DNAメチル化酵素の構造と機能に関する研究

• 研究課題/領域番号: 19570130
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 末武 勲 大阪大学, 蛋白質研究所, 准教授 (80304054)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2008年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2007年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
• キーワード: DNAメチル化 / DNAメチルトランスフェラーゼ

研究概要

本研究では、ゲノムDNA上のメチル化模様の形成機構を生化学的に理解することを目指し、DNAメチル化酵素(Dnmt)の性質を再構成したヌクレオソームを基質にして詳細に試験管内で解析を行った。その結果、DNA上に新規なメチル化模様を書き込むタイプのDnmt3aは、ヌクレオソームの高次構造に依存したメチル化活性を示すという新たな知見が得られた

研究成果

• [雑誌論文] Abnormal DNA Methyltransferase Expression in Mouse Germline Stem Cells Results in Spermatogenic Defects (2009)
  • 著者名/発表者名: Takashima S, Takehashi M, Lee J, Chuma S, Okano M, Hata K, Suetake I, Nakatsuji N, Miyoshi H, Tajima S, Tanaka Y, Toyokuni S, Sasaki H, Kanatsu-Shinohara M, Shinohara T.
  • 雑誌名: Biol Reprod [Epub ahead of print]
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclin-dependent kinase-like 5 binds and phosphorylates DNA methyltransferase (2008)
  • 著者名/発表者名: Kameshita I, Sekiguchi M, Hamasaki D, Sugiyama Y, Hatano N, Suetake I, Tajima S, Sueyoshi N.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 377 ページ: 1162-1167
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mouse Dnmt3a preferentially methylates linker DNA and is inhibited by histone H1 (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshima H., Suetake I, and Tajima S.
  • 雑誌名: J. Mol. Biol 383 ページ: 810-821
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mouse Dnmt3a preferentially methylates linker DNA, and is inhibited by histone H1 (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshima, H., et al.
  • 雑誌名: J. Mol. Biol. 383 ページ: 810-821
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclin-dependent kinase-like 5 binds and phosphorylates DNA methyltra nsferase (2008)
  • 著者名/発表者名: Sekiguchi, M., et al.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 377 ページ: 1162-1167
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mouse Dnmt3a Preferentially Methylates Linker DNA, and is Inhibited by Histone H1. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshima, H.
  • 雑誌名: J. Mol. Biol. (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] The SRA protein Np95 mediates epigenetic inheritance by recruiting Dnmtl to methylated DNA. (2007)
  • 著者名/発表者名: Sharif J.
  • 雑誌名: Nature 450 ページ: 908-912
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recombinant To12 transposase with activity in Xenopus embryos. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shibano T.
  • 雑誌名: FEBS Lett. 581 ページ: 4333-4336
  • 査読あり
• [学会発表] Dnmt3a2とDnmt3aによる再構成ヌクレオソームDNAメチル化 活性の異同 (2008)
  • 著者名/発表者名: 末武勲、竹島秀幸、三島優一、田嶋正二
  • 学会等名: 第2回日本エピジェネティクス研究会年会
• [学会発表] ヒストンH3K9をメチル化修飾したヌクレオソームの再構成 (2007)
  • 著者名/発表者名: 三島優一
  • 学会等名: 生化学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-13
• [学会発表] 9番目のLys残基をメチル化修飾したヒストンH3の調製とそれを含む再構成ヌクレオソームの作製 (2007)
  • 著者名/発表者名: 三島優一、末武勲、田嶋正二
  • 学会等名: 第1回日本エピジェネティクス研究会年会
• [学会発表] ヒストンH3K9をメチル化修飾したヌクレオソームの再構成 (2007)
  • 著者名/発表者名: 三島優一、末武勲、渡辺真、川上徹、西村紀、相本三郎、田嶋正二
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会 合同大会
• [図書] 組換えタンパク質のデザインと発現たんぱく質をつくるー抽出・精製と(合成長谷俊治、高尾敏文高木淳一編) (2008)
  • 著者名/発表者名: 田嶋正二、末武勲
  • 出版者: 化学同人
• [図書] エピジェネティクス実験プロトコール、DNAメチル化酵素の活性測定 放射性化合物を用いた活性測定(牛島俊和、眞貝洋一 編) (2008)
  • 著者名/発表者名: 末武勲、田嶋正二
  • 出版者: 羊土社
• [図書] ゲノムDNAのメチル化修飾の形成と維持の機構、蛋白質核酸酵素6月号 (2008)
  • 著者名/発表者名: 末武勲、田嶋正二
  • 出版者: 共立出版
• [図書] ゲノムDNAのメチル化修飾の形成と維持の機構、蛋白質核酸酵素6月号 (2008)
  • 著者名/発表者名: 末武勲, 田嶋正二
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 共立出版
• [図書] 組換えタンパク質のデザインと発現、たんぱく質をつくる-抽出・精製と合成 (2008)
  • 著者名/発表者名: 田嶋正二, 末武勲
  • 総ページ数: 36
  • 出版者: 化学同人
• [図書] DNAメチル化酵素の活性測定 放射性化合物を用いた活性測定エピジェネティクス実験プロトコール (2008)
  • 著者名/発表者名: 末武勲, 田嶋正二
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 羊土社
• [図書] 酵素工学ニュース「脊椎動物におけるDNAのメチル化修飾とその制御」 (2007)
  • 著者名/発表者名: 田嶋正二
  • 総ページ数: 67
  • 出版者: 酵素工学研究会