肝臓ヒト化マウスの作製とその応用

• 研究課題/領域番号: 19390347
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 三浦 直行 浜松医科大学, 医学部, 教授 (40165965)
• 研究分担者: 上里 忠良 浜松医科大学, 医学部, 准教授 (40115465) ; 新村 和也 浜松医科大学, 医学部, 准教授 (40321880)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 18,980千円 (直接経費: 14,600千円、間接経費: 4,380千円); 2009年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2008年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2007年度: 9,880千円 (直接経費: 7,600千円、間接経費: 2,280千円)
• キーワード: ヒト肝細胞 / マウス / 肝細胞癌 / 化学発ガン / トランスジェニックマウス / 細胞移植 / 遺伝子導入 / レンチウィルス / 癌遺伝子 / 化学発癌 / レトロウィルス / トランスジェニックマエス / キメラマウス / 免疫不全マウス / アルプミン / 生体蛍光蛋白

研究概要

Alb-uPAトランスジェニックマウスに免疫不全scidマウスを交配し、Alb-uPAをトランスジーンにもつ免疫不全マウスを作製した。Alb-uPAホモ免疫不全マウスの生後3週目にヒト肝細胞を脾臓経由で移植すると4週後には、マウスの肝臓の50-100%がヒト肝細胞で置換されたマウスができた(肝臓ヒト化マウス)。肝臓ヒト化マウスに肝化学発癌剤であるジエチルニトロサミンとフェノバルビタールを投与すると、肝細胞腫(アデノーマ)が高頻度で発生した。腫瘍部のRNA解析では、c-Myc,FoxM1,c-Jun,c-Fos,Bmi1,Skp2mRNAが増加していることが判明した。

研究成果

• [雑誌論文] A unique expression pattern of Tbx10 in the hindbrain as revealed by Tbx10(lacZ ) allele. (2010)
  • 著者名/発表者名: Xue, X-D., Kimura W., Wang, B., Hikosaka, K., Itakura, T., Uezato, T., Matsuda, M., Koseki, H., Miura, N.
  • 雑誌名: Genesis 48 ページ: 295-302
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of Prox1 targets during in vitro vascular differentiation from embryonic stem cells: functional roles of HoxD8 in lymphangenesis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Harada, K., Yamazaki, T., Iwata, C., Yoshimatsu, Y., Sase, H., Mishima, K., Morishita, Y., Hirashima, M., Oike, Y., Suda, T., Miura, N., Watabe, T., Miyazone, K.
  • 雑誌名: J. Cell Sci 122 ページ: 3923-3930
  • 査読あり
• [雑誌論文] Organ-specific lymphangiectasia, arrested lymphatic sprouting, and maruration defects resulting from geene-targeting of the PI3K regulatory isoforms p85a, p55a and p50a. (2009)
  • 著者名/発表者名: Mouta-Bellum, C., Kirov, A., Micelli-Libby, L., Mancini, M.L., Petrova, T.V., Liaw, L., Prudovsky, I., Thorpe P.E., Miura, N., Cantley L.C., Alitaro, K., Fruman, D.A., Vary, C.P.H.
  • 雑誌名: Dev. Dyn 238 ページ: 2690-2699
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fecal COX-2 plus MMP-7 mRNAassays as a marker for colorectalcancer screening. (2009)
  • 著者名/発表者名: Takai, T., Kanaoka, S., Yoshida, K., Hamaya, Y., Ikuma, M., Miura, N., Sugimura, H., Kajimura, M., Hishida, A.
  • 雑誌名: Can. Epidemiol. Biomarkers Prev 18 ページ: 1888-1893
  • 査読あり
• [雑誌論文] Integrin-a9 is required for fibronectin matrix assembly during lymphatic valve morphogenesis. (2009)
  • 著者名/発表者名: Bazigou, E., Xie, S., Chan, C., Weston, A., Miura, N., Sorokin, L., Adams, R., Muro, A.F., Sheppard, D., Makinen, T.
  • 雑誌名: Dev. Cell 17 ページ: 175-186
  • 査読あり
• [雑誌論文] FOXC2 controls formation and maturation of lymphatic collecting vessels through cooperation with NFATc1. (2009)
  • 著者名/発表者名: Norrmen, C., Cheng, J., Miura, N. Puolakkainen, P., Yla-Herttuala, S., Alitaro, K., Petrove, T.V.
  • 雑誌名: J. Cell Biol 185 ページ: 439-457
  • 査読あり
• [雑誌論文] FOXC2 controls formation and maturation of lymphatic collecting vessels through cooperation with NFATc1 (2009)
  • 著者名/発表者名: Norrmen, C
  • 雑誌名: J.Cell Biol 185 ページ: 439-457
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fecal COX-2 plus MMP-7 mRNAassays as a marker for colorectalcancer screening (2009)
  • 著者名/発表者名: Takai, T.
  • 雑誌名: Can.Epidemiol.Biomarkers Prev 18 ページ: 1888-1893
  • 査読あり
• [雑誌論文] Integrin-a9 is required for fibronectin matrix assembly during lymphatic valve morphogenesis (2009)
  • 著者名/発表者名: Bazigou, E.
  • 雑誌名: Dev.Cell 17 ページ: 175-186
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutation analysis of FOXF2 in patients with disorders of sex development (DSD) in combination with cleft palate. (2008)
  • 著者名/発表者名: Jochumsen, U., Werner, R., Miura, N., Richter-Unruh, A., Hiort, O., Holterhus, P-M.
  • 雑誌名: Sex. Dev 2 ページ: 302-308
  • 査読あり
• [雑誌論文] The medaka FoxP2, a homologue of human language gene FOXP2, has a diverged structure and function. (2008)
  • 著者名/発表者名: Itakura, T., Chandra, A., Yang, Z., Xue, X-D., Wang, B., Kimura, W., Hikosaka, K., Inohaya, K., Kudo, A., Uezato, T., Miura, N.
  • 雑誌名: J. Biochem 143 ページ: 407-416
  • NAID: 10024908974
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutation analysis of FOXF2 in patients with disorders of sex development (DSD) in combination with cleft palate. (2008)
  • 著者名/発表者名: Jochumsen, U.
  • 雑誌名: Sex Dev. 2 ページ: 302-308
  • 査読あり
• [雑誌論文] The medaka FoxP2,a homologue of human language gene FOXP2,has adiverged structure and function (2008)
  • 著者名/発表者名: Itakura, T.
  • 雑誌名: J.Biochem. 143 ページ: 407-416
  • 査読あり
• [雑誌論文] 会話言語発達と遺伝子 (2008)
  • 著者名/発表者名: 三浦 直行
  • 雑誌名: 脳21 11 ページ: 30-38
• [雑誌論文] Mesenchyme Forkhead 1(FOXC2)plays a key role in metastasis and is associated with aggressive basal-like breast cancers (2007)
  • 著者名/発表者名: Mani, S.A.
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci.USA 104 ページ: 10069-10074
  • 査読あり
• [雑誌論文] The mouse forkhead gene Foxp2 modulates expression of the lung genes.
  • 著者名/発表者名: Yang, Z., Hikosaka, K., Sharkar M.T.K., Tamakoshi, T., Chandra, A., wang, B., Itakura T., Xue, X-D., Uezato, T., Kimura W., Miura, N.
  • 雑誌名: Life Sciences (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mesenchyme Forkhead 1 (FOXC2) plays a key role in metastasis and is associated with aggressive basal-like breast cancers. Proc.
  • 著者名/発表者名: Mani, S.A., Yang, J., Brooks, M., Schwaninger, G., Zhou, A., Miura, N., Kutok, J.L., Hartwell, K.H., Richardson, A.L., Weinberg, R.A.
  • 雑誌名: Natl. Acad. Sci. USA 104 ページ: 10069-10074
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fecal COX-2 plus MMP-7 mRNAassays as a marker for colorectal cancer screening.
  • 著者名/発表者名: Takai, T.
  • 雑誌名: Can. Epidemiol. Biomark. Prevent. (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] FOXC2 cotrols formation and maturation of lymphatic collecting vessels through cooperation with NFATc1.
  • 著者名/発表者名: Norrmen, C.
  • 雑誌名: J. Cell Biol. (印刷中)
  • 査読あり
• [学会発表] 心臓形成におけるIrx遺伝子の発現と役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三浦直行
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] 心臓形成におけるIrx遺伝子の発現と役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 三浦直行, 待井将志, ニシャットサルタナ, モハマドシャーカー, 木村航
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜(ワークショップ)
• [学会発表] マウスフォークヘッド遺伝子Foxp2は肺分化遺伝子の発現を制御する (2009)
  • 著者名/発表者名: 楊志, 彦坂圭介, 木村航, 上里忠良, 三浦直行
  • 学会等名: 第82回日本生化学会大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] マウスフォークヘッド遺伝子Foxp2は肺分化遺伝子の発現を制御する (2009)
  • 著者名/発表者名: 楊志, 彦坂圭介, 木村航, 上里忠良, 三浦直行
  • 学会等名: 第61回日本細胞生物学会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] 変異Rb蛋白を肝細胞に発現させると肝臓腫瘍を効率におこす (2008)
  • 著者名/発表者名: 王博, 福本和彦, 彦坂圭介, 三浦直行
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] The Tbx10 gene is expressed in the superior sulvatory nucleus in the medulla oblongata (2008)
  • 著者名/発表者名: 薛暁東, 木村航, 板倉達郎, 彦坂圭介, 三浦直行
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] The medaka FoxP2, a homologue of human language gene FOXP2, has a diverged structure and function. (2008)
  • 著者名/発表者名: 板倉達郎, 楊志, 薛暁東, 木村航, 彦坂圭介, 三浦直行
  • 学会等名: 第60回日本細胞生物学会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Tbx10遺伝子は上部唾液分泌神経の有用なマーカーである (2008)
  • 著者名/発表者名: 薛暁東, 彦坂圭介, 木村航, 三浦直行
  • 学会等名: 第41回日本発生生物学会
  • 発表場所: 徳島(ワークショップ)
• [学会発表] メダカFoxP2タンパクの発現と機能について (2007)
  • 著者名/発表者名: 板倉達郎, Abhishek Chandra, 楊志, 三浦直行
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Characterization of the N-terminal signal sequence of Neurogenesin-1 and its role in early bone development (2007)
  • 著者名/発表者名: Abhisheck Chandra, 板倉達郎, 三浦直行
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] フォークヘッド遺伝子Foxp2の肺と消化管における発現と機能について (2007)
  • 著者名/発表者名: 楊志, Abhisheck Chandra, 板倉達郎, 三浦直行
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] フォークヘッド遺伝子Foxj1の欠損により心臓大血管の左右は腹部臓器の左右とは独立に決定される (2007)
  • 著者名/発表者名: 三浦直行
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜(ワークショップ)
• [学会発表] Double axis formation in Xenopus laevis embryos by early perturbation just after insemination. (2007)
  • 著者名/発表者名: 佐藤英二, 柴田清, 藤江三千男, 呉一心, 上里忠良, 三浦直行
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Roles of the Foxj1 and Inv genes in the left-right determination of internal organs in mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Tomoki Tamakoshi, Tatsuo Itakura, Abhisheck Chandra, Tatsuhiko Yokoyama, Naoyuki Miura
  • 学会等名: 第40回日本発生生物学会・第59回日本細胞生物学会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] The Foxf2 gene controls murine gut development by limiting mesenchymal Wnt signaling and promoting extracellular matrix production. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tao Wang, Tomoki Tamakoshi, Peter Carlsson, Naoyuki Miura
  • 学会等名: 第40回日本発生生物学会・第59回日本細胞生物学会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] フォークヘッド遺伝子Foxf2の腸管における上皮-間葉相互作用について (2006)
  • 著者名/発表者名: 王滔, 玉越智樹, 薛暁東, 三浦直行
  • 学会等名: 日本分子生物学会フォーラム「分子生物学の未来」
  • 発表場所: 名古屋
• [図書] Chapter 88 Introduction to Forkhead (Fox) Genes, in "Inborn Errors of Development: Molecular basis of clinical disorders of morphogenesis" 2nd edition, (Eds. Epstein, CJ, Erickson, RP, Wynshaw-Boris A) (2008)
  • 著者名/発表者名: Miura, N., Xue, X-D., Itakura, T.
  • 出版者: Oxford University Press
• [図書] Inborn Errors of Development : Molecular basis of clinical disorders of morphogenesis, 2nd edition (2008)
  • 著者名/発表者名: Miura, N.
  • 出版者: Oxford University Press
• [図書] Inborn Errors of Development
  • 著者名/発表者名: Miura, N.
  • 総ページ数: 876
  • 出版者: Oxford University Press(印刷中)
• [備考]
  • URL: http://www2.hama-med.ac.jp/w1a/bio2/index-j.html
• [備考]
  • URL: http://www2.hama-med.ac.jp/wla/bio2/index-j.html
• [備考]
  • URL: http://www2.hama-med.ac.jp/w1a/bio2/index-j.html