がん化における新規Chk1リン酸化機構の役割

• 研究課題/領域番号: 19590328
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態医化学
• 研究機関: 愛知県がんセンター研究
• 研究代表者: 後藤 英仁 愛知県がんセンター(研究所), 発がん制御研究部, 室長 (20393126)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2008
• 研究課題ステータス: 完了 (2008年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2008年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2007年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 分子腫瘍学 / 細胞周期 / チェックポイント / Chk1 / サイクリン依存性キナーゼ / ATR / プロテインキナーゼ / がん化 / リン酸化

研究概要

Chk1は、DNA複製/障害チェックポイントの際にATRによってそのセリン317およびセリン345がリン酸化されて活性化される。今回、我々は、チェックポイント反応の際、Chk1のセリン286およびセリン301がサイクリン依存性キナ-ゼ2(Cdk2)によってリン酸化させることを明らかにした。また、Cdk2依存性のリン酸化反応とATR依存性のリン酸化反応は、Chk1の同一分子上で引き起こされるが、これらの2つの反応の間に強い依存性は認められなかった。以上の結果は、Chk1の機能制御は、多くの部位のリン酸化反応を介して制御されていることを示唆している。

研究成果

• [雑誌論文] Chk1 phosphorylation at Ser286 and Ser301 occurs with both stalled DNA replication and damage checkpoint stimulation (2008)
  • 著者名/発表者名: Ikegami Y., Goto H., Kiyono T., Enomoto M., Kasahara K., Tomono Y., Tozawa K., Monta A., Kohn K. Inagaki M.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 377 ページ: 1227-1231
• [雑誌論文] Myosin phosphatase-targeting subunit 1 regulates mitosis by antagonizing polo-like kinase 1 (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamashiro S., Yamakita Y., Totsukawa G., Goto H., Kaibuchi K., Ito M., Hartshorne D.J., Matsumura F.
  • 雑誌名: Dev. Cell. 14 ページ: 787-797
• [雑誌論文] Protein phosphatase 4 catalytic subunit regulates Cdk1 activity and microtubule organization via NDEL1 dephosphorylation (2008)
  • 著者名/発表者名: Toyo-oka K., Mori D., Yano Y., Shiota M., Iwao H., Goto H., Inagaki M., Hiraiwa N., Muramatsu M., Wynshaw-Bons A., Yoshiki A., Hirotsune S.
  • 雑誌名: J Cell Biol. 180 ページ: 1133-1147
• [雑誌論文] Chk1 phosphorylation at Ser286 and Ser301 occurs with both stalled DNA replication and damage checkpoint stimulation (2008)
  • 著者名/発表者名: Yosuke Ikegami, et al.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 377 ページ: 1227-1231
  • 査読あり
• [雑誌論文] Myosin phosphatase-targeting subunit 1 regulates mitosis by antagonizing polo-like kinase 1 (2008)
  • 著者名/発表者名: Shigeko Yamashiro, et al.
  • 雑誌名: Dev. Cell 14 ページ: 787-797
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protein phosphatase 4 catalytic subunit regulates Cdk1 activity and microtubule organization via NDEL1 dephosphorylation (2008)
  • 著者名/発表者名: Kazuhito Toyo-oka, et al.
  • 雑誌名: J. Cell Biol. 180 ページ: 1133-1147
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protein phosphatase 4 catalytic subunit regulates Cdk1 activity and microtubule organization via NDEL1 dephosphorylation. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kazuhiro Toyooka, et. al.
  • 雑誌名: J. Cell Biol. 180 ページ: 1133-1147
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of a site- and phosphorylation state-specific antibody (2007)
  • 著者名/発表者名: Goto H. and Inagaki M.
  • 雑誌名: Nature Protocols 2 ページ: 2574-2581
• [雑誌論文] Production of a site-and phosphorylation state-specific antibody. (2007)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Goto, et. al.
  • 雑誌名: Nature Protocols 2 ページ: 2574-2581
  • 査読あり
• [学会発表] Chk1 phosphorylation by Cyclin-dependent kinases (Cdks) promotes mitotic entry(招待口演) (2009)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Goto & Masato Enomoto
  • 学会等名: Cell Cycle and Cell Architecture (MEXT Priority Research Project Cell Proliferation Control International symposium)
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2009-06-26
• [学会発表] Chk1 phosphorylation by Cyclin-dependent kinase 1 promotes mitotic entry(ポスター) (2008)
  • 著者名/発表者名: Goto H., Enomoto M, Tomono Y., Kasahara K., Ikegami Y., Tsujimura K., Kiyono T., Inagaki M.
  • 学会等名: The 48th Annual Meeting of the American Society for Cell Biology
  • 発表場所: SanFrancisco, CA, USA
  • 年月日: 2008-12-14
• [学会発表] Chk1 phosphorylation by Cyclin-dependent kinase 1 promotes mitoticentry (2008)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Goto, et al.
  • 学会等名: The 48th Annual Meeting of the American Society for Cell Biology
  • 発表場所: サンフランシスコ、アメリカ合衆国
  • 年月日: 2008-12-14
• [学会発表] Chk1 phosphorylation by Cyclin-dependentkinases (Cdks)(シンポジウム) (2008)
  • 著者名/発表者名: Hidemasa Goto, Masaki Inagaki
  • 学会等名: 第67回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2008-10-28
• [学会発表] Chk1 phosphorylation by Cyclin-dependent kinases (Cdks)(ポスター) (2008)
  • 著者名/発表者名: Enomoto M., Goto H., Ikegami Y., Kasahara K., Tomono Y., Tsujimura K., Kiyono T., Inagaki, M.
  • 学会等名: International Symposium on Chromosome Dynamics in Ise
  • 発表場所: Shima, Mie, Japan
  • 年月日: 2008-05-29
• [学会発表] サイクリン依存性キナ-ゼ(Cdk)によるChk1のリン酸化反応(ワークショップ) (2007)
  • 著者名/発表者名: 後藤英仁, 稲垣昌樹
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会 合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-11
• [学会発表] サイクリン依存性キナーゼ(Cdk)によるChk1のリン酸化反応 (2007)
  • 著者名/発表者名: 後藤 英仁, 他
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会 合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2007-12-11
• [学会発表] Functional analyses of mitotic kinases in chromosomal instability (The Incitement Award ofJCA)(ワークショップ) (2007)
  • 著者名/発表者名: Goto H.
  • 学会等名: 第65回日本癌学会総会
  • 発表場所: ワークショップ
  • 年月日: 2007-10-05
• [学会発表] サイクリン依存性キナ-ゼによるChk1リン酸化反応(ワークショップ) (2007)
  • 著者名/発表者名: 後藤英仁, 榎本将人, 池上要介, 山口知也, 友野靖子, 清野透, 稲垣昌樹
  • 学会等名: 第40回日本発生生物学会・第59回日本細胞生物学会合同大会
  • 年月日: 2007-05-30
• [図書] 蛋白質核酸酵素54巻, 4号 リン酸化によるM期制御-染色体サイクル ゲノムの恒常性維持、敬称とダイナミックス-(正井久雄, 升方久夫, 釣本敏樹, 仁木宏典, 篠原彰, 編) (2009)
  • 著者名/発表者名: 笠原広介,, 後藤英仁
• [図書] 実験医学, 26巻, 18号 Close UP実験法特定部位の翻訳後修飾を特異的に認識する抗体作製法-抗リン酸化(ペプチド)抗体作製法 (2008)
  • 著者名/発表者名: 後藤英仁, 稲垣昌樹
• [図書] 図説 分子病態学(一瀬白帝, 鈴木宏治, 編) 細胞の構造と分裂周期 (2008)
  • 著者名/発表者名: 笠原広介, 後藤英仁, 稲垣昌樹
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] 図説 分子病態学(一瀬白帝、鈴木宏治 編) (2008)
  • 著者名/発表者名: 笠原 広介, 他
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] 分子細胞治療 6巻, 1号 リン酸化-特集 蛋白質修飾- (2007)
  • 著者名/発表者名: 後藤英仁, 稲垣昌樹
  • 出版者: 先端医学社
• [備考] 2007年度 日本癌学会 奨励賞