| 研究概要 |
本研究は細菌べん毛モーターの真の回転子を明らかにするために, モーター構成素子を1分子単位で蛍光標識することでモーター回転子の回転を可視化することを目指している. 本年度の研究において, モーターを蛍光標識するための光活性型GFP融合タンパク質の発現系および検出系の最適化を行った. さらに平成19年度の研究において発見した, 機能的なモーターにおける回転子構成タンパク質の交換現象についても研究を遂行した. この現象は当初の研究計画には含まれていない事項であるが, 本申請課題研究にて発見された全く新しい事実であり, 生体内における巨大分子複合体の構築および維持を理解する上で非常に重要な知見となり得る. そこで平成20年度の研究は, 回転子構成タンパク質の交換反応についても研究を進めた. 研究成果として以下が挙げられる.
1. 光活性型GFPの蛍光を発現および検出システムの最適化
2. 光褪色後蛍光回復(FRAP)による回転子構成タンパク質の交換反応の検出条件の確立
3. 回転子構成タンパク質の交換頻度の解析
4. べん毛モーター構成因子のGFP融合タンパク質の拡散運動の解析システムの構築
5. GFP融合タンバク質の細胞膜内における拡散運動の解析
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