ヒト化モデルマウスを用いた次世代遺伝子治療法の開発:遺伝子修復による自己細胞再生

• 研究課題/領域番号: 19390285
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 原 寿郎 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (40150445)
• 研究分担者: 楠原 浩一 九州大学, 医学研究院, 准教授 (20243941) ; 高田 英俊 九州大学, 大学病院, 准教授 (70294931) ; 井原 健二 九州大学, 大学病院, 講師 (80294932) ; 中津 可道 九州大学, 医学研究院, 准教授 (00207820) ; 赤司 浩一 九州大学, 大学病院, 教授 (80380385)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 18,460千円 (直接経費: 14,200千円、間接経費: 4,260千円); 2009年度: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2008年度: 6,240千円 (直接経費: 4,800千円、間接経費: 1,440千円); 2007年度: 6,890千円 (直接経費: 5,300千円、間接経費: 1,590千円)
• キーワード: 遺伝子治療 / 原発性免疫不全症候群 / 伴性劣性無ガンマグロブリン血症 / アデノAAVハイブリッドベクター / NOD / SCID / γc完全欠失マウス / B細胞分化障害 / ベクター / ヒト化マウス

研究概要

BTK遺伝子のexon6～exon19領域、隣接遺伝子であるTIMM8Aの全遺伝子およびGFP-Hyg耐性遺伝子を搭載したHD-Ad.AAV.BTKベクターを作製した。同ベクターを男性pre-B ALL由来細胞株であるNalm6に感染させ、Hyg耐性株を得た。PCR法によりScreeningを行い、Southern blottingにより相同組換えを証明した。また正常男性ヒト臍帯血由来CD34陽性細胞に本ベクターを感染させ、ベクターゲノムのIntegrationを証明した。

研究成果

• [雑誌論文] T Cell Leukemia/Lymphoma 1 and Galectin-1 Regulate Survival/Cell Death Pathways in Human Naive and IgM+ Memory B Cells through Altering Balances in Bcl-2 Family Proteins (2009)
  • 著者名/発表者名: Tabrizi SJ, Niiro H, Masui M, Yoshimoto G, Iino T, Kikushige Y, Wakasaki T, Baba E, Shimoda S, Miyamoto T, Hara T, Akashi K
  • 雑誌名: J Immunol ページ: 1490-1499
• [雑誌論文] Molecular explanation for the contradiction between systemic Th17 defect and localized bacterial infection in 75kDa anti-BTK anti-b-Actin WT 1 9 15 23 34 44 46 50kDa 37kDa 1kb+ 1 9 15 23 34 44 46 WT A B 2000 bp 1650 bp hyper-IgE syndrome. (2009)
  • 著者名/発表者名: Minegishi Y, Saito M, Nagasawa M, Takada H, Hara T, Tsuchiya S, Agematsu K, Yamada M, Kawamura N, Ariga T, Tsuge I, Karasuyama H
  • 雑誌名: J Exp Med. 206 ページ: 1291-301
• [雑誌論文] FBP17 Mediates a Common Molecular Step in the Formation of Podosomes and Phagocytic Cups in Macrophages. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsuboi S, Takada H, Hara T, Mochizuki N, Funyu T, Saitoh H, Terayama Y, Yamaya K, Ohyama C, Nonoyama S, Ochs HD
  • 雑誌名: J Biol Chem. 284 ページ: 8548-56
• [雑誌論文] T Cell Leukemia/Lymphoma 1 and Galectin-1 Regulate Survival/Cell Death Pathways in Human Naive and IgM+ Memory B Cells through Altering Balances in Bcl-2 Family Proteins (2009)
  • 著者名/発表者名: Tabrizi SJ, et al.
  • 雑誌名: J Immunol 182 ページ: 1490-1499
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular explanation for the contradiction between systemic Th17 defect and localized bacterial infection in hyper-IgE syndrome. (2009)
  • 著者名/発表者名: Minegishi Y, et al.
  • 雑誌名: J Exp Med. 206 ページ: 1291-301
  • 査読あり
• [雑誌論文] FBP17 Mediates a Common Molecular Step in the Formation of Podosomes and Phagocytic Cups in Macrophages. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tsuboi S, et al.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 2009 284 ページ: 8548-56
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tell and Gal-1 regulate survival/cell death pathways in human naive and IgM+ memory B cells through altering balances in Bcl-2 family proteins. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tabrizi SJ, 他9名Hara T, Akashi K.
  • 雑誌名: J Immunol (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Insulin-like growth factor II : an autocrine growth factor modulating the apoptosis and maturation of erythroid progenitors in umbilical cord blood. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nagatomo T, Muta K, Ohga S, Ochiai M, Ohshima K, Hara T
  • 雑誌名: Exp Hematol 36 ページ: 401-411
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic analysis of MMP gene polymorphisms in patients with Kawasaki disease. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ikeda K, 他5名, Hara T
  • 雑誌名: Pediatr Res. 63 ページ: 182-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lipopolysaccharide-induced monocytic cell death for the diagnosis of mildneonatal-onset multisystem inflammatory disease (2008)
  • 著者名/発表者名: Takada H, 他6人, Hara T:
  • 雑誌名: J Pediatr (印刷中)
• [雑誌論文] H2-M3-restricted CD8+ T cells induced by peptide-pulsed dendritic cellsconfer protection against Mycobacterium tuberculosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Doi T, 他3人, Hara T, Yoshikai Y
  • 雑誌名: J Immunol. 178 ページ: 3806-3813
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dominant-negative mutations in the DNA-binding domain of STAT3 causehyper-IgE syndrome. (2007)
  • 著者名/発表者名: Minegishi Y, 他4人, Hara T, 他6人
  • 雑誌名: Nature 448 ページ: 1058-1062
  • 査読あり
• [学会発表] Rapid diagnostic system of primary immunodeficiency diseases in Japan (2009)
  • 著者名/発表者名: Hangzhou
  • 学会等名: Hara T The 5th ASPR
  • 発表場所: China
  • 年月日: 2009-05-22
• [学会発表] ヒト化マウスにおけるヒトB細胞解析と新規XLAマウスモデル確率への応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 土居岳彦、高田英俊、金兼弘和、宮脇利男、原寿郎
  • 学会等名: 第112回日本小児科学会
  • 発表場所: 奈良
• [学会発表] ヘルパー依存型アデノ・アデノ随伴ウイルスハイブリッドベクターを用いた相同組換えによるBTK遺伝子修復研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石村匡崇、落合正行、山元裕之、古和温子、土居岳彦、高田英俊、大賀正一、楠原浩一、中津可道、續輝久、相澤絵美、三谷幸之介、原寿郎
  • 学会等名: 第37回日本臨床免疫学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] ヘルパー依存型アデノ・アデノ随伴ウイルスハイブリッドベクターを用いた相同組換えによるBTK遺伝子修復研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石村匡崇、落合正行、山本裕之、古和温子、土居岳彦、高田英俊、大賀正一、楠原浩一、中津可道、續輝久、相澤絵美、三谷幸之介、原寿郎
  • 学会等名: 第51回日本小児血液学会・第25回日本小児がん学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] BTK gene repair by homologous recombination using helper-dependent adenovirus/adeno-associated virus hybrid vector. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishimura M, Doi T, Takada H, Ohga S, Hara T
  • 学会等名: 第39回日本免疫学会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Rapid diagnostic system of primary immunodeficiency diseases in Japan (2009)
  • 著者名/発表者名: T.Hara, et al.
  • 学会等名: The 5^<th> ASPR
  • 発表場所: Hangzhou, China
• [学会発表] 造血幹細胞移植後の免疫不全と感染 (2008)
  • 著者名/発表者名: 原 寿郎
  • 学会等名: 第29回日本造血細胞移植学会総会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 2008-02-17
• [学会発表] NEMO mutation as a cause of familial occurrence of female Bechet's disease patients. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hara T, Takada H.
  • 学会等名: XX International Congress of Genetics
  • 発表場所: Berlin, Germany
• [図書] 免疫疾患 (2010)
  • 著者名/発表者名: 寿郎
  • 出版者: 標準小児科学(印刷中)
• [図書] 免疫疾患 標準小児科学 第7版 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原寿郎(分担)
  • 出版者: 医学書院(印刷中)
• [図書] 免疫疾患、標準小児科学 (2009)
  • 著者名/発表者名: 原 寿郎(分担)
  • 出版者: 医学書院
• [図書] 今日の治療指針2008 (2008)
  • 著者名/発表者名: 原 寿郎(分担)
  • 出版者: 医学書院(印刷中)
• [備考] ホームページ等なし