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MCMヘリカーゼ複合体による染色体複製制御の酵素学的解析

研究課題

研究課題/領域番号 19570145
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 機能生物化学
研究機関(財)東京都医学研究機構

研究代表者

高井 裕子 (ZHIYING You)  財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 主任研究員 (90332270)

研究期間 (年度) 2007 – 2008
研究課題ステータス 完了 (2008年度)
配分額 *注記
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2008年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2007年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
キーワード酵素の作用機作と調節 / DNA複製 / MCMヘリカーゼ / Cdt1 / 複製フォーク / ATP結合活性 / ヘリカーゼとDNA結合活性 / Cdt1タンパク質 / MCM結合蛋白 / DnaB・DnaC複合体
研究概要

MCM複合体は複製フォークにおけるDNAヘリカーゼとして機能する。昨年度に、MCMのヘリカーゼ活性はCdt1と結合して複合体を形成しより強いヘリカーゼ活性を示すこと、さらにCdt1はATPに結合する可能性を見出した。本年度は、Cdt1配列上にATP結合タンパクとの相同配列を見出し、その保存配列の変異体を作製した。この変異体はin vitroでATP結合能をほぼ完全に消失していた。さらにこれと同じ変異がdrosophilaの発生異常の原因として同定されていることが明らかとなった。以上の事実はCdt1のATP結合は、その機能制御に重要な役割を果たすことを示す。

報告書

(3件)
  • 2008 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (14件)

すべて 2008 2007

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (9件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] Cdt1 forms a complex with the minichromosome maintenance protein (MCM) and activates its helicase activity2008

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You, Hisao Masai
    • 雑誌名

      J Biol. Chem. 283

      ページ: 24469-24477

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] MCMタンパク質のDNA複製における役割2007

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You, 正井 久雄
    • 雑誌名

      実験医学増刊号「染色体サイクル」 25

      ページ: 609-613

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] UVクロスリンキング法2007

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You, 正井 久雄
    • 雑誌名

      実験医学別册「分子間相互作用解析バンドブック」 19

      ページ: 164-167

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Cdt1 forms a complex with MCM and activates its helicase activity2008

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You and Hisao Masai
    • 学会等名
      EMBO Conference on "Replication & Segregation of Chromosomes"
    • 発表場所
      Geilo, Norway
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Interaction of Mcm complexes with Cdt1 protein : Effect of Cdt1 on Mcm helicase activity2008

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You and Hisao Masai
    • 学会等名
      6th 3R (Replication, Recombination, Repair) symposium
    • 発表場所
      Tsumagoi, Shizuoka
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] EBウィルス oriP上への無細胞系pre-RC構築2008

    • 著者名/発表者名
      森山賢治, 高井裕子, 正井久雄
    • 学会等名
      日本分子生物学会(BMB)2008
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] クランプローダー複合体とMCMサブ複合体の相互作用解析2008

    • 著者名/発表者名
      谷口莉菜, Zhiying You, 正井久雄, 釣本敏樹
    • 学会等名
      日本分子生物学会(BMB)2008
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書 2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Cdt1はMCMヘリカーゼと複合体を形成し,そのヘリカーゼ活性を促進する2008

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You
    • 学会等名
      第19回DNA複製・分配ワークショプ
    • 発表場所
      静岡県伊豆市・ラフォーレ修善寺
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Cdt1 forms a complex with MCM and activates its helicase activity2008

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You, Hisao Masai
    • 学会等名
      EMBO Conference on“Replication & Segregation of Chromosomes"
    • 発表場所
      Geilo, Norway
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] Interaction of Mcm complexes with Cdt1 protein : Effect of Cdt1 on Mcm helicase activity2008

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You, Hisao Masai
    • 学会等名
      3R (Replication, Recombination, Repair) symposium
    • 発表場所
      Tsumagoi, Shizuoka
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] EBウィルス oriP 上への無細胞系 pre-RC 構築2008

    • 著者名/発表者名
      森山賢治, 高井裕子, 正井久雄
    • 学会等名
      日本分子生物学会(BMB)2008
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] Cdt1はMCMヘリカーゼと複合体を形成し,そのヘリカーゼ活性を促進する2008

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You
    • 学会等名
      第19回DNA複製・分配ワークショプ
    • 発表場所
      静岡県伊豆市・ラフォーレ修善寺(oral)
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [図書] "MCMタンパク質のDNA複製における役割" 実験医学増刊号「染色体サイクル」252007

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You, 正井久雄
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [図書] UV クロスリンキング法" 実験医学別册「分子間相互作用解析バンドブック」192007

    • 著者名/発表者名
      Zhiying You, 正井久雄
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書

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公開日: 2007-04-01   更新日: 2021-04-07  

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