巨核球の分化・成熟に関与する転写因子群の機能解析と血小板減少症モデルマウスの作成

• 研究課題/領域番号: 19390022
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 土井 健史 大阪大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (00211409)
• 研究分担者: 岡田 欣晃 大阪大学, 大学院・薬学研究科, 助教 (50444500) ; 仲野 徹 大阪大学, 大学院・生命機能研究科, 教授 (00172370)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 18,850千円 (直接経費: 14,500千円、間接経費: 4,350千円); 2009年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2008年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2007年度: 10,530千円 (直接経費: 8,100千円、間接経費: 2,430千円)
• キーワード: 血小板 / 遺伝子発現制御 / 分化 / RUNX1 / 転写因子 / 巨核球 / ES細胞 / Hprt ターゲティング法 / OP9

研究概要

造血幹細胞から血小板が産生される分化メカニズムを明らかにするために、家族性血小板減少症に関連するRUNX1遺伝子の解析を行った。その結果、RUNX1は血小板系列特異的に発現するPF4遺伝子のプロモーターに結合し、ETS-1、FLI-1と協調的にPF4を活性化した。しかし、血小板減少症患者に見られるRUNX1変異体は、プロモーターを活性化できなかった。そこで、生理的条件下の正常型、変異型RUNX1の機能を評価し、モデルマウス作製へと応用するため血小板系列特異的に外来遺伝子を強制発現できるES細胞分化系を構築した。

研究成果

• [雑誌論文] in vitroとin vivoで異なるレポータージーンアッセイの結果 (2010)
  • 著者名/発表者名: 岡田欣晃、土井健史
  • 雑誌名: 生産と技術 62巻 ページ: 51-56
  • NAID: 40017231022
• [雑誌論文] Metastable primordial germ cell-like state induced from mouse embryonic stem cells by Akt activation (2010)
  • 著者名/発表者名: N. Yamano, T. Kimura, S. Watanabe-Kushima, T. Shinohara, T. Nakano
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun Vol.392 ページ: 311-316
  • 査読あり
• [雑誌論文] in vitroとin vivoで異なるレポータージーンアッセイの結果 (2010)
  • 著者名/発表者名: 岡田欣晃
  • 雑誌名: 生産と技術 62 ページ: 51-56
  • NAID: 40017231022
• [雑誌論文] Metastable primordial germ cell-like state induced from mouse embryonic stem cells by Akt activation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Noriko Yamano
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 392 ページ: 311-316
  • 査読あり
• [雑誌論文] 血管内皮細胞の遺伝子発現制御研究からみたin vivoプロモーター解析の重要性 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岡田欣晃, 土井健史
  • 雑誌名: 生化学 80巻 ページ: 117-121
  • NAID: 10024915912
• [雑誌論文] Down's syndrome suppression of tumour growth and the role of the calcineurin inhibitor DSCR1 (2009)
  • 著者名/発表者名: K.H. Baek, A. Zaslavsky, R.C. Lynch, C. Britt, Y. Okada, R.J. Siarey, M.W. Lensch, I.H. Park, S.S. Yoon, T. Minami, J.R. Korenberg, J. Folkman, G.Q. Daley, W.C. Aird, Z. Galdzicki, S. Ryeom
  • 雑誌名: Nature Vol.459 ページ: 1126-1130
  • 査読あり
• [雑誌論文] A +220 GATA motif mediates basal but not endotoxin-repressible expression of the von Willebrand factor promoter in Hprt-targeted transgenic mice (2009)
  • 著者名/発表者名: J. Liu, Y. Kanki, Y. Okada, E. Jin, K. Yano, S.-C. Shih, T. Minami, W.C. Aird
  • 雑誌名: J. Thromb. Haemost Vol.284 ページ: 22195-22205
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential roles for ETS, CREB and EGR binding sites in mediating VEGF receptor 1 expression in vivo (2009)
  • 著者名/発表者名: E. Jin, J. Liu, J. Suehiro, L. Yaun, Y. Okada, V. Nikolova-Krstevski, K. Yano, L. Janes, D. Beeler, K. Spokes, E. Regan, S.C. Shih, P. Oettgen, T. Minami, W.C. Aird
  • 雑誌名: Blood Vol.114 ページ: 5557-5566
  • 査読あり
• [雑誌論文] Associations between PIWI proteins and TDRD1/MTR-1 are critical for integrated subcellular localization in murine male germ cell (2009)
  • 著者名/発表者名: K. Kojima, S. Kuramochi-Miyagawa, S. Chuma, T. Tanaka, N. Nakatsuji, T. Kimura, T. Nakano
  • 雑誌名: Genes. Cells Vol.14 ページ: 1155-1165
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increase of hematopoietic progenitor and suppression of endothelial gene expression by Runx1 expression during in vitro ES differentiation (2009)
  • 著者名/発表者名: E. Sakai, K. Kitajima, A. Sato, T. Nakano
  • 雑誌名: Exp. Hematol Vol.37 ページ: 334-345
  • 査読あり
• [雑誌論文] 血管内皮細胞の遺伝子発現制御研究からみたin vivoプロモーター解析の重要性 (2009)
  • 著者名/発表者名: 岡田欣晃
  • 雑誌名: 生化学 81 ページ: 117-121
  • NAID: 10024915912
• [雑誌論文] Down's syndrome suppression of tumour growth and the role of the calcineurin inhibitor DSCR1 (2009)
  • 著者名/発表者名: Kwan-Hyuck Baek
  • 雑誌名: Nature 459 ページ: 1126-1130
  • 査読あり
• [雑誌論文] A +220 GATA motif mediates basal but not endotoxin-repressible expression of the von Willebrand factor promoter in Hprt-targeted transgenic mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Ju Liu
  • 雑誌名: Journal of thrombosis and haemostasis 284 ページ: 22195-22205
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential roles for ETS, CREB and EGR binding sites in mediating VEGF receptor 1 expression in vivo (2009)
  • 著者名/発表者名: Enjing Jin
  • 雑誌名: Blood 114 ページ: 5557-5566
  • 査読あり
• [雑誌論文] Associations between PIWI proteins and TDRD1/MTR-1 are critical for integrated subcellular localization in murine male germ cell (2009)
  • 著者名/発表者名: Kanako Kojima
  • 雑誌名: Genes to Cells 14 ページ: 1155-1165
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increase of hematopoietic progenitor and suppression of endothelial gene expression by Runxl expression during in vitro ES differentiation (2009)
  • 著者名/発表者名: Eiko Sakai
  • 雑誌名: Experimental Hematology 37 ページ: 334-345
  • 査読あり
• [雑誌論文] A GABP-binding element in the Robo4 promoter is necessary for endothelial expression in vivo (2008)
  • 著者名/発表者名: Y. Okada, E. Jin, V. Nikolova-Krstevski, K. Yano, J. Liu, D. Beeler, K. Spokes, M. Kitayama, N. Funahashi, T. Doi, L. Janes, T. Minami, P. Oettgen, W.C. Aird
  • 雑誌名: Blood Vol.112 ページ: 2336-2339
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential context-dependent effects of friend of GATA-1 (FOG-1) on mast-cell development and differentiation (2008)
  • 著者名/発表者名: D. Sugiyama, M. Tanaka, K. Kitajima, J. Zheng, H. Yen, T. Murotani, A. Yamatodani, T. Nakano
  • 雑誌名: Blood Vol.111 ページ: 1924-1932
  • 査読あり
• [雑誌論文] A GABP-binding element in the Robo4 promoter is necessary for endothelial expression in vivo (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshiaki Okada
  • 雑誌名: Blood 112 ページ: 2336-2339
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Three-Kilobase Fragment of the Human Robo4 Promoter Directs Cell Type-Specific Expression in Endothelium (2007)
  • 著者名/発表者名: Y. Okada, K. Yano, E. Jin, N. Funahashi, M. Kitayama, T. Doi, K. Spokes, D.L. Beeler, S-C. Shih, H. Okada, T.A. Danilov, E. Maynard, T. Minami, P. Oettgen, W.C. Aird
  • 雑誌名: Circulation Research Vol.100 ページ: 1712-1722
  • 査読あり
• [雑誌論文] A three-kilobase fragment of the human Robo4 promoter directs cell type-specific expression in endothelium. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yoshiaki Okada
  • 雑誌名: Circulation Research 100(12) ページ: 1712-1722
  • 査読あり
• [学会発表] 家族性血小板減少症患者にみられる変異型RUNX1の機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 渡邊美穂, 米倉正哲, 仲井友子, 登治謙, 志水美己子, 岡田欣晃, 土井健史
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山桃太郎アリーナ(岡山県)
  • 年月日: 2010-03-30
• [学会発表] 51 ETSサイトを介するPF4遺伝子の発現制御メカニズムの解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 登治謙, 渡邊美穂, 米倉正哲, 志水美己子, 仲井友子, 岡田欣晃, 土井健史
  • 学会等名: 第8回次世代を担う若手ファーマバイオフォーラム2009
  • 発表場所: 名古屋市立大学田辺通キャンパス(愛知県)
  • 年月日: 2009-11-14
• [学会発表] -51 ETSサイトを介するPF4遺伝子の発現制御メカニズムの解明 (2009)
  • 著者名/発表者名: 登治謙
  • 学会等名: 第8回次世代を担う若手ファーマバイオフォーラム2009
  • 発表場所: 名古屋市立大学田辺通キャンパス(愛知県)
  • 年月日: 2009-11-14
• [学会発表] 血小板第4因子遺伝子の発現制御における-51 ETSサイトの役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 登治謙, 渡邊美穂, 米倉正哲, 岡田欣晃, 土井健史
  • 学会等名: 第10回Pharmaco-Hematologyシンポジウム
  • 発表場所: 日本薬学会長井記念ホール(東京都)
  • 年月日: 2009-06-19
• [学会発表] -51 ETSサイトを介する血小板第4因子遺伝子の発現制御機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 登治謙, 渡邊美穂, 米倉正哲, 岡田欣晃, 土井健史
  • 学会等名: 日本薬学会第129年会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
  • 年月日: 2009-03-26
• [学会発表] -51 ETSサイトを介する血小板第4因子遺伝子の発現制御機構の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 登 治謙
  • 学会等名: 日本薬学会 第129年会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
  • 年月日: 2009-03-26
• [学会発表] 家族性血小板減少症(FPD)に見られるRUNX1変異体を血小板系列特異的に発現するES細胞株の樹立 (2008)
  • 著者名/発表者名: 渡邊美穂, 北山美絵, 原敏郎, 米倉正哲, 登治謙, 山崎大典, William Aird, 北島健二, 仲野徹, 岡田欣晃, 土井健史
  • 学会等名: Biochemistry and Molecular Biology 2008
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2008-12-09
• [備考]
  • URL: http://www.phs.osaka-u.ac.jp/homepage/b018/
• [備考]
  • URL: http://www.phs.osaka-u.ac.jp/homepage/b018/