| 研究課題/領域番号 |
19390026
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 就実大学 |
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研究代表者 |
中西 徹 就実大学, 薬学部, 教授 (30243463)
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| 研究分担者 |
森 宏樹 就実大学, 薬学部, 助教 (40388989)
中島 利博 医療法人さわらび会福祉村病院長寿医学研究所, 研究員 (90260752)
浅沼 幹人 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (00273970)
新井 佑志 (新井 祐志) 京都府立医科大学, 医学部, 助教 (50347449)
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| 研究期間 (年度) |
2007 – 2009
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| 研究課題ステータス |
完了 (2009年度)
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| 配分額 *注記 |
18,850千円 (直接経費: 14,500千円、間接経費: 4,350千円)
2009年度: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円)
2008年度: 6,370千円 (直接経費: 4,900千円、間接経費: 1,470千円)
2007年度: 7,020千円 (直接経費: 5,400千円、間接経費: 1,620千円)
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| キーワード | CD81 / リウマチ / シノビオリン / 滑膜細胞 / DNAチップ |
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| 研究概要 |
(1)CD81を細胞表面に発現するヒト滑膜肉腫細胞SW982を用いて、様々な条件下で抗CD81抗体添加による刺激実験を行い、抗体刺激によってシノビオリンの発現が直接的に誘導されることを、定量PCRおよびシノビオリンプロモーターを有するレポーター遺伝子発現系によって明らかにした。また、細胞表面のCD81からシノビオリンの発現誘導に至るおけるシグナル伝達経路を解析し、MAPキナーゼERKの関与を示唆する結果を得た。
(2)関節炎モデルラットの関節組織にCD81のsiRNAを注入してCD81の発現を抑制することで病態の改善を試みる治療実験を行い、CD81分子の発現抑制に、炎症性サイトカインの抑制を上回る治療効果があることを確認した。さらにCD81の抑制によってシノビオリンの分布も抑制されることが免疫組織化学的に確認できた。(Biochem.Biophys.Res.Commun.388, 467-472, 2009)。
(3)国立成育センター宮戸室長より分与を受けたCD81ノックアウトマウスのヘテロ体を交配してホモ体を作製し解析を行った。その結果、ノックアウトマウスでは破骨細胞の形成や機能が亢進していることが明らかとなった。
(4)CD81を測定する早期リウマチ診断薬を開発するためCD81タンパクの細胞外領域を大腸菌で大量発現する試みを行った。その結果、GSTおよびHisタグを有する融合タンパク質としてCD81細胞外領域の大量発現に成功した。このタンパク質には若干の分解産物が混合しているため、さらに精製を進めている。またこのタンパク質を放射標識して、血中や関節液中のCD81を測定することでRAの早期診断が可能なキットの開発を進めている。
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