未利用海産藻類に含まれる抗原性糖鎖の細胞性免疫活性とその利用

• 研究課題/領域番号: 19500701
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 食生活学
• 研究機関: くらしき作陽大学
• 研究代表者: 木村 万里子 くらしき作陽大学, 食文化学部, 准教授 (00351932)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2010年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2009年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2008年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2007年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 海藻 / 生理活性 / 抗原性 / 糖鎖 / サイトカイン / 未利用資源 / 糖タンパク質糖鎖 / 抗原性糖鎖 / 海藻糖タンパク質 / 糖鎖薬剤 / 機能性食品 / 糖鎖構造 / 海藻N-グリカン

研究概要

本研究課題では、未利用海産藻類糖タンパク質に結合するアスパラギン結合型糖鎖の化学構造を明らかにするとともに、免疫活性等の生理活性についての解析を行った。まず、褐藻類、緑藻類および紅藻類をミキサーで破砕後、ペプシン消化を行い、その消化物からゲルろ過とイオン交換により糖ペプチドを調製した。糖鎖をヒドラジン分解によりペプチドから遊離させ、還元末端を蛍光標識した後に高速液体クロマトグラフィー(HPLC)によって各々の化学構造を決定した。その結果、未利用海藻からは動植物に普遍的に存在するハイマンノース型糖鎖が多量に見出されたものの、陸生植物に特徴的なキシロース・フコース含有の糖鎖の存在は認められなかった。その一方、動植物由来の糖タンパク質糖鎖に対して作用する糖質分解酵素群に抵抗性を示す糖鎖の存在が示唆された。更に、ホンダワラから調製した糖ペプチド画分がヒト単球を活性化することが認められた。

研究成果

• [雑誌論文] N-Glycans linked to glycoproteins in edible beans : Natural resources for bioactive oligosaccharides. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kimura M., Hara T., Kimura Y.
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 75(1) ページ: 155-158
  • 査読あり
• [雑誌論文] N-Glycans linked to glycoproteins in edible beans : Natural Resources for bioactive oligosaccharides. (2011)
  • 著者名/発表者名: Mariko Kimura
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 巻: 75 ページ: 155-158
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intracellular and extracellular free N-glycans produced by plant cells : Occurrence of unusual plant complex-type free N-glycans in extracellular spaces. (2010)
  • 著者名/発表者名: Maeda M., Kimura M., Kimura Y.
  • 雑誌名: J.Biochem. 148(6) ページ: 681-692
  • NAID: 10027879797
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of royal jelly glyco-protein that carries unique complex type N-glycans harboring T-antigen(Galβ1-3GalNAc)unit. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kimura Y., Nagai H., Miyamoto M., Kimura M., Yonekura M.
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 74(10) ページ: 2148-2150
  • NAID: 10027560979
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intracellular and extracellular free N-glycans produced by plant cells : occurrence of unusual plant complex type free N-glycans in extracellular spaces. (2010)
  • 著者名/発表者名: Megumi Maeda
  • 雑誌名: J.Biochem. 巻: 148 ページ: 603-616
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of royal jelly glycoprotein that carries unique complex type N-glycans harboring T-antigen(Galβ1-3GalNAc)unit. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshinobu Kimura
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 巻: 74 ページ: 2148-2150
  • NAID: 10027560979
  • 査読あり
• [雑誌論文] Salt-adaptation of Tobacco BY2 cells induces change in glycoform of N-glycans. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kimura Y., Watanabe T., Kimura M., Maeada M., Murata Y., Fujiyama K.
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem 72 ページ: 514-522
  • 査読あり
• [雑誌論文] Salt-adaptation of Tobacco BY2 cells induces change in glycoform of N-glycans (2008)
  • 著者名/発表者名: Kimura, Y., Watanabe, T., Kimura, M., Maeada, M., Murata, Y., Fujiyama, K.
  • 雑誌名: Biosci. Biotechnol. Biochem 72 ページ: 514-522
  • 査読あり
• [雑誌論文] Salt-adaptation of Tobacco BY2 cells induces change in glycoform of N-glycans : Enhancement of exo-and endo-glycosidaseactivities by salt-adaptation. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kimura, Y., Watanabe, T., Kimura, M., Maeada, M., Murata, Y., Fujiyama, K.
  • 雑誌名: Biosci. Biotechnol. Biochem. 72 ページ: 514-522
  • 査読あり
• [雑誌論文] Salt-adaptation of Tobacco BY2 cells induces change in glycaform of N-glycans (2008)
  • 著者名/発表者名: Kimura, Y., Watanabe, T., Kimura. M., Maeada, M., Murata, Y., Fuiivama, K.
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem 72 ページ: 514-522
  • 査読あり
• [学会発表] Sppression of Endo-β-N-acetylglucosaminidase and Peptide : N-glycanase Activity in Arabidopsis thaliana (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeoka, Y., Sakamura, S., Fujiyama, K., Kimura, M., Kimura, Y.
  • 学会等名: 15th European Carbohydrate Symposium
  • 発表場所: Vienna(Austria)
  • 年月日: 2009-07-20
• [学会発表] A novel β1-3-galactosyltransferase involved in biosynthesis of honeybee N-glycan bearing T-antigen unit (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakamura, S., Kimura, M., Fujiyama, K., Kimura, Y.
  • 学会等名: 15th European Carbohydrate Symposium
  • 発表場所: Vienna(Austria)
  • 年月日: 2009-07-20
• [学会発表] A novel β1-3 galactosyltransferase involved in biosynthesis of honeybee N-glycan bearing T-antigen unit. (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakamura S., Kimura M., Fujiyama K., Okihara K., Hashimoto K., Yamada H., Kimura Y.
  • 学会等名: 15^<th> European Carbohydrate Symposium, Abstract p 487
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 2009-07-19
• [学会発表] Suppression of endo-β-N-acetyl-glucosaminidase and peptide : N-glycanase activity in Arabidopsis thaliana. (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeoka Y., Sakamuira S., Fujiyama K., Kimura M., Kimura Y.
  • 学会等名: 15^<th> European Carbo-hydrate Symposium, Abstract p 531
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 2009-07-19
• [学会発表] A novel β 1-3 galactosyltransferase involved in biosynthesis of honeybee N-glycan bearing T-antigen unit (2009)
  • 著者名/発表者名: Sakamura, S., Kimura, M., Fujiyama, K., Okihara, K., Hashimoto, K., Yamada, H., Kimura, Y.
  • 学会等名: 15^<th> European Carbohydrate Symposium, Abstract p487
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 2009-07-19
• [学会発表] Suppression of endo-β-N-acetyl-glucosaminidase and peptide : N-glycanase activity in Arabidopsis thaliana (2009)
  • 著者名/発表者名: Takeoka, Y., Sakamuira, S., Fujiyama, K., Kimura, M., Kimura, Y.
  • 学会等名: 15^<th> European Carbo- hydrate Symposium, Abstract p 531
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 2009-07-19
• [学会発表] 糖タンパク質薬剤開発に必要とされる有用糖ペプチドの多量調製法の確立 (2009)
  • 著者名/発表者名: 永井裕美,木村万里子,木村吉伸
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会(講演要旨集p323)
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 糖タンパク質薬剤開発に必要とされる有用糖ペプチドの多量調製法の確立 (2009)
  • 著者名/発表者名: 永井裕美, 木村万里子, 木村吉伸
  • 学会等名: 日本農芸化学会大会, 講演要旨集p323
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] Suppression of Endo-β-N-acetylglucosaminidase Activity in Arabidopsis thaliana and Tomato Plant. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, K., Takeoka, Y., Sakamura, S., Hosoi, K., Fujiyama, K., Kimura, M., Kimura, Y.
  • 学会等名: International Carbohydrate Symposium 2008
  • 発表場所: ノルウェー, オスロ
  • 年月日: 2008-07-28
• [学会発表] Suppression of Endo-β-N-acetyl glucosaminidase activity in Arabidopsis thaliana and Tomato Plant. (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakamura K., Takeoka Y., Sakamura S., Hosoi K., Fujiyama K., Kimura M., Kimura Y.
  • 学会等名: XXIV International Carbohydrate Symposium
  • 発表場所: Oslo, Norway
  • 年月日: 2008-07-27
• [学会発表] Suppression of Endo-β-N-acetyl glucosaminidase activity in Arabidopsis thaliana and Tomato Plant (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, K., Takeoka, Y., Sakamura, S., Hosoi, K., Fujiyama, K., Kimura, M., Kimura, Y.
  • 学会等名: XXIV International Carbohydrate Symposium
  • 発表場所: Oslo, Norway
  • 年月日: 2008-07-27
• [学会発表] 雑豆に含まれる糖タンパク質糖鎖の網羅的構造解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 原共紀、木村万里子、木村吉伸
  • 学会等名: 日本農芸化学会中四国支部例会
  • 発表場所: 徳島
• [学会発表] Processing pathway of N-glycan with T-antigen in Apis mellifera : Structural features of N-glycans synthesized in Apis Mellifera (2007)
  • 著者名/発表者名: Takayuki U., Mariko K., Yoichiro H., Kiyoshi O., Hiroyuki S., Hideo Y., Yoshinobu K.
  • 学会等名: XIX International Symposium on Glycoconjugates
  • 発表場所: Cairns, Australia
  • 年月日: 2007-07-19
• [学会発表] Identification of royal jelly glyco-protein bearing N-glycans with T-antigen unit. (2007)
  • 著者名/発表者名: Hiromi N., Mariko K., Kiyoshi O., Ken H., Hiroyuki S., Hideo Y., Masami Y., Yoshinobu K.
  • 学会等名: XIX International Symposium on Glycoconjugates
  • 発表場所: Cairns, Australia
  • 年月日: 2007-07-19
• [学会発表] Identification of royal jelly glyco-protein bearing N-glycans with T- antigen unit (2007)
  • 著者名/発表者名: Hiromi N., Mariko K., Kiyoshi O., Ken H., Hiroyuki S., Hideo Y., Masami Y., Yoshinobu K.
  • 学会等名: XIX International Symposium on Glycoconjugates
  • 発表場所: Cairns, Australia
  • 年月日: 2007-07-19
• [学会発表] Identification of royal jelly glycoprotein bearing N-glycans with Tantlgen unit (2007)
  • 著者名/発表者名: Hiromi N., Mariko K., Kiyoshi O., Ken H., Hiroyuki s., Hideo Y., Masami Y., Yoshinobu K
  • 学会等名: XIX International Symposium on Glycoconjugates
  • 発表場所: ケアンズ・オーストラリア
  • 年月日: 2007-07-17
• [学会発表] Processing pathway of N-glycan with T-antigen in Apis mellifera:Structural features of N-glycans synthesized in Apis mellifera (2007)
  • 著者名/発表者名: Takayuki U., Mariko K., Yoichiro H., Kiyoshi O., Hiroyuki S., Hideo Y., Yoshinobu K.
  • 学会等名: XIX International Symposium on Glycoconjugates
  • 発表場所: ケアンズ・オーストラリア
  • 年月日: 2007-07-17
• [学会発表] 雑豆に含まれる糖タンパク質糖鎖の網羅的構造解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 原 共紀、木村 万里子、木村 吉伸
  • 学会等名: 日本農芸化学会中四国支部例会
  • 発表場所: 徳島大学
  • 年月日: 2007-01-26
• [図書] 水産食品(魚介類・藻類) (「食べ物と健康」食品学・食品機能学・食品加工学(改訂版)) (2010)
  • 著者名/発表者名: 長澤治子,木村万里子, 他
  • 出版者: 医歯薬出版
• [図書] 食品学実験-基礎から応用まで-(改訂版) (2010)
  • 著者名/発表者名: 長澤治子,木村万里子, 他
  • 出版者: 青山社
• [図書] 「食べ物と健康」食品学・食品機能学・食品加工学 (改訂版) (2010)
  • 著者名/発表者名: 長澤治子, 木村万里子, 他
  • 出版者: 医歯薬出版
• [図書] 「食品学実験―基礎から応用まで―」(改訂版) (2010)
  • 著者名/発表者名: 長澤治子, 木村万里子, 他
  • 出版者: 青山社
• [図書] 食品学実験-基礎から応用まで (2007)
  • 著者名/発表者名: 長澤 治子、塩見 慎次郎, 額田 真喜子, 川口 洋、木村 万里子, 山本 奈美
  • 総ページ数: 227
  • 出版者: 青山社