    • 年月日
      2008-09-25
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 創薬・診断のための新規細胞内プロテインキナーゼセンシング2008

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹
    • 学会等名
      日本分析化学会第57年会
    • 発表場所
      福岡大学
    • 年月日
      2008-09-12
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] プロテインキナーゼ活性測定のためのペプチドマイクロアレイの高感度化2008

    • 著者名/発表者名
      下村隆, 他
    • 学会等名
      第45回化学関連支部合同九州大会
    • 発表場所
      北九州国際会議場
    • 年月日
      2008-07-05
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] プロテインキナーゼの基質ペプチドプロファイリング2008

    • 著者名/発表者名
      秦彬斗, 他
    • 学会等名
      第45回化学関連支部合同九州大会
    • 発表場所
      北九州国際会議場
    • 年月日
      2008-07-05
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 金ナノ粒子を用いる迅速阻害剤スクリーニング2008

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹, 他
    • 学会等名
      第6回ライフサーベイヤーシンポジウム
    • 発表場所
      大阪大学銀杏会館
    • 年月日
      2008-06-27
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] ペプチドによる金ナノ粒子の非架橋凝集を用いたキナーゼ活性を利用したがん診断2008

    • 著者名/発表者名
      朝見陽次, 他
    • 学会等名
      第57回高分子学会年次大会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2008-05-25
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] ポストゲノム研究とバイオチップ開発の現状と展望2008

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹
    • 学会等名
      KAST教育セミナー
    • 発表場所
      神奈川科学技術アカデミー
    • 年月日
      2008-03-03
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 細胞情報のセンシングと新しいナノメディスンの創製2008

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹
    • 学会等名
      第5回分子血管研究会
    • 発表場所
      ホテル日航東京
    • 年月日
      2008-01-06
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] ペプチドを金ナノ粒子の凝集剤とするキナーゼ活性検出法2007

    • 著者名/発表者名
      朝見陽次, 他
    • 学会等名
      第22回生体機能関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      東北大学多元物質科学研究所
    • 年月日
      2007-09-29
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 金ナノ粒子を用いた均一系キナーゼ活性検出法の開発2007

    • 著者名/発表者名
      朝見陽次, 他
    • 学会等名
      第25回九州分析化学若手の会夏季セミナー
    • 発表場所
      長崎市、ながさき式見ハイツ
    • 年月日
      2007-07-27
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 金ナノ粒子を利用した新規細胞内シグナル検出法の開発2007

    • 著者名/発表者名
      大石潤, 他
    • 学会等名
      九州分析化学若手の会夏季セミナー
    • 発表場所
      長崎市四杖町 式見ハイツ
    • 年月日
      2007-07-26
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 金ナノ粒子を用いた均一系キナーゼ活性検出法の開発2007

    • 著者名/発表者名
      朝見陽次, 他
    • 学会等名
      第44回化学関連支部合同九州大会
    • 発表場所
      北九州国際会議場
    • 年月日
      2007-07-07
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 金ナノ粒子を用いたキナーゼ活性検出法2007

    • 著者名/発表者名
      朝見陽次, 他 他
    • 学会等名
      第56回高分子学会年次大会
    • 発表場所
      国立京都国際会館
    • 年月日
      2007-05-29
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [図書] 分子認識と超分子2007

    • 著者名/発表者名
      片山佳樹
    • 総ページ数
      6
    • 出版者
      三共出版
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [産業財産権] プロテイキナーゼのリン酸化酵素活性ならびに脱リン酸化酵素活性の測定方法2007

    • 発明者名
      片山佳樹・森健・大石潤・姜貞勲・朝見陽次
    • 権利者名
      九州大学
    • 出願年月日
      2007-09-03
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書

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公開日: 2007-04-01   更新日: 2018-03-28  

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