ウイルスおよび細胞由来FLIPによる宿主細胞の増殖・感染防御制御機構の解析

• 研究課題/領域番号: 19041034
• 研究種目: 特定領域研究
• 配分区分: 補助金
• 審査区分: 生物系
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 米原 伸 京都大学, 生命科学研究科, 教授 (00124503)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 9,100千円 (直接経費: 9,100千円); 2008年度: 4,600千円 (直接経費: 4,600千円); 2007年度: 4,500千円 (直接経費: 4,500千円)
• キーワード: 遺伝子 / ウイルス / 細胞・組織 / シグナル伝達

研究概要

v-FLIPのWntシグナル増強の分子機構を明らかにするため。酵母を用いたtwo-hybrid法と抗FLAG抗体によってFlag-E8と共免疫沈降するタンパク質の質量分析(LC-MS/MS)解析を実施した。質量分析解析ではPI3キナーゼ制御サブユニットp85が、two-hybrid法ではPI3キナーゼ制御サブユニットp55を同定することができた。さらに解析した結果、1)これらの分子は実際にv-FLIP E8と会合すること、2)E8と強発現することによってE8のWnt3a処理によるTCFの転写活性増強作用をさらに強めること、3)安定型の変異β-catenin発現によるTCFの転写活性増強作用も同じように強めることが明らかとなった。
そして、さらに解析を加える目的で、PI3キナーゼ制御サブユニットp85の発現をshRNAの発現誘導系で実施した。しかし、p85の発現抑制を誘導しても、v-FLIP E8によるWntシグナルの増強作用には、変化が認められなかった。この結果は、v-FLIP E8のp85への結合は、E8のWntシグナル増強作用には関わっていないことを示唆している。現在、E8と会合することが質量分析解析等で示唆されている他のタンパク質の関与を解析している。

研究成果

• [雑誌論文] Novel cell death by downregulation of eEF1A1 expression in tetraploids (2009)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Y, and Yonehara S
  • 雑誌名: Cell Death and Differentiation 16 ページ: 139-150
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mechanism of NKT cell activation by intranasa coadministration of α-galactosylceramide, which can induce cross-protection against influenza viruses (2008)
  • 著者名/発表者名: Kamijuku H, Nagata Y, Jiang X, Ichinohe T, Tashiro T, Mori K, Taniguchi M, Hase K, Ohno H, Shimaoka L Yonehara S, Odagiri T, Tashiro M, Sata T, Hasegawa H, Seino K
  • 雑誌名: Mucosal Immunology 1 ページ: 208-218
  • 査読あり
• [雑誌論文] Critical Role for CXC Chemokine Ligand 16 (SR-PSOX) in Th1 response mediated by NKT cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimaoka T.
  • 雑誌名: J Immunol 179 ページ: 8191-8199
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid up-regulation of c-FLIP expression by BCR signaling through the PI3K/Akt pathway inhibits simultaneously induced Fas-mediated apoptosis in murine B lymphocytes. (2007)
  • 著者名/発表者名: Moriyama H.
  • 雑誌名: Immunol Lett 109 ページ: 36-46
  • 査読あり
• [雑誌論文] Conserved function of caspase-8 in apoptosis during bony fish evolution. (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakata S.
  • 雑誌名: Gene 396 ページ: 134-148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intervention of MAdCAM-1 or fractalkine alleviates graft-versus-host reaction associated intestinal injury while preserving graft-versus-tumor effects. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ueha S.
  • 雑誌名: J Leukoc Biol 81 ページ: 176-185
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serine protease Omi/HtrA2 targets WARTS kinase to control cell proliferation. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kuninaka S
  • 雑誌名: Oncogene 26 ページ: 2395-2406
  • 査読あり
• [学会発表] Fas下流シグナル分子の多様な生理機能 (2007)
  • 著者名/発表者名: 米原 伸
  • 学会等名: 生理研研究会「細胞死研究の新たな潮流と疾患研究への展開」
  • 発表場所: 岡崎市
  • 年月日: 2007-08-15
• [学会発表] TGF-βによる細胞死誘導活性および細胞死誘導阻害活性の分子機構と制御機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 米原 伸
  • 学会等名: 第72回日本インターフェロン・サイトカイン学会学術集会シンポジウム「新しいサイトカインのシグナル伝達と生理機能」
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2007-06-29
• [備考]
  • URL: http://www.lif.kyoto-u.ac.jp/labs/Fas/Home_j.htm