遺伝子破壊法を用いた高等真核細胞のクロマチン構造構築因子群の構造機能解析

• 研究課題/領域番号: 19310127
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 基礎ゲノム科学
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 中山 建男 宮崎大学, 理事 (60031712)
• 研究分担者: 高見 恭成 宮崎大学, 医学部, 准教授 (80236356) ; 菊池 秀彦 宮崎大学, 医学部, 助教 (10301384)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 20,410千円 (直接経費: 15,700千円、間接経費: 4,710千円); 2009年度: 5,980千円 (直接経費: 4,600千円、間接経費: 1,380千円); 2008年度: 6,890千円 (直接経費: 5,300千円、間接経費: 1,590千円); 2007年度: 7,540千円 (直接経費: 5,800千円、間接経費: 1,740千円)
• キーワード: ヒストン / クロマチン / ヌクレオソーム / ジーンノックアウト法 / アポトーシス / 転写制御 / クロマチン構造 / ヒストンシャペロン / DNA複製 / 細胞周期 / チェックポイント / DNA障害 / DT40 / ジーンノックアスト法

研究概要

ニワトリDT40細胞株を用い、遺伝子破壊法を駆使してクロマチン構造構築因子群の欠損変異株を作製して、CAF-1依存性の急速なヌクレオソーム会合は細胞分裂とDNA複製に必須であること、HDAC2はEBF1,Pax5,Aiolos,Ikaros,E2A遺伝子の発現制御を介して、IgM H鎖とL鎖の遺伝子発現をコントロールしていること、GCN5とBCRシグナリングはICADとIAP2の減少とカスパーゼの活性化を介して、未熟B細胞のアポトーシス誘導に協調的に関与していることなどを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] GCN5 regulates the activation of PI3K/Akt survival pathway in B cells exposed to oxidative stress via controlling gene expressions of Syk and Btk. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Kuribayashi, F., Takami, Y., Imajoh-Ohmi, S., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 405 ページ: 657-661
  • 査読あり
• [雑誌論文] GCN5 regulates the superoxide-generating system in Leukocytes via controlling gp91-phox gene expression. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Kuribayashi, F., Kiwaki, N., Takami, Y., Nakayama, T.
  • 雑誌名: J. Immunology 186 ページ: 3015-3022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improved applications of the tetracycline-regulated gene depletion system. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nishijima, H., Takami, Y., Nakayama, T., Adachi, N., Shibahara, K.
  • 雑誌名: BioScience Trends 3 ページ: 161-167
• [雑誌論文] Histone H1 null vertebrate cells exhibit altered nucleosome architecture. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, H., Takami, Y., Sonoda, E., Iwasaki, T., Iwano, H., Tachibana, M., Takeda, S., Nakayama, T., Kimura, H., Shinkai, Y.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 38 ページ: 3533-3545
  • 査読あり
• [雑誌論文] Curcumin dramatically enhances retinoic acid-induced superoxide generating activity via accumulation of p47-phox and p67-phox proteins in U937 cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Kuribayashi, F., Kiwaki, N., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 395 ページ: 61-65
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone H1 null vertebrate cells exhibit altered nucleosome architecture (2010)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto H.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 巻: 38 ページ: 3533-3545
  • 査読あり
• [雑誌論文] E2A participates in a fine control of pre-mature B cell apoptosis mediated by B cell receptor signaling via transcription regulations of survivin, IAP2 and caspase-8 genes. (2009)
  • 著者名/発表者名: Toyonaga, K., Kikuchi, H., Yamashita, K., Nakayama, M., Chijiiwa, K., Nakayama, T.
  • 雑誌名: FEBS J. 276/5 ページ: 1418-1428
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lacking of Aiolos accelerates pre-mature B cell apoptosis mediated by BCR signaling through elevation in cytochrome c release. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Yamashita, K., Nakayama, M., Toyonaga, K., Tsuneyoshi, I., Takasaki, M., Nakayama, T.
  • 雑誌名: BBA-Molecular Cell Research 1793 ページ: 1304-1314
  • 査読あり
• [雑誌論文] E2A participates in a fine control of pre-mature B-cell apoptosis mediated by B-cell receptor signaling via transcriptional regulation of survivin, IAP2 and caspase-8 (2009)
  • 著者名/発表者名: Toyonaga K.
  • 雑誌名: FEBS J. 巻: 276 ページ: 1418-1428
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lacking of Aiolos accelerates pre-mature B cell apoptosis mediated by BCR signaling through elevation in cytochrome c release (2009)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi H.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 巻: 1793 ページ: 1304-1314
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improved applications of the tetracycline-regulated gene depletion system (2009)
  • 著者名/発表者名: Nishijima H.
  • 雑誌名: BioScience Trends 巻: 3 ページ: 161-167
• [雑誌論文] E2A participates in a fine control of pre-mature B cell apoptosis mediated by B cell receptorsignaling via transcription regulations of survivin, IAP2 and caspase-8 genes. (2009)
  • 著者名/発表者名: *Toyonaga, K., *Kikuchi, H., Yamashita, K., Nakayama, M., Chijiiwa, K., Nakayama, T.
  • 雑誌名: FEBS J. 276/5 ページ: 1418-1428
  • 査読あり
• [雑誌論文] Studies on epigenetic control of B cell functions using the DT40 cell line. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Barman, H. K., Nakayama, M., Takami, Y., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Immunogenetics Research Progress, Nova Science Publishers, Inc. NY (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] クロマチン構築を介したDNA複製制御 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高見恭成
  • 雑誌名: 蛋白質・核酸・酵素 54 ページ: 496-501
• [雑誌論文] GCN5 and BCR signalling collaborate to induce pre-mature B cell apoptosis through depletion of ICAD and IAP2 and activation of caspase activities. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Gene 419 ページ: 48-55
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone acetyltransferase-1 regulates integrity of cytosolic histone H3-H4 containing complex. (2008)
  • 著者名/発表者名: Barman, H.K., Takami, Y., Nishijima, H., Shibahara, K., Sanematsu, F., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 373 ページ: 624-630
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone acetyltransferase-1 regulates integrity of cytosolic histone H3-H4 containing complex. (2008)
  • 著者名/発表者名: Barman, H. K., Takami, Y., Nishijima, H., Shibahara, K., Sanematsu, F., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 373 ページ: 624-630
  • 査読あり
• [雑誌論文] Studies on epigenetic control of B cell functions using the DT40 cell line (2008)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Barman, H. K., Nakayama, M., Takami, Y. and Nakayama, T.
  • 雑誌名: Immunogenetics Research Progress, Nova Science Publishers, Inc. NY (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Essential role of CAF-1-mediated rapid nucleosome assembly for DNA replication and cell division in vertebrate cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takami, Y., Ono, T., Fukagawa, T., Shibahara, K., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Mol. Biol. Cell 18 ページ: 129-141
  • 査読あり
• [雑誌論文] Collaborative roles of rH2AX and the Rad51 paralog Xrcc3 in homologous recombinational repair. (2007)
  • 著者名/発表者名: Sonoda, E., Zhao, G.-Y., Kohzaki, M., Dhar, P.K., Kikuchi, K., Redon, C., Pilch, D.R., Bonner, W.W., Nakano, A., Watanabe, M., Nakayama, T., Takeda, S., Takami, Y.
  • 雑誌名: DNA Repair 6 ページ: 280-292
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cleavage and cytoplasmic relocalization of histone deacetylase 3 are important for apoptosis progression. (2007)
  • 著者名/発表者名: Escaffit, F., Vaute, O., Chevillard-Briet, M., Segui, B., Takami, Y., Nakayama, T., Trouche, D.
  • 雑誌名: Mol. Cell. Biol. 27 ページ: 554-567
  • 査読あり
• [雑誌論文] HDAC2 controls IgM H and L-chain gene expressions via EBF1, Pax5, Ikaros, Aiolos and E2A gene expressions. (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakayama, M., Suzuki, H., Yamamoto-Nagamatsu, N., Barman, H.K., Kikuchi, H., Takami, Y., Toyonaga, K., Yamashita, K., Nakayama, T.
  • 雑誌名: Genes Cells 12 ページ: 359-373
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone H1 variant, H1R is involved in DNA damage response. (2007)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, H., Sonoda, E., Takami, Y., Kimura, H., Nakayama, T., Tachibana, M., Takeda, S., Shinkai, Y.
  • 雑誌名: DNA Repair 6 ページ: 1584-1595
  • 査読あり
• [雑誌論文] Essential role of CAF-1-mediated rapid nucleosome assembly for DNA replication and cell division in vertebrate cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Takami, Y., Ono, T., Fukagawa, T., Shibahara, K. and Nakayama, T.
  • 雑誌名: Mol. Biol. Cell 18 ページ: 129-141
  • 査読あり
• [雑誌論文] Collaborative roles of rH2AX and the Rad51 paralog Xrcc3 in homologous recombinational repair (2007)
  • 著者名/発表者名: Sonoda, E., Zhao, G.-Y., Kohzaki, M., Dhar, P. K., Kikuchi, K., Redon, C., Pilch, D. R., Bonner, W. W., Nakano, A., Watanabe, M., Nakayama, T., Takeda, S. and Takami, Y.
  • 雑誌名: DNA Repair 6 ページ: 280-292
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cleavage and cytoplasmic relocalization of histone deacetylase 3 are important for apoptosis progression (2007)
  • 著者名/発表者名: Escaffit, F., Vaute, O., Chevillard-Briet, M., Segui, B., Takami, Y., Nakayama, T. and Trouche, D.
  • 雑誌名: Mol. Cell. Biol. 27 ページ: 554-567
  • 査読あり
• [雑誌論文] HDAC2 controls IgM H and L-chain gene expressions via EBF1, Pax5, Ikaros, Aiolos and E2A gene expressions (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakayama, M., Suzuki, H., Yamamoto-Nagamatsu, N., Barman, H. K., Kikuchi, H., Takami, Y., Toyonaga, K., Yamashita, K. and Nakayama, T.
  • 雑誌名: Genes Cells 12 ページ: 359-373
  • 査読あり
• [雑誌論文] Histone H1 variant, H1R is involved in DNA damage response (2007)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, H., Sonoda, E., Takami, Y., Kimura, H., Nakayama, T., Tachibana, M., Takeda, S. and Shinkai, Y.
  • 雑誌名: DNA Repair 6 ページ: 1584-1595
  • 査読あり
• [学会発表] クルクミンによる白血球スーパーオキシド産生系誘導増強効果 (2010)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦、中山建男
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会/第83回日本生化学会大会、合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] ニワトリDT40細胞を用いたミトコンドリアSirtuinsの機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鈴木寛之、中山建男、高見恭成
  • 学会等名: 第10回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2010-06-17
• [学会発表] Histone chaperone FACT is involved in efficient elongation of nascent DNA chain. (2009)
  • 著者名/発表者名: 阿部拓也、大沢洸司、高見恭成、多田周右、中山建男、室伏廣、堀越正美、関政幸、榎本武美
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-12
• [学会発表] 転写因子AiolosによるBリンパ球アポトーシス制御機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦、山下幸貴、中山雅美、豊永健二、中山建男
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-12
• [学会発表] ノックイン変異細胞を用いたASF1/CIAの機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高見恭成、中山建男
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-11
• [学会発表] GCN5による白血球スーパーオキシド産生系制御機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 木脇直美、菊池秀彦、栗林太、中山建男
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] 転写因子E2AによるBリンパ球アポトーシス制御 (2009)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦、豊永健二、山下幸貴、中山雅美、中山建男
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] ノックイン変異ASF1/CIA細胞を用いたASF1の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高見恭成、中山建男
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] 転写因子E2AによるBリンパ球アポトーシス制御機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦、豊永健二、山下幸貴、中山雅美、中山建男
  • 学会等名: 日本分子生物学会第9回シンポジウム
  • 発表場所: 宮崎
  • 年月日: 2009-05-11
• [学会発表] ニワトリDT40細胞を用いたHat1の機能解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高見恭成、Hirak Kumar Barman, 中山建男
  • 学会等名: 日本分子生物学会第9回シンポジウム
  • 発表場所: 宮崎
  • 年月日: 2009-05-11
• [学会発表] ヒストンアセチルトランスフェラーゼGCN5によるBCRシグナリング制御 (2008)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦、中山建男
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会、第81回日本生化学会大会、合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] ニワトリDT40細胞を用いたhistone acethyltransferase-1(Hat1)の機能解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高見恭成、中山建男
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会、第81回日本生化学会大会、合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] ヒストンアセチルトランスフェラーゼGCN5によるBCRシグナリング制御. (2008)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦, 中山建男
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会、第81回口本生化学会大会、合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] ニワトリDT40細胞を用いたhistone acethyltransferase-1 (Hat1)の機能解析. (2008)
  • 著者名/発表者名: 高見恭成, 中山建男
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会、第81回日本生化学会大会、合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] ニワトリDT40細胞を用いたhistone acethyltransferase-1(Hatl)の機能解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: Hirak Kumar Barman, 高見恭成、中山建男
  • 学会等名: 平成20年度日本生化学会九州支部例会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] ニワトリDT40細胞を用いたhistone acethyltransferase-1 (Hatl)の機能解析. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hirak Kumar Barman, 高見恭成, 中山建男
  • 学会等名: 平成20年度日本生化学会九州支部例会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] DT40細胞を用いた遺伝子ノックアウト法によるGCN5の機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦、高見恭成、中山建男
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会、第80回日本生化学会大会、合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-13
• [学会発表] DT40細胞を用いたASF1の機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 高見恭成、中山建男
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会、第80回日本生化学会大会、合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-12
• [学会発表] DT40細胞を用いた遺伝子ノックアウト法によるGCN5の機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 菊池秀彦、高見恭成、中山建男
  • 学会等名: 日本生化学会九州支部例会
  • 発表場所: 宮崎
  • 年月日: 2007-05-20
• [学会発表] 脱脂粉乳を利用した新規味噌の機能性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 六車三治男、伊藤瑞奈、河原聡、丸山眞杉、中山建男、久寿米木一裕、菱沼毅、中村豊郎
  • 学会等名: 日本生化学会九州支部例会
  • 発表場所: 宮崎
  • 年月日: 2007-05-20
• [図書] Studies on epigenetic control of B cell functions using the DT40 cell line.(Advances in Genetics Research Vol.2) (2010)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, H., Barman, H.K., Nakayama, M., Takami, Y., Nakayama, T.
  • 出版者: Nova Science Publishers, Inc. NY
• [図書] Advances in Genetics Research vol.2 (2010)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi H
  • 出版者: Nova Science Publishers
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.med.miyazaki-u.ac.jp/2bio/index.html
• [産業財産権] レチノイン酸効果増強剤およびこれを用いたリンパ腫治療剤キット、並びに、活性酸素産生促進剤およびこれを用いた免疫賦活剤 (2010)
  • 発明者名: 菊池秀彦、木脇直美、中山建男
  • 権利者名: 宮崎大学
  • 産業財産権番号: 2010-059734
  • 出願年月日: 2010-03-16