OchreサプレッサーtRNAの調製とその遺伝暗号拡張への利用

• 研究課題/領域番号: 19550161
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生体関連化学
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 西川 一八 岐阜大学, 工学部, 教授 (60109262)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2008年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2007年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
• キーワード: バイオテクノロジー / 核酸・蛋白質・糖化学 / 生体認識・機能化学 / 遺伝暗号 / サプレッサー

研究概要

遺伝暗号表の拡張を目指して、UAA (Ochre)コドンに対応できるサプレッサーtRNA を調製し、生体外タンパク質合成系においてOchre コドン選択的に非天然アミノ酸をタンパク質に導入する方法を開発した。分子整形技術により調製したtRNA (ΨΨA)は期待通りのOchre サプレッサーとして機能したが、意外にも対照のtRNA (UΨA)も同様の挙動を示した。この結果は「ウォブル説」の再吟味も含め、さらなる検討の必要性を示唆する。

研究成果

• [雑誌論文] Site-selective post-translational modification of proteins using an unnatural amino acid (2007)
  • 著者名/発表者名: S. Ohno, M. Matsui, T. Yokogawa, M. Nakamura, T. Hosoya, T. Hiramatsu, M. Suzuki, N. Hayashi, and K. Nishikawa
  • 雑誌名: 3-azidotyrosine. J. Biochem 141 ページ: 335-343
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural basis for recognition of cognate tRNA by tyrosyl-tRNA synthetase from three kingdoms (2007)
  • 著者名/発表者名: M. Tsunoda, Y. Kusakabe, N. Tanaka, S. Ohno, M. Nakamura, T. Senda, T. Moriguchi, N. Asai, M. Sekine, T. Yokogawa, K. Nishikawa, and K. T. Nakamura
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res 35 ページ: 4289-4300
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extremely thermophilic translation system in the common ancestor commonote : ancestral mutants of glycyl-tRNA synthetase from the extreme thermophile Thermus thermophilus (2007)
  • 著者名/発表者名: H. Shimizu, S.-i. Yokobori, T. Ohkuri, T. Yokogawa, K. Nishikawa and A. Yamagishi
  • 雑誌名: J. Mol. Biol 369 ページ: 1060-1069
  • 査読あり
• [雑誌論文] Site-selective post-translational modification of proteins using an unnatural amino acid, 3-azidotyrosine. (2007)
  • 著者名/発表者名: S. Ohno, M. Matsui, T. Yokogawa, M. Nakamura, T. Hosoya, T. Hiramatsu, M. Suzuki, N. Hayashi, and K. Nishikawa
  • 雑誌名: J. Biochem. 141 ページ: 335-343
  • NAID: 10020100554
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural basis for recognition of cognate tRNA by tyrosyl-tRNA synthetase from three kingdoms. (2007)
  • 著者名/発表者名: M. Tsunoda, Y. Kusakabe, N. Tanaka, S. Ohno, M. Nakamura, T. Senda, T. Moriguchi, N. Asai, M. Sekine, T. Yokogawa, K. Nishikawa, and K.T.Nakamura
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 35 ページ: 4289-4300
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extremely thermophilic translation system in the common ancestor commonote: ancestral mutants of glycyl-tRNA synthetase from the extreme thermophile Thermw thermophilus. (2007)
  • 著者名/発表者名: H. Shimizu, S.-i. Yokobori, T. Ohkuri, T. Yokogawa, K. Nishikawa and A. Yamagishi
  • 雑誌名: J. Mol. Biol. 369 ページ: 1060-1069
  • 査読あり