凍結乾燥可能なDNA複合体の調製と固形製剤による新規遺伝子導入システムの創製

• 研究課題/領域番号: 19510119
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ナノ材料・ナノバイオサイエンス
• 研究機関: 大妻女子大学
• 研究代表者: 小山 義之 大妻女子大学, 家政学部, 教授 (00162090)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2008年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2007年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
• キーワード: 核酸 / ナノバイオ / バイオテクノロジー / 遺伝子治療 / 凍結乾燥 / 癌治療 / 非ウィルスベクター

研究概要

ヒアルロン酸でコートしたDNA/ポリカチオン複合体は、凍結乾燥後も活性が維持された。そこで、極低濃度で調製した微小な複合体を凍結乾燥し、少量の水を加えることで、これまで不可能とされていた極微小なDNA 複合体超微粒子の高濃度分散液の調製に成功した
GM-CSF遺伝子をコードしたプラスミドを用いて極微小な複合体を調製し、担癌マウスの腫瘍局所内に投与したところ、ほとんどのマウスで腫瘍の完全消失が見られた

研究成果

• [雑誌論文] Efficient in vivo Gene Transfection by Stable DNA/PEI Complexes Coated by Hyaluronic Acid (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ito, N. I.-Tanaka, Y. Koyama
  • 雑誌名: J. Drug Targeting 16 ページ: 276-281
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly efficient in vivo gene transfection by plasmid/PEI complexes coated by anionic PEG derivatives bearing carboxyl groups and RGD peptide (2008)
  • 著者名/発表者名: M. Sakae, T. Ito, C. Yoshihara, N. I.-Tanaka, H. Yanagie, M. Eriguchi, Y. Koyama
  • 雑誌名: Biomedicine & Pharmacotherapy 62 ページ: 448-453
  • 査読あり
• [雑誌論文] In Vitro Gene Delivery by pDNA/Chitosan Complexes Coated with Anionic PEG Derivatives that Have a Sugar Side Chain (2008)
  • 著者名/発表者名: M. Hashimoto, Y. Koyama, T. Sato
  • 雑誌名: Chem. Lett. 37 ページ: 266-267
  • NAID: 10021078166
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preparation of Fine DNA Particles and High Level Tumor-targeted In Vivo Gene Expression after Intravenous Injection (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ito, M. Otsuka, Y. Koyama
  • 雑誌名: Molecular Therapy 16
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient in vivo Gene Transfection by Stable DNA/PEI Complexes Coated by Hyaluronic Acid (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ito
  • 雑誌名: J. Drug Targeting 16 ページ: 276-281
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly efficient in vivo gene transfection by plasmid/PEI complexes coated by anionic PEG derivatives bearingcarboxyl groups and RGD peptide (2008)
  • 著者名/発表者名: M. Sakae
  • 雑誌名: Biomedicine & Pharmacotherapy 62 ページ: 448-453
  • 査読あり
• [雑誌論文] In Vitro Gene Delivery by pDNA/Chitosan Complexes Coated with Anionic PEG Derivative that Have a Sugar Side Chain (2008)
  • 著者名/発表者名: H. Hashimoto
  • 雑誌名: Chem. Lett. 37 ページ: 266-267
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient in vivo Gene Transfection by Stable DNA/PEI Complexes Coated by Hyaluronic Acid (2008)
  • 著者名/発表者名: Tomoko Ito
  • 雑誌名: Journal of Drug Targeting (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly efficient in vivo gene transfection by plasmid/PEI complexes coated by anionic PEG derivatives bearing carboxyl groups and RGD peptide (2008)
  • 著者名/発表者名: Mitsuko Sakae
  • 雑誌名: Biomedicine&Pharmacotherapy (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dissociation of DNA-polycation complexes by polyanions and polyampholytes (2007)
  • 著者名/発表者名: Chwen-Yang Shew
  • 雑誌名: Chemical Physics Letters 446 ページ: 59-64
  • 査読あり
• [学会発表] Preparation of Very Small Plasmid Complex Particles and Their Therapeutic Effects against Cancer (2009)
  • 著者名/発表者名: Y. Koyama, C. Yoshihara, K. Hamada, T. Ito
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Ventura (CA)
• [学会発表] Improve of transcription-and transfection efficiency by synthetic polyampholytes (2009)
  • 著者名/発表者名: polyampholytes, C. Yoshihara, T. Ito, C.-Y. Shew, Y. Koyama
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Ventura (CA)
• [学会発表] Analysis of the surface structure of DNA/polycation/hyaluronic acid ternary complex by Raman microscopy (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Ito, Y. Koyama, M. Otsuka
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Ventura (CA)
• [学会発表] 極微細なプラスミド複合体の調製とその治療効果 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小山義之, 濱田雄行, 伊藤智子, 芳原智恵子
  • 学会等名: アンチセンスシンポジウム
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] DNA/ポリカチオン/両性イオン高分子三元複合体の調製条件と転写活性との相関 (2009)
  • 著者名/発表者名: 芳原智恵子, C.-Y. Shew, 小山義之
  • 学会等名: アンチセンスシンポジウム
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] Preparation of Very Small Plasmid Complex Particles and Their Therapeutic Effects against Cancer (2009)
  • 著者名/発表者名: Y. Koyama, C. Yoshihara, K. Hamada, T. Ito
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Ventura (CA), USA
• [学会発表] Improve of transcription-and transfection efficiency by synthetic polyampholytes (2009)
  • 著者名/発表者名: C. Yoshihara, T. Ito, C. -Y. Shew, Y, Koyama
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Ventura (CA), USA
• [学会発表] Analysis of the surface structure of DNA/polycation/hyaluronic acid ternary complex by Raman microscopy (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Ito, Y. Koyama, M. Otsuka
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Ventura (CA), USA
• [学会発表] レーザーラマン顕微鏡によるDNA/ポリカチオン/ヒアルロン酸三元複合体の表面構造解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 伊藤智子, 小山義之, 大塚誠
  • 学会等名: 日本バイオマテリアル学会シンポジウム2008
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Improve of transcription- and transfection-efficiency by synthetic polyampholytes (2008)
  • 著者名/発表者名: C. Yoshihara, T. Ito, C.-Y. Shew, Y. Koyama
  • 学会等名: 国際核酸シンポジウム
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] DNA/ポリカチオン/ポリアニオン/両性イオン型高分子四元複合体による高発現遺伝子導入システム (2008)
  • 著者名/発表者名: 芳原智恵子, 伊藤智子, 小山義之
  • 学会等名: 第24回DDS学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 極微細なプラスミド複合体の調製とその治癒効果 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小山義之, 濱田雄行, 伊藤智子, 芳原智恵
  • 学会等名: 第24回DDS学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Preparation of Fine DNA Particles and High Level Tumor-targeted In Vivo Gene Expression after Intravenous Injection (2008)
  • 著者名/発表者名: Injection, T. Ito, M. Otsuka, Y. Koyama
  • 学会等名: アメリカ遺伝子治療学会
  • 発表場所: Boston (MA)
• [学会発表] 合成両イオン型高分子による転写・翻訳促進機構 (2008)
  • 著者名/発表者名: 芳原智恵子, 伊藤智子, 小山義之
  • 学会等名: 第9回遺伝子・デリバリー研究会シンポジウム
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 極微細なプラスミド複合体の調製とその治療効果 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小山義之, 清田雄行, 伊藤智子, 芳原智恵子
  • 学会等名: アンチセンスシンポジウム
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] DNA/ポリカチオン/両性イオン高分子三元複合体の調製条件と転写活性との相関 (2008)
  • 著者名/発表者名: 芳原智恵子, C. -Y. Shew, 小山義之
  • 学会等名: アンチセンスシンポジウム
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] DNA/ポリカチオン/ポリアニオン/両性イオン型高分子四元複合体による高発現遺伝子導入システム (2008)
  • 著者名/発表者名: 芳原智恵子, 伊藤智子, 小山義之
  • 学会等名: 第24回日本DDS学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 極微細なプラスミド複合体の調製とその治癒効果 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小山義之, 濱田雄行, 伊藤智子, 芳原智恵子
  • 学会等名: 第24回日本DDS学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Preparation of Fine DNA Particles and High Level Tumor-targeted In Vivo Gene Expression after intravenous Injection (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ito
  • 学会等名: 11th Annual Meething of the American Society of Gene Therapy
  • 発表場所: Boston, Massachusetts. USA
• [学会発表] In Vivo Efficient Gene Expression by Freeze-Dried DNA Complexes Coated by Polyanions (2007)
  • 著者名/発表者名: Tomoko Ito, Keiko Abe, Naoko Iida-Tanaka, Yoshiyuki Koyama
  • 学会等名: American Society of Gene Therapy
  • 発表場所: シアトル、アメリカ合衆国
  • 年月日: 2007-06-02