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COMP断片化とMMP活性に基づく、関節疾患の分子病態学的研究

研究課題

研究課題/領域番号 19380178
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 臨床獣医学
研究機関鹿児島大学

研究代表者

三角 一浩  鹿児島大学, 農学部, 教授 (10291551)

研究分担者 藤木 誠  鹿児島大学, 農学部, 准教授 (60305167)
上村 亮三  鹿児島大学, フロンティアサイエンス研究推進センター, 准教授 (30253884)
瀬戸山 健太郎  鹿児島大学, フロンティアサイエンス研究推進センター, 助教 (00372805)
研究期間 (年度) 2007 – 2009
研究課題ステータス 完了 (2009年度)
配分額 *注記
20,670千円 (直接経費: 15,900千円、間接経費: 4,770千円)
2009年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
2008年度: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円)
2007年度: 15,080千円 (直接経費: 11,600千円、間接経費: 3,480千円)
キーワード変形性関節症 / 関節リウマチ / 細胞外マトリックス / 診断マーカー / 軟骨 / 滑膜 / 関節症 / 腫瘍
研究概要

[研究1]馬の滑液および血清中COMP測定のためのサンドイッチELISA法の確立_馬の関節軟骨主来のCOMPに対する複数のモノクローナル抗体についてエピトープマッピングを行うとともに、それらを組合せてsandwich ELISAによるCOMP測定系を検討した。mAb2A11を固層化抗体として用い、mAb11F10をビオチン化抗体として用いる直接sandwich法(SE)を確立し、関節症(OA)馬と健常馬より採取した滑液および血清を用いて、COMPを定量し、従来法(inhibiion法、IE)と比較した。SE法ではOA馬の血清COMP値も健常馬群と比較して有意に高い値を示した一方で、IE法では血清COMP濃度に両群間で有意差はなかった。SE法による滑液および血清中のCOMP濃度は、mAb11F10を用いたときのIE法の結果と高い相関を示した。新しく確立したsandwich ELISA法は滑液および血清中のCOMP濃度の測定法として高い信頼性を持ち、特に血清のような非特異的な影響の大きい検体に対してもinhibition ELISA法に比べより高い特異性を示すことが明らかとなった。
[研究2]SKGマウスの免疫介在性関節炎の進行を予測する分子マーカーの検討_6週齢のSKGおよびBALB/cマウスを用いて、ラミナリンで誘導される関節炎の進行に伴うCOMPとマトリクスメタロプロテイナーゼ(MMP)-3の血中濃度の推移を検討した。SKGマウスでは、希釈血漿中のMMP-3は関節炎の臨床スコアの悪化と正の相関を示した。一方、希釈血漿中のCOMP濃度は、臨床症状の進行を反映しなかった。安楽死によって得た血清中のCOMPおよびMMP-3濃度はいずれも、対照群であるBALB/cと比較して有意に高い値を示した。COMPおよびMMP-3の血清レベルはいずれも関節炎マウスで上昇するけれども、同一個体から繰り返し採血して測定値を得るには適さない。一方、MMP-3濃度は希釈血漿を用いた場合においても、SKGマウスにおける関節炎の進行を表わす客観的な分子マーカーであることを明らかにした。

報告書

(4件)
  • 2009 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2008 実績報告書
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (17件)

すべて 2009 2008 2007

すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 8件) 学会発表 (9件)

  • [雑誌論文] Sandwich ELISA system for cartilage oligomeric matrix protein in equine synovial fluid and serum.2009

    • 著者名/発表者名
      Yamanokuchi K, Tagami M, Nishimatsu E, Shimizu Y, Hirose Y, Komatsu K, Misumi K
    • 雑誌名

      Equine Vet. J 41

      ページ: 41-46

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Gene and protein expression of cartilage oligomeric matrix protein associated with oncogenesis in canine tumors.2009

    • 著者名/発表者名
      Yamanokuchi K, Yabuki A, Yoshimoto Y, Arai K, Fujiki M, Misumi K
    • 雑誌名

      J. Vet. Med. Sci 71

      ページ: 499-503

    • NAID

      130000134354

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Gene and protein expression of cartilage oligomeric matrix protein associated with oncogenesis in canine tumors2009

    • 著者名/発表者名
      Yamanokuchi K, Yabuki A, Yoshimoto Y, Arai K, Fujiki M, Misumi, K
    • 雑誌名

      Journal of Veterinary Medical Science 71

      ページ: 499-503

    • NAID

      130000134354

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sandwich ELISA system for cartilage oligomeric matrix protein in equine synovial fluid and serum.2009

    • 著者名/発表者名
      Yamanokuchi K, Tagami M, Nishimatsu E, Shimizu Y, Hirose Y, Komatsu K, Misumi, K.
    • 雑誌名

      Equine Veterinary Journal 41

      ページ: 41-46

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Gene and protein expression of cartilage oligomeric matrix protein associated with oncogenesis in canine tumors.2009

    • 著者名/発表者名
      Yamanokuchi K, Yabuki A, Yoshimoto Y, Arai K, Fujiki M, Misumi, K
    • 雑誌名

      Journal of Veterinary Medical Science 71(In press)

    • NAID

      130000134354

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Analysis of cartilage oligomeric matrix protein (COMP) in synovial fluid, serum and urine from 51 racehorses with carpalbone fracture.2008

    • 著者名/発表者名
      Arai K, Tagami M, Hatazoe T, Nishimatsu E, Shimizu Y, Fujiki M, Misumi K.
    • 雑誌名

      Journal of Veterinary Medical Science 70

      ページ: 915-921

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sandwich ELISA system for cartilage oligomeric matrix protein (COMP) in equine synovial fluid and serum2008

    • 著者名/発表者名
      Yamanokuchi K, Tagami M, Nishimatsu E, Shimizu Y, Hirose Y, Komatsu K, Misumi K.
    • 雑誌名

      Equine Veterinary Journal (印刷中)

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Analysis of cartilage oligomeric matrix protein (COMP) in synovial fluid, serum and urine from 51 racehorses with carpal bone fracture.2008

    • 著者名/発表者名
      Arai K, Tagami M, Nishimatsu E, Shimizu Y, Fujiki M, Misumi K.
    • 雑誌名

      Journal of Veterinary Medical Science (印刷中)

    • NAID

      110006946006

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 馬滑液中の cartilage derived retinoic acid sensitive protein(CD-RAP)/melanoma inhibitory activity(MIA)の測定2009

    • 著者名/発表者名
      坂本英一, 佐藤隆祐, 金善煕, 藤木誠, 三角一浩
    • 学会等名
      第22回日本ウマ科学会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2009-11-30
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 免疫電子顕微鏡的手法を用いた犬の乳腺腫瘍細胞で産生される Cartilage oligomeric matrix protein の検討2009

    • 著者名/発表者名
      山之口和人, 矢吹映, 藤木誠, 三角一浩
    • 学会等名
      第148回日本獣医学会
    • 発表場所
      鳥取
    • 年月日
      2009-09-26
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 馬滑液中のcartilage derived retinoic acid sensitive protein / melanoma inhibitory activity (MIA)の測定2009

    • 著者名/発表者名
      坂本英一, 佐藤隆祐, 金善煕, 藤木誠, 三角一浩
    • 学会等名
      第22回日本ウマ科学会於
    • 発表場所
      東京(CD-RAP)
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] 免疫電子顕微鏡的手法を用いた犬の乳腺腫瘍細胞で産生されるCartilage oligomeric matrix proteinの検討2009

    • 著者名/発表者名
      山之口和人, 矢吹映, 藤木誠, 三角一浩
    • 学会等名
      第148回日本獣医学会於
    • 発表場所
      鳥取
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] モデル動物を用いた反応性関節炎における軟骨基質分子マーカーの変化2008

    • 著者名/発表者名
      金城亜紀子, 宇都直子, 瀬戸山健太郎, 新井恒, 三角一浩
    • 学会等名
      第145回日本獣医学会
    • 発表場所
      宮崎
    • 年月日
      2008-09-26
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] モデル動物を用いた反応性関節炎における軟骨基質分子マーカーの変化2008

    • 著者名/発表者名
      金城亜紀子, 宇都直子, 瀬戸山健太郎, 新井恒, 三角一浩
    • 学会等名
      第146回日本獣医学会於
    • 発表場所
      宮崎
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] ウマの滑液および血清中のcartilage oligomeric matrix protein (COMP)定量のためのSandwich ELISA法の開発2007

    • 著者名/発表者名
      山之口和人, 広瀬遥子, 田上正明, 三角一浩
    • 学会等名
      第20回日本ウマ科学会
    • 発表場所
      東京(東京大学)
    • 年月日
      2007-11-26
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 競走馬の手根関節内骨折43症例における滑液・血清・尿中cartilage oligomeric matrix protein (COMP)の評価2007

    • 著者名/発表者名
      新井 恒, 田上正明, 藤木 誠, 三角一浩
    • 学会等名
      第144回日本獣医学会
    • 発表場所
      北海道(酪農学園大学)
    • 年月日
      2007-09-02
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] ウマの滑液および血清中のcartilage oligomeric matrix protein (COMP)定量のためのSandwich ELISA法の開発2007

    • 著者名/発表者名
      山之口和人, 広瀬遥子, 田上正明, 三角一浩
    • 学会等名
      第20回日本ウマ科学会於
    • 発表場所
      東京大
    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書

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公開日: 2007-04-01   更新日: 2016-04-21  

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