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ラット顕微授精の効率化とGS細胞由来精子細胞からの産仔獲得

研究課題

研究課題/領域番号 19300150
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 実験動物学
研究機関生理学研究所

研究代表者

平林 真澄  生理学研究所, 行動・代謝分子解析センター, 准教授 (20353435)

研究分担者 篠原 隆司  京都大学, 大学院・医学研究科, 教授 (30322770)
研究期間 (年度) 2007 – 2009
研究課題ステータス 完了 (2009年度)
配分額 *注記
10,530千円 (直接経費: 8,100千円、間接経費: 2,430千円)
2009年度: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円)
2008年度: 3,510千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 810千円)
2007年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
キーワードラット / 蛍光タンパク質遺伝子 / 精子幹細胞 / 人為的活性化 / 円形精子細胞 / 胚性幹細胞 / 精細管移植 / キメラ / トランスジェニック / FGFレセプターインヒビター / MEK活性化インヒビター / GSK3インヒビター / LIF / レンチウイルス / レトロウイルス / 異種間移植 / 精子 / 第二減数分裂後期 / イオノマイシン / 体内受精 / DNAメチル化
研究概要

本研究の究極の目的はノックアウトラット作製の基盤技術を構築することであり、顕微授精技術の高度化を図るとともに、生殖幹細胞(GSCs)や胚性幹細胞(ESCs)を経由したトランスジェニック産仔の作出を目指した。その結果、ラットでGSCsとESCsの樹立でき、それぞれにレンチウイルス法・顕微授精法およびエレクトロポレーション法・キメラ作製法を適用することによって、外来性蛍光タンパク質遺伝子を導入したラット産仔を得ることに成功した。

報告書

(4件)
  • 2009 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2008 実績報告書
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (41件)

すべて 2010 2009 2008 2007 その他

すべて 雑誌論文 (18件) (うち査読あり 18件) 学会発表 (17件) 図書 (2件) 備考 (4件)

  • [雑誌論文] Rat transgenesis via embryonic stem cells electroporated with Kusabira-orange gene.2010

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M, 他5名
    • 雑誌名

      Mol. Reprod. Dev. 77

      ページ: 474-474

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Establishment of rat embryonic stem cell lines that can participate into germline chimerae at high efficiency.2010

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M, 他6名
    • 雑誌名

      Mol. Reprod. Dev. 77

      ページ: 94-94

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Impaired active demethylation of paternal genome in pronuclear-stage rat zygotes produced by in vitro fertilization or intracytoplasmic sperm injection.2010

    • 著者名/発表者名
      Yoshizawa Y, 他3名, 3番目
    • 雑誌名

      Mol. Reprod. Dev. 77

      ページ: 69-75

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Impaired active demethylation of paternal genome in pronuclear-stage rat zygotes produced by in vitro fertilization or intracytoplasmic sperm injection2010

    • 著者名/発表者名
      Yoshizawa Y
    • 雑誌名

      Mol.Reprod.Dev. 77

      ページ: 69-75

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Establishment of rat embryonic stem cell lines that can participate into germline chimerae at high efficiency2010

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 雑誌名

      Mol.Reprod.Dev. 77

      ページ: 94-94

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Rat Transgenesis via embryonic stem cells electroporated with kusabira-orange gene2010

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 雑誌名

      Mol.Reprod.Dev. 77(In press)

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Availability of subfertile transgenic rats expressing c-myc gene as recipients for spermatogonial transplantation.2009

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M, 他5名
    • 雑誌名

      Transgenic Res 18(1)

      ページ: 135-141

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Availability of subfertile transgenic rats expressing c-myc gene as recipients for spermatogonial transplantation2009

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 雑誌名

      Transgenic Res. 18

      ページ: 135-141

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Production of transgenic rats via lentiviral transduction and xenogenic transplantation of spermatogonial stem cells.2008

    • 著者名/発表者名
      Kanatsu-Shinohara M, 他5名, Hirabayashi M, Shinohara T.
    • 雑誌名

      Biol. Reprod 79

      ページ: 1121-1128

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] An ENU-induced mutant archive for gene targeting in rats.2008

    • 著者名/発表者名
      Mashimo T, 他9名, 8番目
    • 雑誌名

      Nat. Genet. 40

      ページ: 514-515

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Direct comparison between ICSI-mediated DNA transfer and pronuclear DNA microinjection for producing transgenic rats.2008

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M, 他3名
    • 雑誌名

      Exp. Anim. 57(2)

      ページ: 145-148

    • NAID

      10024166309

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Live rats resulting from injection of oocytes with spermatozoa freeze-dried and stored for one year.2008

    • 著者名/発表者名
      Hochi S, 他3名, 4番目
    • 雑誌名

      Mol. Reprod. Dev. 75

      ページ: 890-894

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Live rats resulting from injection of oocytes with spermatozoa freeze-dried and stored for one year2008

    • 著者名/発表者名
      Hochi S
    • 雑誌名

      Mol. Reprod. Dev. 75

      ページ: 890-894

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書 2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Direct comparison between ICSI-mediated DNA transfer and pronuclear DNA microinjection for producing transgenic rats2008

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 雑誌名

      Exp. Anim. 57

      ページ: 145-148

    • NAID

      10024166309

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Factors affecting full-term development of rat oocytes microinjected with fresh or cryopreserved round spermatids2008

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 雑誌名

      Exp. Anim. 57

      ページ: 401-405

    • NAID

      10024166601

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Production of transgenic rats via lentiviral transduction and xenogenic transplantation of spermatogonial stem cells2008

    • 著者名/発表者名
      Kanatsu-Shinohara M
    • 雑誌名

      Biol. Reprod. 79

      ページ: 1121-1128

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Direct comparison between ICSI-mediated DNA transfer and pronuclear DNA microiniection for nroducine transgenic rats2008

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 雑誌名

      Exp. Anim. 57

      ページ: 145-148

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Factors affecting full-term development of rat oocytes microinjected with fresh or crvonreserved round snermatids2008

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 雑誌名

      Exp. Anim. 57(印刷中)

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] CAG/venusトランスジェニックラット胚盤胞に由来するES細胞株の樹立.2009

    • 著者名/発表者名
      平林真澄, 他
    • 学会等名
      第102回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      奈良県奈良市
    • 年月日
      2009-09-10
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] CAG/venusトランスジェニックラット胚盤胞に由来するES細胞株の樹立2009

    • 著者名/発表者名
      平林真澄
    • 学会等名
      第102回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      近畿大学農学部キャンパス(奈良県奈良市)
    • 年月日
      2009-09-10
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] Derivation of rat cell line which differentiate into visceral yolk sac in vivo.2009

    • 著者名/発表者名
      Takada T, 他
    • 学会等名
      The 7th Annual Meeting of International Society for Stem Cell Research
    • 発表場所
      Barcelona, Spain
    • 年月日
      2009-07-10
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] Derivation of rat cell line which differentiate into visceral yolk sac in vivo2009

    • 著者名/発表者名
      Takada T
    • 学会等名
      The 7th Annual Meeting of International Society for Stem Cell Research
    • 発表場所
      Barcelona, Spain
    • 年月日
      2009-07-10
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] IVF、ICSI、ROSIに由来するラット前核期卵のDNA脱メチル化動態2009

    • 著者名/発表者名
      平林真澄, 他
    • 学会等名
      第56回日本実験動物学会
    • 発表場所
      埼玉県さいたま市
    • 年月日
      2009-05-15
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] IVF、ICSI、ROSIに由来するラット前核期卵のDNA脱メチル化動態2009

    • 著者名/発表者名
      平林真澄
    • 学会等名
      第56回日本実験動物学会
    • 発表場所
      大宮ソニックシティ(埼玉県さいたま市)
    • 年月日
      2009-05-15
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] ラット前核期卵の体外作出行程は雄性ゲノムの能動的脱メチル化に影響する2009

    • 著者名/発表者名
      吉沢雄介
    • 学会等名
      第50回日本哺乳動物卵子学会
    • 発表場所
      都市センターホテル(東京都千代田区)
    • 年月日
      2009-05-09
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 体内受精、体外受精、および顕微授精に由来するラット前核期卵のDNA脱メチル化動態.2008

    • 著者名/発表者名
      吉沢雄介, 他
    • 学会等名
      第101回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      福岡県博多市
    • 年月日
      2008-09-20
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] 体内受精、体外受精、および顕微授精に由来するラット前核期卵のDNA脱メチル化動態2008

    • 著者名/発表者名
      吉沢雄介
    • 学会等名
      第101回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      福岡県博多市
    • 年月日
      2008-09-19
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] c-mycを過剰発現するトランスジェニック雄ラットは精子幹細胞移植のレシピエントとして利用できるか?2008

    • 著者名/発表者名
      平林真澄, 他
    • 学会等名
      日本実験動物科学技術2008/第55回日本実験動物学会
    • 発表場所
      宮城県仙台市
    • 年月日
      2008-05-15
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] c-mycを過剰発現するトランスジェニック雄ラットは精子幹細胞移植のレシピエントとして利用できるか?2008

    • 著者名/発表者名
      平林真澄
    • 学会等名
      第55回日本実験動物学会総会
    • 発表場所
      宮城県仙台市
    • 年月日
      2008-05-15
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] ラットICSI系で作製した前核期卵における染色体異常の誘発要因について.2007

    • 著者名/発表者名
      保地眞一, 他
    • 学会等名
      第100回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      東京都文京区
    • 年月日
      2007-10-21
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] ラットICSI系で作製した前核期卵における染色体異常の誘発要因について2007

    • 著者名/発表者名
      保地 眞一
    • 学会等名
      第10g回日本実験動物学会総会
    • 発表場所
      東京都文京区
    • 年月日
      2007-10-21
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] -196℃、+4℃、または+25℃で長期保存したフリーズドライラット精子のICSIによる個体発生能.2007

    • 著者名/発表者名
      渡辺香, 他
    • 学会等名
      第48回日本哺乳動物卵子学会
    • 発表場所
      山梨県甲府市
    • 年月日
      2007-05-26
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] -196℃、+4℃、または+25℃で長期保存したフリーズドライラット精子のICSIによる個体発生能2007

    • 著者名/発表者名
      渡辺 香
    • 学会等名
      第48回日本哺乳動物卵子学会大会
    • 発表場所
      山梨県甲府市
    • 年月日
      2007-05-26
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] ラットROSIにおいて新鮮精子細胞と凍結精子細胞のどちらを用いるかで卵活性化処理の適期が異なる.2007

    • 著者名/発表者名
      加藤めぐみ, 他
    • 学会等名
      第54回日本実験動物学会
    • 発表場所
      東京都江戸川区
    • 年月日
      2007-05-24
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] ラットROSIにおいて新鮮精子細胞と凍結精子細胞のどちらを用いるかで卵活性化処理の適期が異なる2007

    • 著者名/発表者名
      加藤 めぐみ
    • 学会等名
      第54回日本実駿動物学会総会
    • 発表場所
      東京都江戸川区
    • 年月日
      2007-05-24
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [図書] Rat genomics: Methods and Protocols(Eds. I Anegon, Chapter-9. Generation of transgenic rats by ooplasmic injection of sperm cells exposed to exogenous DNA.)2010

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M, Hochi S
    • 出版者
      Humana Press
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [図書] Chapter-9.Generation of transgenic rats by ooplasmic injection of sperm cells exposed to exogenous DNA."Rat genomics : Methods and Protocols"(Eds.I Anegon)2010

    • 著者名/発表者名
      Hirabayashi M
    • 総ページ数
      10
    • 出版者
      Humana Press
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.nips.ac.jp/mamtg/

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.nips.ac.jp/mamtg/

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.nips.ac.jp/mamtg/

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.nips.ac.jp/mamtg/

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書

URL: 

公開日: 2007-04-01   更新日: 2016-04-21  

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