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ミニブタ体細胞核移植の成否を判定するための非侵襲的評価系の開発

研究課題

研究課題/領域番号 19580328
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用動物科学
研究機関鹿児島大学

研究代表者

三好 和睦  鹿児島大学, 農学部, 准教授 (70363611)

研究分担者 佐藤 正宏  鹿児島大学, フロンティアサイエンス研究推進センター, 教授 (30287099)
連携研究者 佐藤 正宏  鹿児島大学, フロンティアサイエンス研究推進センター, 教授 (30287099)
研究期間 (年度) 2007 – 2008
研究課題ステータス 完了 (2008年度)
配分額 *注記
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2008年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2007年度: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円)
キーワード体細胞クローニング / 核移植 / 遺伝子改変 / ミニブタ / Oct-3 / 4遺伝子
研究概要

除核卵子に体細胞核を移植すると、その遺伝子発現が受精卵と同じ状態にリプログラミングされ、正常な個体(体細胞クローン動物)に発生する。しかし、その作出効率は極めて低いことから、ほとんどの体細胞核においてはリプログラミングが不完全であると考えられる。本研究では、初期発生過程の細胞において特異的に発現するOct-3/4遺伝子を指標として、体細胞核におけるリプログラミングの状態を非侵襲的に判定する系を確立した。この系を用いることにより、体細胞クローン胚の作出法を最適化し、個体への発生率を改善することが可能となる。

報告書

(3件)
  • 2008 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (48件)

すべて 2009 2008 2007

すべて 雑誌論文 (17件) (うち査読あり 17件) 学会発表 (31件)

  • [雑誌論文] Effects of cycloheximide on parthenogenetic development of pig oocytes activated by ultrasound treatment2008

    • 著者名/発表者名
      Mori H, Mizobe Y, Inoue S, Uenohara A, Takeda M, Yoshida M, Miyoshi K
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development 54巻

      ページ: 364-369

    • NAID

      10024412377

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of demecolcine and sucrose on the incidence of cytoplasmic protrusions containing chromosomes in pig oocytes matured in vitro2008

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi K, Mori H, Yamamoto H, Kishimoto M, Yoshida M
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development 54巻

      ページ: 117-121

    • NAID

      10021218892

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Activation and parthenogenetic development of pig oocytes exposed to ultrasound in media containing different concentrations of Ca2+2008

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi K, Fujimoto Y, Mori H, Yoshida M
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development 54巻

      ページ: 42-45

    • NAID

      10021218462

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of demecolcine and sucrose on the incidence of cytoplasmic protrusions containing chromosomes in pig oocytes matured in vitro2008

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi K
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development 54

      ページ: 117-121

    • NAID

      10021218892

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of cycloheximide on parthenogenetic development of pig oocytes activated by ultrasound treatment2008

    • 著者名/発表者名
      Mori H
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development 54

      ページ: 364-369

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cre-loxP system as a versatile tool for conferring increased levels of tissue-specific gene expression from a weak promoter2008

    • 著者名/発表者名
      Nakamura S
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development 75

      ページ: 1085-1093

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Production and characterization of transgenic mice systemically expressing endo-β-galactosidase C2008

    • 著者名/発表者名
      Watanabe S
    • 雑誌名

      Glycobiology 18

      ページ: 9-19

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Rapid zygosity determination in mice by SYBR Green real-time genomic PCR of a crude DNA solution2008

    • 著者名/発表者名
      Sakurai T
    • 雑誌名

      Transgenic Research 17

      ページ: 149-155

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Embryonic stem cells deficient in I β1, 6-N-acetylglucosaminyl transferase exhibit reduced expression of embryoglycan and the loss of a Lewis X antigen, 4C92008

    • 著者名/発表者名
      Muramatsu H
    • 雑誌名

      Glycobiology 18

      ページ: 242-249

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Activation and parthenogenetic development of pig oocytes exposed toultrasound in media containing different concentrations of Ca^<2+>2008

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi K
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development 54

      ページ: 42-45

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effects of demecolcine and sucrose on the incidence of cytoplasmic protrusions containing chromosomes in pig oocytes matured in vitro2008

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi K
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development (印刷中)

    • NAID

      10021218892

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cre-loxP system as a versatile tool for conferring increased levels of tissue-specific gene expression from a weak promoter2008

    • 著者名/発表者名
      Nakamura S
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development (印刷中)

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient transfection of primarily cultured porcine embryonic fibroblasts using the Amaxa Nucleofection SystemTM2007

    • 著者名/発表者名
      Nakayama A, Sato M, Shinohara M, Matsubara S, Yokomine T, Akasaka E, Yoshida M, Takao S
    • 雑誌名

      Cloning and Stem Cells 9巻

      ページ: 523-534

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Birth of cloned miniature pigs derived from somatic cell nuclear transferred embryos activated by ultrasound treatment2007

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi K, Inoue S, Himaki T, Mikawa S, Yoshida M
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development 74巻

      ページ: 1568-1574

    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Birth of cloned miniature pigs derived from somatic cell nuclear transferred embryos activated by ultrasound treatment2007

    • 著者名/発表者名
      Miyoshi K
    • 雑誌名

      Molecular Reproduction and Development 74

      ページ: 1568-1574

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Efficient transfection of primarily cultured porcine embryonic fibroblasts using the Amaxa Nucleofection System^<TM>2007

    • 著者名/発表者名
      Nakayama A
    • 雑誌名

      Cloning and Stem Cells 9

      ページ: 523-534

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] One-step generation of recombineering constructs by asymmetric-end ligation and negative selection2007

    • 著者名/発表者名
      Ohtsuka M
    • 雑誌名

      Analytical Biochemistry 360

      ページ: 306-308

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 成熟培養中の振動がブタ卵子の体外成熟および単為発生に及ぼす影響2009

    • 著者名/発表者名
      溝部大和
    • 学会等名
      第110回日本畜産学会
    • 発表場所
      日本大学
    • 年月日
      2009-03-29
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書 2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Effect of latrunculin A on developmental potentials of electrically activated porcine oocytes2009

    • 著者名/発表者名
      Wang JH
    • 学会等名
      第110回日本畜産学会
    • 発表場所
      日本大学
    • 年月日
      2009-03-27
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 凍結保存液へのトレハロース添加がクラウン系ミニブタ凍結融解精子の性状に及ぼす影響2009

    • 著者名/発表者名
      末友雅士
    • 学会等名
      第91回日本養豚学会
    • 発表場所
      日本大学
    • 年月日
      2009-03-19
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] ブタ体細胞のin vitro脱分化誘導2009

    • 著者名/発表者名
      小澤明央
    • 学会等名
      第12回日本異種移植研究会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2009-03-07
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書 2008 研究成果報告書
  • [学会発表] バルプロ酸がミニブタ体細胞クローン胚の体外発生に及ぼす影響2009

    • 著者名/発表者名
      森寛倫
    • 学会等名
      第12回日本異種移植研究会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2009-03-07
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] クラウン系体細胞クローン雌ミニブタの発育および繁殖能力について2009

    • 著者名/発表者名
      津田健一郎
    • 学会等名
      第12回日本異種移植研究会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2009-03-07
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] バルプロ酸がミニブク体細胞クローン胚の体外発生に及ぼす影響2009

    • 著者名/発表者名
      森寛倫
    • 学会等名
      第12回日本異種移植研究会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2009-03-07
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] α-1, 3-galactosyltransferase遺伝子ノックアウトベクターを導入したクラウン系ミニブタ体細胞に由来するクローン胚の体内発生能の検討2009

    • 著者名/発表者名
      日巻武裕
    • 学会等名
      第12回日本異種移植研究会
    • 発表場所
      鹿児島大学
    • 年月日
      2009-03-07
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 全ゲノム増幅法を用いたブタ胚盤胞におけるtransgene 及びtargeted allele 検出の試み2008

    • 著者名/発表者名
      赤坂恵理
    • 学会等名
      第31回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2008-12-11
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] ブタ初期化因子を非侵襲的に探索するために有効なテスター細胞株の開発2008

    • 著者名/発表者名
      小澤明央
    • 学会等名
      第31回日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2008-12-11
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] ブタ初期化因子を非侵襲的に探索するために有効なテスター細胞株の開発2008

    • 著者名/発表者名
      小澤明央
    • 学会等名
      第31回日本分子生物学会/第81回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2008-12-11
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 全ゲノム増幅法を用いたブタ胚盤胞におけるtransgene及びtargeted allele検出の試み2008

    • 著者名/発表者名
      赤坂恵理
    • 学会等名
      第31回日本分子生物学会/第81回日本生化学会合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2008-12-11
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 培地の浸透圧が超音波照射により活性化したブタ卵子およびミニブタ体細胞クローン胚の体外発生に及ぼす影響2008

    • 著者名/発表者名
      溝部大和
    • 学会等名
      第59回西日本畜産学会および第1回日本暖地畜産学会
    • 発表場所
      佐賀大学
    • 年月日
      2008-10-26
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 培地の浸透圧が超音波照射により活性化したブタ卵子およびミニブク体細胞クローン胚の体外発生に及ぼす影響2008

    • 著者名/発表者名
      溝部大和
    • 学会等名
      第59回西日本畜産学会および第1回日本暖地畜産学会
    • 発表場所
      佐賀大学
    • 年月日
      2008-10-26
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 凍結乾燥精子を用いた黒ブタ顕微授精胚の作出に関する研究 : 精子凍結乾燥培地の検討2008

    • 著者名/発表者名
      北地秀基
    • 学会等名
      第90回日本養豚学会
    • 発表場所
      沖縄県男女共同参画センター
    • 年月日
      2008-10-24
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 全ゲノム増幅法(RCA法)を用いたブタ胚盤胞におけるtransgene検出の試み2008

    • 著者名/発表者名
      佐藤正宏
    • 学会等名
      第101回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      九州大学
    • 年月日
      2008-09-20
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書 2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 性成熟および未性成熟個体由来ウシ卵子の体外成熟におけるリコンビナントインスリン様成長因子I型添加の影響と同因子レセプター遺伝子の発現2008

    • 著者名/発表者名
      脇詩織
    • 学会等名
      第101回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      九州大学
    • 年月日
      2008-09-20
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] siRNA発現ベクターDNAを導入したクラウン系ミニブタ体細胞からのクローン胚作出と標的遺伝子発現抑制2008

    • 著者名/発表者名
      池海英
    • 学会等名
      第101回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      九州大学
    • 年月日
      2008-09-19
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] ミニブタ体細胞核移植胚におけるOct-3/4遺伝子発現の非侵襲的観察2008

    • 著者名/発表者名
      森寛倫
    • 学会等名
      第101回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      九州大学
    • 年月日
      2008-09-18
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書 2008 研究成果報告書
  • [学会発表] Cortical granules behaviors of pig oocytes activated in vitro by ultrasound or electricity2008

    • 著者名/発表者名
      Wang JH
    • 学会等名
      第101回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      九州大学
    • 年月日
      2008-09-18
    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
  • [学会発表] 超音波照射後に異なる濃度のシクロヘキシミドで種々の時間処理したブタ卵子の単為発生2008

    • 著者名/発表者名
      森寛倫
    • 学会等名
      第109回日本畜産学会
    • 発表場所
      常盤大学
    • 年月日
      2008-03-29
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書 2007 実績報告書
  • [学会発表] 超音波活性化後のトリコスタチンA処理が遺伝子改変細胞を用いたミニブタ体細胞核移植胚の体外発生に及ぼす影響2008

    • 著者名/発表者名
      日巻武裕
    • 学会等名
      第109回日本畜産学会
    • 発表場所
      常盤大学
    • 年月日
      2008-03-27
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 凍結保存前処理液への緑茶由来ポリフェノール添加がクラウン系ミニブタ精子の凍結保存に及ぼす影響2008

    • 著者名/発表者名
      北地秀基
    • 学会等名
      第89回日本養豚学会
    • 発表場所
      東京農業大学
    • 年月日
      2008-03-17
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Endo-β-galactosidase Cを全身的に発現するトランスジェニックマウスの作製とその解析2007

    • 著者名/発表者名
      渡部聡
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2007-12-13
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 成熟培地へのインスリン様成長因子-I型添加がウシ卵子の体外成熟・体外受精およびその後の体外発生能に及ぼす影響2007

    • 著者名/発表者名
      脇詩織
    • 学会等名
      第58回西日本畜産学会
    • 発表場所
      山口大学
    • 年月日
      2007-10-27
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 異なる濃度のカルシウムを含む培地中において超音波を照射されたブタ卵子の活性化および単為発生2007

    • 著者名/発表者名
      森寛倫
    • 学会等名
      第100回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      東京大学
    • 年月日
      2007-10-21
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書
  • [学会発表] 異なる濃度のカルシウムを含む培地中において超音波を照射されたブタ卵子の活性化および単為発生2007

    • 著者名/発表者名
      森寛倫
    • 学会等名
      第100回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      東京大学.
    • 年月日
      2007-10-21
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 成熟・受精・発生過程におけるブタ卵細胞膜のα-ガラクトース残基の発現について2007

    • 著者名/発表者名
      池海英
    • 学会等名
      第100回日本繁殖生物学会
    • 発表場所
      東京大学
    • 年月日
      2007-10-20
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] 超音波により活性化したブタ卵子の単為発生に及ぼすシクロヘキシミド処理の影響2007

    • 著者名/発表者名
      森寛倫
    • 学会等名
      第108回日本畜産学会
    • 発表場所
      岡山大学
    • 年月日
      2007-09-26
    • 関連する報告書
      2008 研究成果報告書 2007 実績報告書
  • [学会発表] 媒精時の回転培養はブタ体外成熟・体外受精卵の多精子受精率の減少に有効である2007

    • 著者名/発表者名
      北地秀基
    • 学会等名
      第108回日本畜産学会
    • 発表場所
      岡山大学
    • 年月日
      2007-09-26
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
  • [学会発表] Flow-FISH法によるブタ精子DNAのテロメア長検出に関する研究2007

    • 著者名/発表者名
      吉田光敏
    • 学会等名
      第143回日本獣医学会
    • 発表場所
      つくば国際会議場
    • 年月日
      2007-04-05
    • 関連する報告書
      2007 実績報告書

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公開日: 2007-04-01   更新日: 2016-04-21  

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