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スフィンゴミエリン代謝系酵素の構造および細胞生物学的な解析

研究課題

研究課題/領域番号 19570113
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 構造生物化学
研究機関徳島文理大学

研究代表者

津下 英明  徳島文理大学, 健康科学研究所, 教授 (40299342)

研究分担者 勝沼 信彦  徳島文理大学, 健康科学研究所, 教授 (50035375)
小田 真隆  徳島文理大学, 薬学部, 助教 (00412403)
櫻井 純 (桜井 純)  徳島文理大学, 薬学部, 教授 (80029800)
研究期間 (年度) 2007 – 2008
研究課題ステータス 完了 (2008年度)
配分額 *注記
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2008年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2007年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
キーワード構造生物学 / スフィンゴミエリン代謝酵素 / スフィンゴシンキナーゼ / スフィンゴミエリン代謝系酵素 / スフィンゴミエリナーゼ / スフィンゴシン1リン酸 / 巻き戻し / 結晶化 / 結晶構造解析 / 局在化
研究概要

スフィンゴシン1リン酸(S1P)は、シグナル伝達分子として重要な作用を持つ。このS1P を作る酵素ヒトスフィンゴシンキナーゼ(SPHK1)の結晶構造解析を最終目標に発現、結晶化を目指す。大腸菌と蚕での発現の検討の結果、His tagged SPHK1 のインクルージョンボディからの巻き戻しを行い、0.1M のアルギニン存在下で活性を持った酵素を大量に精製した。しかしオリゴマーを取る事から巻き戻しが十分とは考えられず、この酵素から結晶化を行ったが回折を得られる結晶は得られていない。また細胞内でのSPHK1 結合タンパク質の解析を行っており、新規の結果が得られつつある。

報告書

(3件)
  • 2008 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (51件)

すべて 2009 2008 2007 その他

すべて 雑誌論文 (22件) (うち査読あり 22件) 学会発表 (24件) 図書 (2件) 備考 (3件)

  • [雑誌論文] Structural basis of the influenza A virus RNA polymerase PB2 RNA-binding domain containing the pathogenicity-determinant lysine 627 residue2009

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kuzuhara T., Kise D. et al.
    • 雑誌名

      J Biol Chem 284-11

      ページ: 6855-6860

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystallization and X-ray diffraction analysis of RNA-primer/promoter-binding domain of influenza A virus RNA-dependent RNA polymerase PB22009

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kuzuhara T., Kise D. et al.
    • 雑誌名

      Acta Crystallographica sect F Struct Biol Cryst Commun 1-65

      ページ: 144-146

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structural basis of the influenza A virus RNA polymerase PB2 RNA-binding domain containing the pathogenicity-determinant lysine 627 residue.2009

    • 著者名/発表者名
      Kuzuhara T., Tsuge H., 等
    • 雑誌名

      J Biol Chem. 284-11

      ページ: 6855-6860

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystallization and X-ray diffraction analysis of RNA-primer/promoter-binding domain of influenza A virus RNA-dependent RNA polymerase PB2.2009

    • 著者名/発表者名
      Kuzuhara T., Tsuge H., 等
    • 雑誌名

      Acta Crystallographica sect F Struct Biol Cryst Commun. 1-65

      ページ: 144-146

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure of the YdiC-family protein TTHB029 from Thermus thermophilus HB8:Structural relationship with peptidoglycan N-acetylglucosamine deacetylase2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Imagawa T. et al.
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun 367-3

      ページ: 535-541

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structure of 1-aspartate oxidase from the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus tokodaii2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Sakuraba H., Katunuma N. et al.
    • 雑誌名

      Biochim Biophys Acta 1784-3

      ページ: 563-571

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structural basis of actin recognition and arginine ADP-ribosylation by Clostridium perfringens iota-toxin2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Nagahama M., Oda M., Sakurai J. et al.
    • 雑誌名

      Proc Natl Acad Sci U.S.A. 105-21

      ページ: 7399-7404

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structure of an archaeal alanine:glyoxylate aminotransferase2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Katunuma N., Sakuraba H. et al.
    • 雑誌名

      Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 64-6

      ページ: 696-699

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structural analysis of human glutamine:fructose-6-phosphate amidotransferase, a key regulator in type 2 diabetes2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Nakaishi Y., Bando M. et al.
    • 雑誌名

      FEBS Lett 583-1

      ページ: 163-167

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Non-native alpha-helix formation in not necessary for folding of lipocalin:Comparison of burst-phase folding between tear lipocalin and beta-lactoglobulin2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Tsukamoto S., Yamashita T. et al.
    • 雑誌名

      Proteins (In press)

      ページ: 0-0

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structural basis of actin recognition and arginine ADP-ribosylation by Clostridium perfringens iota-toxin.2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Nagahama M., 等
    • 雑誌名

      Proc Natl Acad Sci U.S.A. 105-21

      ページ: 7399-7404

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structure of an archaeal alanine : glyoxylate aminotransferase.2008

    • 著者名/発表者名
      Sakuraba H., Tsuge H., 等
    • 雑誌名

      Acta Crystallogr D Biol Crystallogr. 64-6

      ページ: 696-699

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structural analysis of human glutamine : fructose-6-phosphate amidotransferase, a key regulator in type 2 diabetes.2008

    • 著者名/発表者名
      Nakaishi Y., Tsuge H., 等
    • 雑誌名

      FEBS Lett. 583-1

      ページ: 163-167

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Non-native alpha-helix formation in not necessary for folding of lipocalin : Comparison of burst-phase folding between tear lipocalin and beta-lactoglobulin.2008

    • 著者名/発表者名
      Tsukamoto S., Tsuge H., 等
    • 雑誌名

      Proteins. (In press)

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure of the YdiC-family protein TTHBO29 from Thermus thermophilus HB8:Structural relationship with peptidoglycan N-acetylglucosamine deacetylase2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Imagawa T., 等
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun 367-3

      ページ: 535-541

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Structure of l-aspartate oxidase from the hyperthermophilic archaeon Sulfblobus tokodaii2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Sakuraba H., 等
    • 雑誌名

      Biochim Biophys Acta 1784-3

      ページ: 563-571

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure of archaeal highly thermostable L-aspartate dehydrogenase/NAD/citrate ternary complex2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Yoneda K. et al.
    • 雑誌名

      FEBS Journal 274-16

      ページ: 4315-4325

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sequential aldol condensation catalyzed by hyperthermophilic 2-deoxy-d-ribose-5-phosphate aldolase2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Sakuraba H. et al.
    • 雑誌名

      Appl Environ Microbiol 73-22

      ページ: 7427-7434

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Human D-amino acid oxidase: an update and review2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kawazoe T. et al.
    • 雑誌名

      Chem Rec 7-5

      ページ: 305-315

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure of archaeal highly thermostable L-aspartate dehydrogenase/NAD/citrate ternary complex2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Yoneda K., 等
    • 雑誌名

      FEBS Journal 274-16

      ページ: 4315-4325

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sequential aldol condensation catalyzed by hyperthermophilic 2-deoxy-d-ribose-5-phosphate aldolase2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Sakuraba H., 等
    • 雑誌名

      Appl Environ Microbiol 73-22

      ページ: 7427-7434

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Human D-amino acid oxidase:an update and review2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kawazoe T., 等
    • 雑誌名

      Chem Rec 7-5

      ページ: 305-315

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 「X 線結晶構造解析と質量分析による生理活性タンパク質の構造機能相関の研究」『アルギニン特異的ADP リボシル化毒素とアクチン複合体のX線結晶構造解析』2009

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      第3 回学術フロンティアシンポジウム
    • 発表場所
      徳島文理大学徳島校(徳島市)
    • 年月日
      2009-02-28
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 「X線結晶構造解析と質量分析による生理活性タンパク質の構造機能相関の研究」『アルギニン特異的ADPリボシル化毒素とアクチン複合体のX線結晶構造解析』2009

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      第3回学術フロンティアシンポジウム
    • 発表場所
      徳島文理大学徳島校(徳島市)
    • 年月日
      2009-02-28
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] アルギニン特異的ADP リボシル化毒素とアクチン複合体のX線結晶構造解析2008

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      北海道大学生体高分子シンポジウム
    • 発表場所
      北海道大学(札幌市)
    • 年月日
      2008-12-19
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] アルギニン特異的ADPリボシル化毒素とアクチン複合体のX線結晶構造解析2008

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      北海道大学生体高分子シンポジウム
    • 発表場所
      北海道大学(北海道)
    • 年月日
      2008-12-19
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] -タンパク質・ペプチド研究の現状と展望-「アルギニン特異的ADP リボシル化毒素とアクチン複合体のX線結晶構造解析」2008

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      第18 回WS フォーラム 和光純薬工業(株)福岡営業所
    • 発表場所
      九州大学医系地区コラボセンター(福岡市)
    • 年月日
      2008-11-21
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] -タンパク質・ペプチド研究の現状と展望-「アルギニン特異的ADPリボシル化毒素とアクチン複合体のX線結晶構造解析」2008

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      第18回WSフォーラム和光純薬工業(株)福岡営業所
    • 発表場所
      九州大学医系地区コラボセンクー(福岡市)
    • 年月日
      2008-11-21
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 「X 線結晶構造解析と質量分析による生理活性タンパク質の構造機能相関の研究」『複合体タンパク質X 線結晶構造から見る酵素反応機能』2008

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      徳島文理大学・健康科学研究所・私学助成研究発表会
    • 発表場所
      徳島文理大学 徳島校(徳島市)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Aeromonas sobria セリンプロテアーゼの結晶構造解析2008

    • 著者名/発表者名
      津下英明, 宇都宮敬子 等
    • 学会等名
      日本生物物理学会第1 回中国四国支部大会
    • 発表場所
      高知大学朝倉キャンパス(高知市)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Novel Family of Diflavin Enzyme:Crystal Structure of Archaeal L-Proline Dehydrogenase and the Industrial Application2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H.
    • 学会等名
      BIT's 1^<st> Annual World Congress of ibio 2008
    • 発表場所
      New Century Grand Hotel Hangzhou, China
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Aeromonas sobriaセリンプロテアーゼの結晶構造構造解析2008

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      日本生物物理学会第1回中国四国支部大会
    • 発表場所
      高知大学朝倉キャンパス(高知市)
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] Novel Family of Diflavin Enzyme : Crystal Structure of Archaeal L-Proline Dehydrogenase and the Industrial Application.2008

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H.
    • 学会等名
      BIT's 1^<st> Annual World Congress of ibio 2008
    • 発表場所
      New Century Grand Hotel Hangzhou, China
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 「X線結晶構造解析と質量分析による生理活性タンパク質の構造機能相関の研究」『複合体タンパク質X線結晶構造から見る酵素反応機能』2008

    • 著者名/発表者名
      津下 英明
    • 学会等名
      徳島文理大学・健康科学研究所私学助成研究発表会
    • 発表場所
      徳島文理大学徳島校(徳島市)
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] ADP リボシル化酵素とフラビン酵素の構造機能相関2007

    • 著者名/発表者名
      津下英明
    • 学会等名
      第410 回ビタミンB 研究協議会
    • 発表場所
      京大会館(京都市)
    • 年月日
      2007-11-17
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] ADPリボシル化酵素とフラビン酵素の構造機能相関2007

    • 著者名/発表者名
      津下 英明
    • 学会等名
      第410回ビタミンB研究協議会
    • 発表場所
      京大会館(京都市)
    • 年月日
      2007-11-17
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Crystallographic Study of Human D-Amino Acid Oxidase:Structural Basis of D-DOPA Oxidation2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kawazoe T., Fukui K.
    • 学会等名
      THE 21^<st> SYMPOSIUM OF THE PROTEIN SOCIETY
    • 発表場所
      Boston, Massachusetts
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Substrate recognition of ADP-ribosylating toxins2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H.
    • 学会等名
      Brookhaven National Laboratory
    • 発表場所
      New York
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Crystal structure of the YdiC family protein TTHB029 from Thermus thermos thermophilus HB8 revealed structural similarity with peptidoglycan deacetylase2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Imagawa T. et al.
    • 学会等名
      ISDSB2007(The 2^<nd> International Symposium on Diffraction Structure Biology 2007)
    • 発表場所
      Tower Hall Funabori, Tokyo, Japan
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Crystal structure of Aeromonas sobria serine protease, prototype kexin/furin protease:the extra occluding domain regulates protein substarte specificity2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kobayashi H. et al.
    • 学会等名
      5^<th> General Meeting of the International Proteolysis Society(IPS2007)
    • 発表場所
      Patras, Greece
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] アルギニンADPリボシル化の毒素のアクチン認識分子機構2007

    • 著者名/発表者名
      津下英明, 小田真隆, 櫻井純 等
    • 学会等名
      第45 回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜会議センター(横浜市)
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Crystallographic Study of Human D-Amino Acid OXidase:Structural Basis of D-DOPA OXidation2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kawazoe T., Fukui K
    • 学会等名
      THE 21st SYMPOSIUM OF THE PROTEIN SOCIETY
    • 発表場所
      Boston,Massachusetts
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Substrate recognitio of ADP-ribosylating toxins2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H
    • 学会等名
      Brookhaven National Laboratory
    • 発表場所
      New York
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Crystal structure of the YdiC famiy protein TTHBO29 from Thermus the rmos thermophjlus HB8 revealed structural sirnilarity with peptidogly can deacetylase2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Imagawa T., 等
    • 学会等名
      ISDSB2007(The2nd International Symposium on Diffraction Structure Biology2007)
    • 発表場所
      Tower Hall Funabori,Tokyo,Japan
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Crystal structure of Aeromonas sobria serine protease,prototype kexin/furin protease:the extra occluding domain regUlates protein substarte specificity2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuge H., Kobayashi H., 等
    • 学会等名
      5th General Meeting of the International Proteolysis Society(IPS2007)
    • 発表場所
      Patras,Greece
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] アルギニンADPリボシル化の毒素のアクチン認識分子機構2007

    • 著者名/発表者名
      津下 英明、小田 真隆、櫻井 純, 等
    • 学会等名
      第45回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜会議センター(横浜市)
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [図書] 構造生物学-ポストゲノム時代のタンパク質研究-(倉光成紀, 杉山政則 編)2007

    • 著者名/発表者名
      津下英明 等
    • 総ページ数
      261
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [図書] 構造生物学-ポストゲノム時代のタンパク質研究2007

    • 著者名/発表者名
      倉光 成紀、杉山 政則編
    • 総ページ数
      261
    • 出版者
      共立出版
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [備考] ホームページ

    • URL

      http://inetsrv103.bunri-u.ac.jp/kenkou/

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [備考] ホームページ

    • URL

      http://inetsrv103.bunri-u.ac.jp/kenkou/

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://inetsrv103.bunri-u.ac.jp/kenkou/

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書

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公開日: 2007-04-01   更新日: 2016-04-21  

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